液態發酵多糖對小鼠若干行為學指標及免疫器官指數的影響

蔡創威，黃曉月，聶芳紅,*，徐德峰,2,3,*，郝江偉

（1.廣東海洋大學食品科技學院，廣東省水產品加工與安全重點實驗室，廣東省海洋食品工程技術研究中心，水產品深加工廣東普通高等學校重點實驗室，廣東 湛江 524088；2.華南理工大學食品科學與工程學院，廣東 廣州 510640；3.無限極（中國）有限公司技術中心，廣東 廣州 510665）

液態發酵多糖對小鼠若干行為學指標及免疫器官指數的影響

蔡創威1，黃曉月1，聶芳紅1,*，徐德峰1,2,3,*，郝江偉1

（1.廣東海洋大學食品科技學院，廣東省水產品加工與安全重點實驗室，廣東省海洋食品工程技術研究中心，水產品深加工廣東普通高等學校重點實驗室，廣東 湛江 524088；2.華南理工大學食品科學與工程學院，廣東 廣州 510640；3.無限極（中國）有限公司技術中心，廣東 廣州 510665）

為評價蟲草菌（Cordyceps sinensis）CAMT 63341液態發酵多糖對小鼠生長、情緒、認知和免疫的影響，將60 只健康雄性昆明小鼠隨機分成空白對照、靈芝多糖對照和Cordyceps sinensis CAMT 63341發酵多糖高、中、低劑量飼喂組連續喂養30 d，然后行高架十字迷宮、穿梭箱、遲發型超敏反應實驗，并記錄小鼠體質量和免疫器官指數。結果表明：與空白對照組相比，Cordyceps sinensis CAMT 63341發酵多糖可劑量依賴性促進小鼠生長，增加高架迷宮開放臂次數和延長停留時間，增強穿梭箱實驗中主動回避能力和縮短被動回避潛伏期，提升胸腺和脾臟器官指數，其中，高劑量組達到顯著（P＜0.05）或極顯著水平（P＜0.01），接近靈芝多糖對照組，提示Cordyceps sinensis CAMT 63341液態發酵多糖具有一定的促進生長、改善情緒、增強認知和提升免疫功能。

Cordyceps sinensis CAMT 63341；液態發酵；多糖；情緒；認知；免疫

冬蟲夏草是由麥角科真菌冬蟲夏草菌（Cordyceps sinensis（Berk.）Sacc.）侵染蝙蝠蛾科昆蟲幼蟲而形成的僵蟲與子座的結合體。作為我國傳統的滋補性中藥材，冬蟲夏草具有多種藥理功效，《中華人民共和國藥典》中指出冬蟲夏草性平、味甘，歸肺、腎經，具補肺益腎、止血化痰功能，主治久咳虛喘、勞嗽咯血、陽痿遺精、腰膝酸痛[1]。除此之外，現代研究證明冬蟲夏草還具有抗腫瘤、抗細菌、抗病毒、抗炎、抗纖維化、護肝、調節免疫和內分泌等多種藥理作用[2-4]。鑒于冬蟲夏草對人體獨特的生理活性，國內外需求量不斷增加，但冬蟲夏草多分布在我國西藏、青海、云南、四川等海拔3 500 m以上的高寒地帶，受生長環境的制約，天然蟲草產量有限，加之過度采挖，導致其產量逐年銳減，遠低于市場需求，因此培育開發功效顯著的冬蟲夏草代用品既是保護野生蟲草資源，又是科學開發利用功效組分的必然選擇。目前，在分離天然蟲草內生優良菌株的基礎上，采用仿生手段人工接種柞蠶、工廠化栽培和菌絲體液態發酵是大規模獲取蟲草活性物質的主要方式，且多項研究證實，人工蟲草在化學成分、功效價值等方面與天然蟲草無顯著差異。錢正明等[5]建立了冬蟲夏草中7 類主要化學成分的分析方法，比較分析了培植冬蟲夏草和野生冬蟲夏草的化學成分，結果顯示兩者小分子化合物種類一致，多糖分子質量分布一致。

從本質上講，冬蟲夏草的功效歸因于體內寄生菌的代謝產物?，F代分析表明，冬蟲夏草主要含有多糖、核苷、蛋白質、肽、甾醇、酶等化學成分，而多糖作為生物活性成分之一，具有調節免疫、增強記憶、抗腫瘤、抗黏附、抗氧化、降血糖等活性[6-12]。液態發酵作為現代生物技術的重要組成部分，是將生物科技轉化為生物經濟的重要手段，目前通過液態發酵制備蛹蟲草活性物質已有較多報道，且證實發酵蛹蟲草菌絲體的有效成分、藥理作用及臨床效果與冬蟲夏草相似[13-17]。冬蟲夏草區系中的真菌物種是一類非常重要的生物資源，具有重要的開發潛力。本課題組前期從藏區冬蟲夏草中分離出一株真菌，經形態、生理生化及分子鑒定為蟲草菌，本研究在Cordyceps sinensis CAMT 63341液態發酵制備生物多糖的基礎上，以小鼠為實驗對象，通過經典行為學實驗，初步評估該菌株對小鼠生長、免疫、認知和情緒的影響，為Cordyceps sinensis CAMT 63341菌種資源的開發利用提供理論支持。

1 材料與方法

1.1 菌株與實驗動物

Cordyceps sinensis CAMT 63341菌株分離自西藏天然蟲草子座；SPF級健康雌性昆明小鼠，由廣州中醫藥大學實驗動物中心提供，動物合格證號：SCXK（粵）2013-0020。

1.2 材料與試劑

靈芝多糖（多糖質量分數3 3.2 5%） 杭州眾藝康菇生物技術有限公司；2,4-二硝基氯苯（2,4-dinitrofluorobenzene，DNFB） 北京索萊寶科技有限公司。

1.3 儀器與設備

小鼠穿梭箱 上海多毅實業有限公司；THZ-82型水浴恒溫振蕩器 江蘇金壇市榮華儀器制造有限公司；BS224S電子天平 賽多利斯（北京）科學儀器有限公司；4120型手握打孔器 無錫亞美科技有限公司。

1.4 方法

1.4.1 Cordyceps sinensis CAMT 63341發酵粗多糖的提取

Cordyceps sinensis CAMT 63341保存于PDA斜面培養基，常規PDA轉接活化后，以馬鈴薯汁作為培養基[16-17]，28 ℃、150 r/min培養72 h制得發酵液，發酵液經5 000 r/min離心10 min取上清液，之后按體積比1∶3加入預冷至4 ℃的95%乙醇靜置12 h，8 000 r/min離心10 min取沉淀作為發酵粗多糖，苯酚-硫酸法測定多糖含量為30.23%。

1.4.2 動物分組及給藥

動物飼養條件：室溫（22±2）℃，相對濕度40%～60%，自然晝夜交替，飼料來源于廣州中醫藥大學，適應性飼養3 d后，選取體質量（22±2）g小鼠60 只進行正式實驗，分為5 個實驗組，每組12 只，空白對照組用蒸餾水作為飲用水；高、中、低劑量組分別自由飲用1.0、0.5、0.1 g/mL 1.4.1節所述粗多糖溶液，靈芝多糖對照組飲用1 g/mL靈芝多糖溶液，連續喂養小鼠30 d，對飲水量進行量取記錄，統計每日每只小鼠的平均飲水量，換算成平均每只小鼠多糖攝入量。

1.4.3 動物行為學指標測定

1.4.3.1 一般狀態觀察及體質量變化

一般狀態觀察于每日飼喂多糖溶液前，仔細觀察小鼠的精神狀態、皮毛色澤、活動度及糞便情況，每隔10 d稱體質量1 次并記錄數據，比較各組體質量變化。

1.4.3.2 抗抑郁效果評價

采用經典高架十字迷宮實驗方法[19-21]評價多糖對實驗小鼠情緒的影響，小鼠高架十字迷宮由2 個相對的開放臂（45 cm×10 cm）、2 個相對閉合臂（45 cm×10 cm×50 cm）、一個連接4 只臂的中央平臺（10 cm×10 cm）組成，此二者互相垂直成為“十”形狀，迷宮離地面50 cm；人工記錄小鼠進入開放臂次數、閉合臂次數和小鼠滯留在開放臂的時間、閉合臂的時間及小鼠進入中央開闊平臺的次數、中央區停留時間。計算小鼠進入開放臂的次數占進入兩臂次數總和的比例和開放臂滯留總時間占在兩臂停留時間總和的比例。

1.4.3.3 認知能力影響的評價

采用經典小鼠穿梭箱實驗考察多糖對小鼠學習記憶的影響，將小鼠放入穿梭箱，根據參考文獻[22-23]和儀器說明書設定追蹤參數：適應時間5 s、訓練次數10 次、間隔時間3 s、聲光刺激5 s、電擊時間10 s。全部訓練結束，對小鼠在穿梭箱內的活動軌跡進行分析，求得小鼠穿梭箱主動逃避次數、被動逃避次數、主動逃避時間、被動逃避時間。連續進行5 d穿梭箱實驗，記錄分析實驗數據。

1.4.3.4 對免疫器官影響的評價

采用遲發性免疫反應和測定免疫器官指數，考察多糖對小鼠免疫器官的影響。遲發型超敏反應參照文獻[24-27]進行，用電動剃毛器對喂養了一個月后的小鼠背部進行除毛，1% DNFB丙酮溶液作為致敏劑均勻涂抹于脫毛部位，每日1 次，連續4 d，之后致敏劑10 μL均勻涂于左耳，24 h后處死小鼠，剪取左右兩只耳朵，用2 mm打孔器對兩耳朵的相同部位各取一耳片，稱質量并計算兩耳片質量的差值。免疫器官臟器指數測定參照文獻[25]進行，解剖小鼠，取出其胸腺脾臟，分別對其稱質量，按照下式計算出各組胸腺和脾臟指數。

1.5 數據統計分析

結果用 ±s表示，采用SPSS 16.0軟件中單因素方差分析程序進行統計學差異分析，采用最小顯著極差法進行多重比較。

2 結果與分析

2.1 Cordyceps sinensis CAMT 63341發酵多糖對小鼠生長情況的影響

表觀狀態可直觀反映出受試物對小鼠生長發育的影響，實驗表明所有小鼠在喂養過程中進食飲水正常，毛發濃密有光澤，活潑好動有活力，對外界刺激反應靈敏，四肢有力，無死亡現象，證明蟲草、靈芝多糖對小鼠無表觀可見不良影響。由表1體質量增加趨勢可以看出，與空白對照組相比，靈芝多糖對照組在整個實驗周期內可促進小鼠生長，在中后期達到顯著性水平（P＜0.05），Cordyceps sinensis CAMT 63341發酵多糖也有促進動物生長的作用，且整體呈劑量依賴性，其中高劑量組效果接近靈芝多糖組。

表1 Cordyceps sinensis CAMT 63341發酵多糖對小鼠體質量的影響Table 1 Effect of Cordyceps sinensis CAMT 63341 polysaccharides on body weight in mice

2.2 Cordyceps sinensis CAMT 63341發酵多糖對實驗小鼠情緒的影響

表2 Cordyceps sinensis CAMT 63341發酵多糖對小鼠高架十字迷宮行為指標的影響Table 2 Effect of Cordyceps sinensis CAMT 63341 on behavior performances of mice in elevated plus maze test

高架十字迷宮實驗廣泛應用于檢測動物的抑郁行為和評價藥物的抗抑郁效果，以小鼠在開放臂中的滯留時間和進入開放臂次數反映其抑郁狀態的強弱[18-19]。由表2可知，靈芝多糖對照組在進入開放臂次數和中央區停留時間上顯著高于空白對照組（P＜0.05），Cordyceps sinensis CAMT 63341發酵多糖組對小鼠抗抑郁效果存在劑量依賴性提高，其中高劑量組有統計學差異（P＜0.05），其效果接近靈芝多糖組。郝文麗[28]研究表明，枸杞多糖對小鼠神經系統有一定的影響，可以顯著抑制小鼠的自發性活動，延長戊巴比妥鈉的安眠作用時間，證明枸杞多糖具有一定抗焦慮效果，劉勐等[29]研究表明靈孢多糖具有一定的抗抑郁作用，而本研究進一步證明所分離菌株的液態發酵多糖具有抗抑郁效果，豐富了多糖改善情緒的研究內容。

2.3 Cordyceps sinensis CAMT 63341發酵多糖對小鼠認知能力的影響

基于穿梭箱聲光刺激的主動逃避和電擊的被動逃避已被廣泛用于評價小鼠的學習記憶能力，在一個訓練周期內，小鼠主動逃避時間（主動逃避潛伏期）和被動逃避時間（被動逃避潛伏期）越短，而主動和被動逃避次數越多，表明小鼠學習記憶能力越強[30]。聲、光、電刺激下的小鼠穿梭箱主動逃避和被動逃避實驗結果見圖1～3。

圖1 Cordyceps sinensis CAMT 63341發酵多糖對小鼠主動逃避次數的影響Fig. 1 Effect of Cordyceps sinensis CAMT 63341 polysaccharides on the number of active avoidance responses in mice

由圖1可知，在為期5 d的學習記憶訓練中，小鼠主動逃避次數逐漸增加，表明實驗小鼠對逃避不利刺激獲得了記憶，實驗周期內主動逃避次數反映了記憶速率和正確率。至第5天，在記憶速率和正確率上所有多糖組都比空白對照組高，其中靈芝多糖對照組小鼠主動逃避次數最多，與空白對照組相比存在顯著性差異（P＜0.05），Cordyceps sinensis CAMT 63341發酵多糖飼喂組可劑量依賴性提升小鼠記憶能力，高劑量組與空白對照組相比也存在顯著性差異（P＜0.05），且效果僅次于靈芝多糖對照組。

圖2 Cordyceps sinensis CAMT 63341發酵多糖對小鼠在穿梭箱中被動逃避電擊次數的影響Fig. 2 Effect of Cordyceps sinensis CAMT 63341 polysaccharides on the number of passive avoidance responses to electronic shock in mice

被動逃避能力進一步反映了小鼠的學習記憶能力，可由逃避前電擊時間和逃避次數定量表述，一定實驗周期內電擊時間越短、逃避次數越多，表明動物記憶能力越強[31]。由圖2可知，各組小鼠5 d內被電擊次數都隨訓練時間延長而減少，所有多糖組都比空白對照組被電擊次數少，Cordyceps sinensis CAMT 63341發酵多糖高劑量組與靈芝多糖對照組被電擊次數最少。

圖3 Cordyceps sinensis CAMT 63341發酵多糖對小鼠被電擊時間的影響Fig. 3 Effect of Cordyceps sinensis CAMT 63341 polysaccharides on electric shock time in mice

同時，實驗各組的小鼠被電擊時間都隨著訓練時間延長而不同程度減少（圖3），且所有多糖組都比空白對照組電擊時間短，其中靈芝多糖組電擊時間最短，Cordyceps sinensis CAMT 63341發酵多糖高劑量組次之，定量分析表明第5天除低劑量組相比空白對照組未達到顯著性差異外，其余各組差異均達到顯著性（P＜0.05）。

2.4 Cordyceps sinensis CAMT 63341發酵多糖對小鼠免疫器官指數的影響

表3 Cordyceps sinensis CAMT 63341發酵多糖對小鼠免疫器官指數及兩耳質量的影響（n＝ 12）Table 3 Effect of Cordyceps sinensis CAMT 63341 polysaccharides on immune organ indexes and weight difference between two ears in mice (n= 12)

小鼠免疫器官是免疫系統的重要組成部分，胸腺和脾臟指數是評價動物免疫功能的一項指標[32]。由表3可知，所有多糖組相較空白對照組的小鼠胸腺和脾臟器官指數都有不同程度提升，且基本存在劑量依賴性，其中高劑量Cordyceps sinensis CAMT 63341發酵多糖組的脾臟指數有顯著性提高（P＜0.05），接近靈芝多糖對照組。多項研究表明，蟲草多糖能夠增高小鼠脾臟指數和胸腺指數，減輕小鼠由藥物使用導致的免疫器官損傷，改善DNFB誘發的小鼠遲發型超敏反應[17,27,32]。遲發型超敏反應以T淋巴細胞為免疫應答的超敏反應，反映其T細胞的功能，被攻擊的小鼠耳廓腫脹程度與T細胞功能強弱呈正相關。本實驗用DNFB致敏劑涂抹小鼠，使其刺激T淋巴細胞增殖、分化，產生免疫應答，結果顯示所有多糖組的小鼠左右兩耳片質量差值顯著高于空白對照組（P＜0.05），且高劑量Cordyceps sinensis CAMT 63341發酵多糖組和靈芝多糖對照組差異達到極顯著水平（P＜0.01），整體上反映了Cordyceps sinensis CAMT 63341發酵多糖具有一定的免疫調節作用。

3 討 論

已有的研究充分表明，冬蟲夏草對人體具有多重生理活性，但天然的資源遠遠低于市場需求，目前菌絲體液態發酵是大規模獲取蟲草活性物質的主要方式。從本質上講，冬蟲夏草的功效歸因于體內寄生菌的代謝產物，多糖作為其生物活性成分之一，具有調節免疫、增強記憶、抗腫瘤、抗黏附、抗氧化、降血糖等活性[6-12]，但關于蛹蟲草多糖改善情緒和增強學習記憶的研究相對較少。因此，本研究在Cordyceps sinensis CAMT 63341前期液態發酵制備生物多糖的基礎上，重點評估了Cordyceps sinensis CAMT 63341發酵多糖對小鼠情緒和認知能力的影響，證明所得多糖不僅具有抗抑郁效果，而且可顯著提高小鼠學習記憶能力，拓寬了蟲草多糖的利用范圍，為Cordyceps sinensis CAMT 63341菌種資源的開發利用提供了參考。

情緒與學習記憶是腦的高級功能，其能力高低與機體免疫狀況密切相關，而且機體學習記憶能力障礙多與體內炎癥因子調控失衡有關，降低機體炎癥因子水平可增強機體免疫能力[9,11,19]。遲發型超敏反應和免疫器官指數作為衡量機體免疫水平的整體指標具有簡便直接的優點，是目前研究和評價機體免疫狀況的基本指標。多項研究表明，蟲草多糖能夠增高小鼠脾臟指數和胸腺指數，減輕小鼠由藥物使用導致的免疫器官損傷，改善DNFB誘發的小鼠遲發型超敏反應[17,27,32]，本研究結果進一步顯示Cordyceps sinensis CAMT 63341發酵多糖組的小鼠左右兩耳片質量差值顯著高于空白對照組，且高劑量組達到極顯著水平，整體上反映了所得蟲草多糖具有一定的免疫調節作用。鑒于免疫調節系統的復雜性，為探討學習記憶及情緒能力與免疫因子間的相關性，揭示Cordyceps sinensis CAMT 63341發酵多糖腦保健功效的生理生化機制，需進一步深入研究具體免疫因子與多糖攝入間的劑量-反應關系，構建起多糖攝入-免疫水平-宏觀行為學間的內在聯系。

Cordyceps sinensis CAMT 63341發酵多糖可促進小鼠生長，提高小鼠免疫能力，改善小鼠焦慮情緒，提升小鼠認知能力，有進一步開發利用的潛力。

[1] 國家藥典委員會. 中華人民共和國藥典(一部)[M]. 北京: 中國醫藥科技出版社, 2015: 115.

[2] SHASHIDHAR M G, GIRIDHAR P, SANKAR K U, et al. Bioactive principles from Cordyceps sinensis: a potent food supplement: a review[J]. Journal of Functional Foods, 2013, 5(3): 1013-1030.DOI:10.1016/j.jff.2013.04.018.

[3] CHEN X, WANG S A, NIE S P, et al. Properties of Cordyceps sinensis: a review[J]. Journal of Functional Foods, 2013, 5(2): 550-569. DOI:10.1016/j.jff.2013.01.034.

[4] ZHAO K, LI Y J, GAO S, et al. Effect of Dongchongxiacao (Cordyceps)therapy on contrast-induced nephropathy in patients with type 2 diabetes and renal insuff i ciency undergoing coronary angiography[J].Journal of Chinese Traditional Medicine, 2015, 35(4): 422-427.DOI:10.1016/S0254-6272(15)30119-9.

[5] 錢正明, 李文慶, 孫敏甜, 等. 冬蟲夏草化學成分分析[J]. 菌物學報,2016, 35(4): 476-490. DOI:10.13346/j.mycosystema.160010.

[6] HUANG Q L, SIU K C, WANG W Q, et al. Fractionation,characterization and antioxidant activity of exopolysaccharides from fermentation broth of a Cordyceps sinensis fungus[J].Process Biochemistry, 2013, 48(2): 380-386. DOI:10.1016/j.procbio.2013.01.001.

[7] LU W J, CHANG N C, JAYAKUNAR T, et al. Ex vivo and in vivo studies of CME-1, a novel polysaccharide purif i ed from the mycelia of Cordyceps sinensis that inhibits human platelet activation by activating adenylate cyclase/cyclic AMP[J]. Thrombosis Research, 2014, 134(6):1301-1310. DOI:10.1016/j.thromres.2014.09.023.

[8] WU D T, MENG L Z, WANG L Y, et al. Chain conformation and immunomodulatory activity of a hyperbranched polysaccharide from Cordyceps sinensis[J]. Carbohydrate Polymers, 2014, 110(22): 405-414. DOI:10.1016/j.carbpol.2014.04.044.

[9] MENG L Z, FENG K, WANG L Y, et al. Activation of mouse macrophages and dendritic cells induced by polysaccharides from a novel Cordyceps sinensis fungus UM01[J]. Journal of Functional Foods, 2014, 9: 242-253. DOI:10.1016/j.jff.2014.04.029.

[10] YAN J K, WANG W Q, WU J Y. Recent advances in Cordyceps sinensis polysaccharides: mycelial fermentation, isolation, structure,and bioactivities: a review[J]. Journal of Functional Foods, 2014, 6:33-47. DOI:10.1016/j.jff.2013.11.024.

[11] ZHANG J L, YU Y C, ZHANG Z F, et al. Effect of polysaccharide from cultured Cordyceps sinensis on immune function and antioxidation activity of mice exposed to60Co[J]. International Immunopharmacology, 2011, 11(12): 2251-2257. DOI:10.1016/j.intimp.2011.09.019.

[12] XIANG F X, LIN L M, HU M, et al. Therapeutic eff i cacy of a polysaccharide isolated from Cordyceps sinensis on hypertensive rats[J]. International Journal of Biological Macromolecules, 2016, 82:308-314. DOI:10.1016/j.ijbiomac.2015.09.060.

[13] CHEN X, WU J Y, GUI X T. Production and characterization of exopolysaccharides in mycelial culture of Cordyceps sinensis fungus Cs-HK1 with different carbon sources[J]. Chinese Journal of Chemical Engineering, 2016, 24(1): 158-162. DOI:10.1016/j.cjche.2015.06.016.

[14] WANG L Y, CHEONG K L, WU D T, et al. Fermentation optimization for the production of bioactive polysaccharides from Cordyceps sinensis fungus UM01[J]. International Journal of Biological Macromolecules, 2015, 79: 180-185. DOI:10.1016/j.ijbiomac.2015.04.040.

[15] LIN S, LIU Z Q, BAKER P J, et al. Enhancement of cordyceps polysaccharide production via biosynthetic pathway analysis in Hirsutella sinensis[J]. International Journal of Biological Macromolecules, 2016, 92: 872-880. DOI:10.1016/j.ijbiomac.2016.08.002.

[16] 于幫紅, 徐慧, 張傳博. 一株冬蟲夏草來源真菌的鑒定及抑菌活性檢測[J]. 中國實驗方劑學雜志, 2016, 22(8): 36-41. DOI:10.13422/j.cnki.syfjx.2016080036.

[17] 萬朋, 高俊濤, 沈楠, 等. 北冬蟲夏草對大鼠學習記憶能力的影響[J]. 食品研究與開發, 2016, 37(9): 11-13. DOI:10.3969/j.issn.1005-6521.2016.09.003.

[18] AMMON-TREIBERR S, GRECKSCH G, ANGELIDIS C, et al.Emotional and learning behaviour in mice overexpressing heat shock protein 70[J]. Neurobiology of Learning and Memory, 2008, 90: 358-364. DOI:10.1016/j.nlm.2008.04.006.

[19] WANG J, FLAISHER-GRINBERG S, LI S S, et al. Antidepressantlike effects of the active acidic polysaccharide portion of ginseng in mice[J]. Journal of Ethnopharmacology, 2010, 132(1): 65-69.DOI:10.1016/j.jep.2010.07.042.

[20] VIVIANI D, HAEGLER P, STRASSER D S, et al. Sex comparison on long-lasting behavioral and physiological disturbances induced by single shock experience in rats[J]. Physiology and Behavior, 2012,107: 243-251. DOI:10.1016/j.physbeh.2012.06.018.

[21] LI X L, ZHAO X, XU X, et al. Schisantherin A recovers Aβ-induced neurodegeneration with cognitive decline in mice[J]. Physiology &Behavior, 2014, 132:10-16. DOI:10.1016/j.physbeh.2014.04.046.

[22] POURMOTABBED A, NEDAEI S E, CHERAGHI M, et al. Effect of prenatal pentylenetetrazol-induced kindling on learning and memory of male offspring[J]. Neuroscience, 2011, 172: 205-211. DOI:10.1016/j.neuroscience.2010.11.001.

[23] 羅霞, 馬忠華, 胡明華, 等. 復合多糖對小鼠細胞免疫功能的影響[J]. 中國食品衛生雜志, 2016, 28(2): 186-191. DOI:10.13590/j.cjfh.2016.02.010.

[24] 蔡溱, 陳方劍, 陸松偉, 等. 冬蟲夏草膠囊對免疫抑制小鼠免疫功能的影響[J]. 解放軍藥學學報, 2014, 30(2): 118-121. DOI:10.3969/j.issn.1008-9926.2014.02.006.

[25] 劉春紅, 王曉慧, 高磊, 等. 植物乳桿菌C88聯合人參多糖的免疫調節作用[J]. 食品科學, 2016, 37(11): 202-207. DOI:10.7506/spkx1002-6630-201611035.

[26] 賁松彬, 張月, 孫冬梅, 等. 蟲草多糖蘋果果醋的保健功能評價[J]. 食品科學, 2014, 35(7): 232-237. DOI:10.7506/spkx1002-6630-201407046.

[27] 龔曉健, 季暉, 盧順高, 等. 人工蟲草多糖對小鼠免疫功能的影響[J].中國藥科大學學報, 2000, 31(1): 53-55.

[28] 郝文麗. 枸杞多糖對亞健康小鼠改善作用的研究[D]. 大慶: 黑龍江八一農墾大學, 2015: 28-33.

[29] 劉勐, 居春陽, 朱延梅, 等. 靈孢多糖輔助治療抑郁癥的作用及機制[J].現代生物醫學進展, 2014, 14(4): 656-662. DOI:10.13241/j.cnki.pmb.2014.04.014.

[30] 馬素好, 馬霄, 李鳳麗. 蟲草多糖對反復腦缺血再灌注模型小鼠學習記憶及腦組織SOD、MDA的影響[J]. 中醫學報, 2016, 31(8):1135-1139. DOI:10.16368/j.issn.1674-8999. 2016.08.320.

[31] 張倩, 張永明, 陸衛群, 等. 古尼蟲草多糖改善小鼠學習記憶作用的研究[J]. 營養學報, 2007, 29(4): 393-395. DOI:10.13325/j.cnki.acta.nutr.sin.2007.04.019.

[32] 孫勇, 楊文建, 馬寧, 等. 蛹蟲草子實體超細粉對小鼠免疫力及抗氧化功能的調節作用[J]. 食用菌學報, 2013, 20(1): 66-69.DOI:10.16488/j.cnki.1005-9873.2013.01.003.

Effect of Polysaccharides from Liquid Culture of Cordyceps sinensis CAMT 63341 on Behavior and Immunity Organ Indexes of Mice

CAI Chuangwei1, HUANG Xiaoyue1, NIE Fanghong1,*, XU Defeng1,2,3,*, HAO Jiangwei1
(1. Key Laboratory of Advanced Processing of Aquatic Products of Guangdong Higher Education Institution, Guangdong Provincial Engineering Technology Research Center of Marine Food, Guangdong Provincial Key Laboratory of Aquatic Product Processing and Safety, College of Food Science and Technology, Guangdong Ocean University, Zhanjiang 524088, China;2. School of Food Science and Engineering, South China University of Technology, Guangzhou 510640, China;3. Technique Center of Inf i nitus (China) Co. Ltd., Guangzhou 510665, China)

This investigation was undertaken to evaluate the effect of polysaccharides from the liquid culture of Cordyceps sinensis CAMT 63341 on body weight, emotion, cognition and immune function in mice. Totally 60 healthy male mice were randomly divided into blank control, positive control and experimental groups. Ganoderma lucidum polysaccharides were taken as positive control, and the animals in the experimental groups were given Cordyceps sinensis CAMT 63341 polysaccharides at high, middle, and low doses, respectively. After continuous feeding for 30 days, elevated plus maze test,shuttle box test, and delayed type hypersensitivity test were conducted and the body weight and thymus and spleen organ weight to body weight ratios were recorded. Compared with the blank control group, the mice fed with Cordyceps sinensis CAMT 63341 polysaccharides exhibited dose-dependently accelerated body weight gain, increased number of open arm entries and extended time spent on the open arm of the maze, improved active avoidance response and shortened latent period of passive avoidance in shuttle box test, and increased thymus and spleen organ weight to body weight ratios, with statistically signif i cant differences being observed in the high-dose group (P ＜ 0.05 or 0.01), which was similarly effective to Ganoderma lucidum polysaccharides. Therefore, polysaccharides from the liquid culture of Cordyceps sinensis CAMT 63341 can promote body weight gain, improve emotion, and enhance cognition and immune function in mice.

Cordyceps sinensis CAMT 63341; liquid-state fermentation; polysaccharides; emotion; recognition; immunity

10.7506/spkx1002-6630-201801035

TS252.54

A

1002-6630（2018）01-0232-06

蔡創威, 黃曉月, 聶芳紅, 等. Cordyceps sinensis CAMT 63341液態發酵多糖對小鼠若干行為學指標及免疫器官指數的影響[J]. 食品科學, 2018, 39(1): 232-237.

10.7506/spkx1002-6630-201801035. http://www.spkx.net.cn

CAI Chuangwei, HUANG Xiaoyue, NIE Fanghong, et al. Effect of polysaccharides from liquid culture of Cordyceps sinensis CAMT 63341 on behavior and immunity organ indexes of mice[J]. Food Science, 2018, 39(1): 232-237. (in Chinese with English abstract) DOI:10.7506/spkx1002-6630-201801035. http://www.spkx.net.cn

2016-10-10

中國博士后科學基金項目（2014M552203）；中央高?；究蒲袠I務費專項資金項目（20152M062）；

廣東省科技廳項目（2013B021100016）

蔡創威（1995—），男，學士，研究方向為食源活性物質高值化利用。E-mail：915067704@qq.com

*通信作者簡介：聶芳紅（1969—），女，高級實驗師，碩士，研究方向為食品毒理學與功能性評價。E-mail：15913577717@163.com

徐德峰（1978—），男，副教授，博士，研究方向為水產食品質量與安全控制。E-mail：13827198525@163.com