丹參的化學成份分離及其抗氧化活性分析

李宣怡

摘 要：目的對于丹參的根和根莖的化學成分的分離和相關抗氧化性的活性進行相關性的研究。方法分別去采用醇提法與水提法分離其脂溶性的化學成分以及水溶性的化學成份，這兩種成分分別是丹參酮和丹酚酸。運用相關的水楊酸與鄰苯三分法分別去分析丹參酮對于羥基自由基以及超氧陰離子清楚的能力。運用水楊酸法以及還原法分別的去分析其丹酚酸對于羥自由基清楚的能力和還原的能力。結果丹參酮清除其羥基自由基與超氧陰離子能力強，丹酚酸有著較強的清除其羥基自由基的相關的能力和還原能力。結論丹參根以及其根莖當中的含有的水溶性與脂溶性的相關的化學成份有很強的抗氧化活性和還原的能力，可以有效的去預防治療心血管等相關的疾病疾病，有很好的藥用價值，非常值得使用。

關鍵詞：丹參 化學成分 抗氧活性 討論與分析

中圖分類號：TS26 文獻標識碼：A 文章編號：1672-3791（2017）11（a）-0213-02

中醫的相關理論認為，丹參味苦，微寒，歸心、肝經，具有祛淤止痛、活血通經、清心除煩之功效。古有“一味丹參，功同四物”之說，可以適用于月經不調、經閉痛經、癮瘕積聚、胸腹刺痛、熱痹疼痛、瘡瘍腫痛、心煩不眠和肝脾腫大以及心絞痛等等。丹參和自身的相關制劑對于治療一些心腦血管的疾病或者是癌癥、中風以及肝炎等等包括抗衰老都有著十分好的效果。自從20世紀30年代以來，我們國內外的一些學者都分分對丹參相關活性成分與相關的藥理作用作出了大量的研究，并且還得到了大量的化學成分。

本文主要研究如何使用水提法和醇提法來對丹酚酸和丹參酮，經過分離之后就可以使用這些分離出來的成分對羥自由基以及超氧陰離子這些與抗氧性活性有關系的元素進行清除以及研究，最終為丹參治療相關疾病提供理論依據。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

HWS-24型電熱恒溫水浴鍋（上海泰坦科技股份有限公司）；磁力攪拌器（德國）；電子天平（梅特勒）；DHG-9005型的電熱鼓風干燥箱（北京恒泰）；7235型可見光的分光光度計（上海天普）；離心機）；組織粉碎機（上海勝啟儀表有限公司）；250ML的燒杯；專用移液器；ZKJ-1001型循環水真空抽氣泵（成都普龍科學儀器有限公司）；KQ3200型超聲波清洗器（上海精密）。

1.2 試藥

甲醇、丹參藥材、鹽酸、過豬油、三氯化鐵、鄰苯三分、水楊酸、鐵氰化鉀、乙醇、三羥甲基氨基甲、氧化氫、烷硫酸亞鐵檸檬酸。

2 丹參抗氧化的作用以及脂溶性化學成分的分離研究

2.1 丹參脂溶性的化合物（總丹參酮）提取

丹參中有許多有醫用價值的成分，其中比較常見的一種就是總丹參酮，提取總丹參酮主要使用下面的手法，首先搗碎選好的丹參，然后再進行過篩處理，在進行處理的過程要注意，必須要比較精密的稱出50g的丹參粉末放入到圓底燒瓶中去，確保全部放入之后還需要加入95%濃度的乙醇約250mL，經過了超聲提取20min之后，取出加熱回流提取1h，然后再加入95%的乙醇溶液250mL提取一次，將兩次的提取液進行充分的合并混勻，開始進行濃縮，靜置30min之后，等其晶體全部析出，再離心5min，最后放到干燥箱之中，進行干燥1h之后，最終得到一種紅色的固體0.308g，也就是要的總丹參酮。

2.2 配置丹參酮試劑

在對丹參酮溶液進行配置時的主要操作如下：首先需要精確的稱適量的丹參酮粉末，然后使用純凈的乙醇溶液進行溶解處理并分別配置出濃度為0.01%、0.02%以及0.05%的丹參酮溶液。其pH8.2的相關的緩沖液進行配置，然后再將該種溶液10mL和9mL的0.02mol/mL的氯化氫混合制成。

2.3 丹參酮對于一些油脂的抗氧化能力相關的測定

采用相關的烘箱法，稱取豬油20g，放到250mL的燒杯當中，然后加入相應的1mL的丹參酮溶液，充分的進行混勻，將其豬油放到恒溫箱當中，在70℃的條件下，每兩個小時運用玻璃杯攪拌一次，24h之后，運用紫外可見光光度計去測定其相關樣品中過氧化氫值。

2.4 丹參酮清除羥自由基的能力測定

運用水楊酸法，鐵離子可以和過氧化氫產生羥自由基。其試驗的方法：量取相應的1mL的丹參酮溶液，然后再加入0.5mL30%的過氧化氫溶液、適量的硫酸亞鐵溶液與適量的水楊酸溶液。然后需要進行的操作就等待加入的化學成分在充分反應大約30mL，然后使用可見光紫外光的光度計，將觀測范圍設定為510nm波長，然后以純凈的蒸餾水作為比較物并測定其相關的吸光度值，計算相應清除率。

2.5 丹參酮清除其超氧陰離子的能力測定

丹參酮有一個十分重要的作用就是用來清除超氧陰離子，而測定其清除超氧負離子能力運用的方法主要使用的就是鄰苯三分法。這種方法主要的操作如下：首先將實驗的環境調整問哦堿性，在這種環境下鄰苯三分就會發生自氧化反應，在自氧化的過程中，會有一種有色的中間反應產物產生，而這些有色的中間產物也會進一步去氧化其他的中間產物，這樣就可以保證自氧化過程不斷進行；待自氧化過程進行得差不多的時候就可以加入一些清潔劑，這樣就可以將超氧陰離子清除掉，從而抑制生成新的超氧負離子，最終抑制超氧負離子的自氧化過程。

3 丹參水溶性的成分分離和抗氧化活性的研究

3.1 水溶性的成分提取分離

將其丹參粉進行粉碎過篩，準確的稱取2g的粉末放到250mL的三角瓶當中，加100mL蒸餾水，100℃水水浴4h，取出室溫冷卻，備用。得到丹酚酸類化合物提取液。相當于10g/L。

3.2 丹酚酸清除其羥自由基的相關能力測定

運用水楊酸法，取相應的丹酚酸溶液1mL，然后按照相應的方法進行。結果顯示，濃度越高，其清除率也就越高。

3.3 相應的還原能力的測定

對于丹參來說，其一些成分還具有一定的還原能力，而測定其還原能力的原理也比較簡單，就是依據氧化還原反應的原理進行測定。還原能力越強的，在氧化還原反應中越能夠提供電子，提出出來的電子可以將正三價的鐵元素還原為正二價的鐵元素，也可以提供給自由基，與自由基進行相關的反應，使之變化為更加穩定的物質，而據化學領域的相關研究，化學成分的抗氧化能力與其還原能力有很大的相關性。對丹參成分的還原能力測定的主要試驗方法如下：移取其相關項中丹酚酸溶液1mL，然后加入0.2mL0.2mol/L的PBS溶液與0.5mL1%鐵氰化鉀溶液，然后就需要將溶液放在大約55攝氏度的水當中進行水浴操作約20分鐘。

4 結語

丹參是一種唇形科的鼠尾草植物，丹參的干燥根和根莖，在春秋二季的時候進行采挖并去除泥沙，干燥。在民間，又將其稱之為“紅根”。通過以上的一系列關于丹參的成分的各種研究表明：丹參酮在清除超氧負離子以及羥基的自由基方面有比較強的能力，而且在限定范圍內，其效果還有劑量正相關，也就是說，丹參是一種天然有效的用于清除自由基的清除劑。

參考文獻

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