松果菊苷通過調節Nrf2表達減輕H2O2致心肌細胞損傷的實驗研究*

楊 芳 吳澤幼 包 思 梁 敬

（南方醫科大學南方醫院，廣東 廣州 510515）

缺血/再灌注損傷所致心肌梗死是威脅我國居民生命健康的重大疾病之一，其發生與活性氧增多導致氧化應激損傷等相關［1］。目前，有效降低缺血心肌細胞氧化應激損傷是防治心肌梗死的有效手段之一。NF-E2相關因子2（Nrf2）通路可降低活性氧對心肌細胞毒性，緩解心肌細胞應激性氧化損傷，保護心肌細胞［2］。松果菊苷（ECH）具有抗氧化、誘導細胞分化和抗腫瘤等多種藥用活性［3］。研究發現，松果菊苷對血管性癡呆大鼠氧化應激損傷具有保護作用［4］。李歡等發現，松果菊苷可通過降低細胞內活性氧水平、減輕炎癥反應，具有保護血管內皮細胞損傷的作用［5］。目前，關于松果菊苷對心肌細胞應激性氧化損傷的保護作用及機制的相關研究比較少。因此，本研究采用H2O2構建心肌細胞氧化應激性損傷模型，觀察松果菊苷對H2O2所致心肌細胞毒性的影響及對Nrf2通路的影響，以揭示松果菊苷保護H2O2所致心肌細胞損傷的作用機制。現報告如下。

1 材料與方法

1.1 實驗細胞 大鼠心肌細胞H9c2（2-1），購自中國科學院細胞庫。

1.2 試藥與儀器 松果菊苷（純度＞98%），購自上海寶曼生物公司，批號201605；Nrf2抑制劑鴉膽苦醇（純度≥95%），購自美國Sigma公司，批號20160807；30%H2O2（批號 20150108）、DMEM 培養基（批號 8114031）、FBS（批號1227694），購自美國Sigma公司；Annexin V-FITC/PI細胞凋亡檢測試劑盒、LDH檢測試劑盒、SOD檢測試劑盒、線粒體膜電位檢測試劑盒（JC-1）、細胞核蛋白與細胞漿蛋白抽提試劑盒，購自碧云天公司；ELC發光試劑盒、96孔板，購自Bio-Rad公司；BCA試劑盒，購自美國Thermo公司；……