濾泡性輔助性T細(xì)胞及其相關(guān)皮膚病

閆天萌 左亞剛

CD4+T細(xì)胞在固有性免疫和適應(yīng)性免疫中具有重要作用，參與多種疾病的發(fā)生發(fā)展。CD4+T細(xì)胞可以分化為多種亞群，根據(jù)分化細(xì)胞表達(dá)轉(zhuǎn)錄因子的不同分為Th1、Th2、Th17、調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(Treg細(xì)胞)和濾泡性輔助性T(Tfh)細(xì)胞。Th1細(xì)胞主要介導(dǎo)細(xì)胞免疫應(yīng)答、遲發(fā)型超敏反應(yīng)和器官特異自身免疫性疾病。Th2細(xì)胞主要介導(dǎo)體液免疫應(yīng)答、過敏性和感染性疾病。Th17細(xì)胞在對(duì)抗胞外細(xì)菌及霉菌的免疫反應(yīng)中具有重要作用。Treg細(xì)胞表達(dá)CD25以及Foxp3，與自身免疫性疾病的發(fā)生關(guān)系密切。Tfh細(xì)胞是一種新發(fā)現(xiàn)的Th細(xì)胞亞群，因其在輔助B細(xì)胞產(chǎn)生抗體中具有重要作用而得名。

1 Tfh細(xì)胞的表型及分類

目前把CD4+CXCR5+的T細(xì)胞分為Tfh細(xì)胞。Tfh細(xì)胞表達(dá)多種細(xì)胞因子，如Bcell lymphoma-6(Bcl-6)、可誘導(dǎo)T細(xì)胞共刺激因子(inducible T-cell costimulator, ICOS)、程序細(xì)胞死亡因子1(programmed cell death-1，PD-1)、CXCR3、CCR6、CCR7等細(xì)胞因子，這些細(xì)胞因子在Tfh細(xì)胞的增殖分化中具有重要作用。Tfh細(xì)胞可以根據(jù)細(xì)胞表面表達(dá)因子的不同分為很多種類。一種分類為根據(jù)Tfh細(xì)胞表面細(xì)胞因子CXCR3和CCR6表達(dá)的不同分為Tfh1(CXCR3+CCR6-)、Tfh2(CXCR3-CCR6-)、Tfh17(CXCR3-CCR6+)細(xì)胞；另外Tfh細(xì)胞還可以分為記憶性Tfh細(xì)胞(mTfh)、調(diào)節(jié)性Tfh細(xì)胞(Tfr)等。Tfr細(xì)胞具有Tfh細(xì)胞和Treg細(xì)胞的雙重特性，同時(shí)表達(dá)Bcl-6和(或)Foxp-3。mTfh細(xì)胞是從記憶Th細(xì)胞分化而來的Tfh細(xì)胞，與Tfh細(xì)胞低表達(dá)CCR7不同，mTfh細(xì)胞多表達(dá)CXCR5+CCR7+。

2 Tfh細(xì)胞的增殖分化

Tfh細(xì)胞在淋巴結(jié)中分化成熟，在樹突狀細(xì)胞的作用下，邊緣區(qū)CD4+T細(xì)胞上調(diào)Bcl-6的表達(dá)，Bcl-6的表達(dá)可以促進(jìn)CXCR5、PD-1的表達(dá)，也可以抑制IFN-γ和IL-17的分泌，并且抑制Th1和Th17細(xì)胞的分化，同時(shí)CXCR5、ICOS、PD-1也可以促進(jìn)Bcl-6表達(dá)。 CXCR5是Tfh細(xì)胞的重要標(biāo)記分子，CXCR5誘導(dǎo)Tfh細(xì)胞在淋巴結(jié)中向B細(xì)胞濾泡區(qū)遷移，在遷移過程中，Tfh細(xì)胞在多種細(xì)胞及細(xì)胞因子作用下上調(diào)TCR、ICOS、CD40L[1]、CD28、PD-1、CD84等因子的表達(dá)，與B細(xì)胞表面的MHC II、ICOSL、CD40、B7、PDL1、CD84等相互作用。關(guān)于Tfh細(xì)胞誘導(dǎo)B細(xì)胞成熟分化的分子機(jī)制研究尚不明確，目前報(bào)道顯示可能與PI3K/AKT、ITCH 等信號(hào)通路有關(guān)。STAT、EGR2/3、BATF、Bcl-6、NOTCH、LEF1、NF-κB1等轉(zhuǎn)錄因子均可促進(jìn)Tfh 細(xì)胞的分化成熟。

ICOS是Tfh細(xì)胞表面一種重要的共刺激因子,在Tfh細(xì)胞的活化及分化中具有重要作用，它可促進(jìn)Tfh細(xì)胞表達(dá)IL-21。目前認(rèn)為ICOS是通過PI3K通路調(diào)節(jié)Tfh細(xì)胞分化的，ICOS-PI3K通路是通過上調(diào)Bcl-6的表達(dá)來加強(qiáng)Tfh細(xì)胞的功能[2]。PD-1主要在Tfh-B細(xì)胞相互作用中發(fā)揮作用。PD-1可以促進(jìn)Tfh細(xì)胞TCR信號(hào)的表達(dá)來促進(jìn)Tfh-B細(xì)胞之間的相互作用，研究顯示PD-1受損可以影響Tfh-B細(xì)胞相互作用。

研究發(fā)現(xiàn)Tfh細(xì)胞分泌IL-21在體液免疫中發(fā)揮著重要作用，IL-21不僅促進(jìn)B細(xì)胞活化，而且可以作用于Tfh細(xì)胞自身，促進(jìn)Tfh細(xì)胞活化。同時(shí)B細(xì)胞產(chǎn)生的IL-6可作用于Tfh細(xì)胞，進(jìn)一步促進(jìn)Tfh細(xì)胞的分化[3]或分泌相關(guān)信號(hào)因子促進(jìn)體液免疫。Tfh細(xì)胞在淋巴結(jié)分化成熟過程中可以分泌到外周血。已有報(bào)道在皮膚組織中發(fā)現(xiàn)Tfh細(xì)胞的存在，并且其在皮膚疾病中具有重要作用。

3 Tfh細(xì)胞的功能

Tfh細(xì)胞遷移至生發(fā)中心后與B細(xì)胞相互作用，促進(jìn)生發(fā)中心形成，引起B(yǎng)細(xì)胞激活、超突變、免疫球蛋白類別轉(zhuǎn)換重組、親和力突變等，使B細(xì)胞分化為記憶B細(xì)胞或長壽命漿細(xì)胞，漿細(xì)胞可以分泌高親和力抗體，引起特異性體液免疫。

Tfh1、Tfh2、Tfh17亞型細(xì)胞除具有Tfh細(xì)胞的特性外，也具有相關(guān)Th1、Th2、Th17細(xì)胞的特性。研究多認(rèn)為Tfr細(xì)胞具有抑制免疫的作用[4]，Tfh細(xì)胞和Tfr細(xì)胞的失衡可以導(dǎo)致自身免疫性疾病的發(fā)生。記憶性Tfh細(xì)胞在B細(xì)胞的幫助下可以迅速增殖活化參與體液免疫。

目前關(guān)于Tfh細(xì)胞的生物學(xué)特性尚未完全清楚，Tfh細(xì)胞的生物學(xué)活性或分泌的細(xì)胞因子與一般認(rèn)識(shí)可能有出入，如上所述，Bcl-6 作為一種轉(zhuǎn)錄因子存在于Tfh細(xì)胞及其他細(xì)胞，Bcl-6是抑制性的轉(zhuǎn)錄因子，它通過與相關(guān)micro-RNA結(jié)合抑制轉(zhuǎn)錄。Bcl-6可以抑制IFN-γ和IL-17的轉(zhuǎn)錄。Bcl-6主要是通過抑制與阻礙CXCR5表達(dá)的相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子促進(jìn)CXCR5的表達(dá)進(jìn)而促進(jìn)Tfh細(xì)胞的增殖活化[5]。IL-4可激活B細(xì)胞，促進(jìn)體液免疫，但是Tfh細(xì)胞分泌的IL-4具有免疫抑制作用[6]。

Tfh細(xì)胞在生發(fā)中心的累積可導(dǎo)致生發(fā)中心過度反應(yīng)，引起B(yǎng)細(xì)胞產(chǎn)生大量自身抗體。目前已有研究顯示Tfh細(xì)胞在自身免疫性疾病、血液系統(tǒng)疾病、腫瘤移植RA、病毒感染等多種疾病的發(fā)生發(fā)展中均具有重要作用。

4 Tfh細(xì)胞與皮膚病

4.1 SLE SLE是一種發(fā)病機(jī)制尚未闡明的自身免疫性疾病，典型特征是產(chǎn)生大量的免疫復(fù)合物和自身抗體，引起腎臟、皮膚、關(guān)節(jié)和中樞神經(jīng)系統(tǒng)病變。有報(bào)道顯示SLE發(fā)病過程中主要是Tfh2、Tfh17細(xì)胞產(chǎn)生IL-21促進(jìn)B細(xì)胞增生分化類別轉(zhuǎn)換，可能起主要的致病作用[7]。研究顯示Tfh細(xì)胞及與Tfh細(xì)胞相關(guān)的細(xì)胞因子如IL-21、ICOS、CD40L、IL-12、IL-23等均參與了SLE 的發(fā)病。研究發(fā)現(xiàn)Tfh細(xì)胞在SLE患者中ICOS、CD 40L、IL-21均表達(dá)升高[8]，但是研究顯示抗原提呈細(xì)胞表面的ICOS-L并未升高，認(rèn)為ICOS-ICOS-L并不是SLE患者中導(dǎo)致Tfh增殖的主要機(jī)制；有研究報(bào)道SLE患者中與Tfh細(xì)胞表面因子CD40L的作用的配體(OX 40)在抗原提呈細(xì)胞表達(dá)升高，所以目前認(rèn)為CD40L-OX40信號(hào)在SLE中Tfh細(xì)胞的致病過程中發(fā)揮主要作用[9]。目前ICOS/ICOS-L、CD40L、IL-21已作為靶向治療的位點(diǎn)，相關(guān)藥物正在研制中。其中2個(gè)關(guān)于ICOS/ICOS-L因子的靶向藥物正在進(jìn)行I期實(shí)驗(yàn)。

4.2 類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(RA) 是由于自身免疫紊亂導(dǎo)致免疫系統(tǒng)自身攻擊導(dǎo)致關(guān)節(jié)的改變。RA患者中外周血CXCR5+ICOS+或者CXCR5+ICOS hiT細(xì)胞表達(dá)升高。IL-6介導(dǎo)Bcl-3表達(dá)增多進(jìn)而促進(jìn)Bcl-6表達(dá)增加，從而促進(jìn)RA患者外周血中Tfh細(xì)胞增多，IL-21水平升高[10]。在RA患者滑膜組織中CD4+CXCR5+ICOS+的Tfh細(xì)胞增多，而在正常對(duì)照中滑膜組織中未見CD4+CXCR5+ICOS+的Tfh細(xì)胞[11]，進(jìn)一步證實(shí)RA的發(fā)病與Tfh細(xì)胞相關(guān)。

4.3 干燥綜合征 干燥綜合征是一種慢性炎癥性自身免疫性疾病，除侵犯外分泌腺外，還可累及多系統(tǒng)。有研究報(bào)道顯示干燥綜合征患者外周血中CD4+CXCR5+Tfh細(xì)胞比例升高[12]，患者腮腺活檢中可以看到Bcl-6、PD-1表達(dá)增多[13]，唾液腺上皮可以誘導(dǎo)原始CD4+T細(xì)胞向Tfh細(xì)胞分化[14]，唾液腺Tfh細(xì)胞可以促進(jìn)B細(xì)胞成熟[15]。綜上所述，在干燥綜合征中外周血及組織中均可見Tfh細(xì)胞升高，說明Tfh細(xì)胞在干燥綜合征的發(fā)病中具有重要作用。

4.4 銀屑病 銀屑病是一種常見、易復(fù)發(fā)的慢性炎癥性皮膚病[16]，一般認(rèn)為可能與遺傳、感染、免疫功能失調(diào)、機(jī)體代謝及神經(jīng)精神因素等有關(guān)。目前多認(rèn)為Th17細(xì)胞、IL-17、IL-21、IL-23、TNF-α在銀屑病的發(fā)病過程中具有重要作用。目前針對(duì)TNF-α的靶向治療藥物已經(jīng)應(yīng)用于臨床。關(guān)于Tfh細(xì)胞在銀屑病中發(fā)病機(jī)制的研究結(jié)果不盡相同。部分研究顯示CD4+CXCR5+IL-21+Tfh細(xì)胞在銀屑病中明顯升高，并與銀屑病病情相關(guān)[17]，也有部分研究顯示CXCR5+PD1+Tfh細(xì)胞在銀屑病患者中減少，銀屑病患者外周血IL-21與銀屑病病情無明顯相關(guān)性[18]。

4.5 天皰瘡 天皰瘡是一種由于機(jī)體產(chǎn)生針對(duì)表皮內(nèi)自身抗體引起的自身免疫性水皰性疾病，血清可檢測(cè)到抗DSG-1和或抗DSG-3抗體。已有研究顯示患者Tfh細(xì)胞數(shù)量及外周血IL-21水平明顯升高。由于IL-21也可以由Th17細(xì)胞分泌，已有報(bào)道天皰瘡患者中Th17、CD4+CXCR5+Tfh細(xì)胞增多，但是ICOS+PD-1+Tfh細(xì)胞未見明顯升高[19]，所以天皰瘡患者中IL-21升高是否由Tfh細(xì)胞分泌尚無定論。

4.6 大皰性類天皰瘡 大皰性類天皰瘡是由于B細(xì)胞產(chǎn)生針對(duì)基底膜帶半橋粒抗BP180及抗BP230抗體導(dǎo)致真表皮分離的一種自身免疫性疾病[20]。報(bào)道顯示患者CXCR5+PD-1+和CXCR5+ICOS+的Tfh細(xì)胞數(shù)量及外周血IL-21水平明顯高于對(duì)照組，并且與BP患者病情嚴(yán)重程度相關(guān)[21]。且皮損中CXCR5+表達(dá)增多[22]。

4.7 扁平苔蘚 扁平苔蘚是一種慢性炎癥性疾病。有研究報(bào)道口腔扁平苔蘚患者外周血CD4+CXCR5+Tfh細(xì)胞、CD19+B細(xì)胞均明顯升高，并且在潰瘍型口腔扁平苔蘚患者中外周血CD4+CXCR5+Tfh細(xì)胞高于非潰瘍型口腔扁平苔蘚患者[23]，進(jìn)一步說明扁平苔蘚的發(fā)病與Tfh細(xì)胞相關(guān)。但是值得注意的是這篇文章報(bào)道口腔扁平苔蘚患者外周血IL-21較對(duì)照組低[23]。所以關(guān)于Tfh細(xì)胞在扁平苔蘚發(fā)病中的作用是否由IL-21介導(dǎo)仍需要進(jìn)一步研究。

4.8 特應(yīng)性皮炎(AD) 是一種常見的慢性復(fù)發(fā)性瘙癢性炎癥性皮膚病，一般認(rèn)為與多種因素如遺傳、環(huán)境等有關(guān)。有研究報(bào)道在AD患者中CD4+CXCR5+ICOS+PD-1+Tfh細(xì)胞及IL-21均明顯升高，并且兒童AD患者較成人升高更明顯[24]，外周血IL-21水平與AD病情明確相關(guān)，說明Tfh細(xì)胞與AD的發(fā)病有著密切的關(guān)系。

總之，Tfh細(xì)胞作為一種新型CD4+T細(xì)胞，在皮膚病中研究尚不充分。目前在以上列舉的皮膚病的報(bào)道中多為單中心研究，且在同一疾病的不同研究間存在矛盾，其說服力和科學(xué)性尚需大規(guī)模臨床資料的驗(yàn)證。目前關(guān)于Tfh細(xì)胞在皮膚病中作用的機(jī)制尚不清楚。