肺腺癌患者EGFR基因突變與血清腫瘤標志物CEA的相關性研究*

林 牧，韓曉靜，陳云華，唐 竹，陶 雪，馬慶慶（貴州航天醫院，貴州遵義563000）

肺癌是我國目前最為常見的惡性腫瘤[1]，其發病率和病死率極高，居全球惡性腫瘤的首位。其非小細胞肺癌（NSCLC）所占比例為 75.0%～85.0%[2]。NSCLC 通常發現晚、進展快、預后差，其中肺腺癌占NSCLC的40.0%，且該類肺癌患者絕大部分在確診時已處于晚期，病死率遠高于其他惡性腫瘤[3-5]。在NSCLC分子靶向標志物中表皮生長因子受體（EGFR）基因突變是目前研究最為廣泛、了解最為透徹、指南最為推薦的分子標志物[6-7]。表皮生長因子受體酪氨酸激酶抑制劑（EGFRTKI）靶向藥物的發現給很多肺癌晚期患者帶來了新的曙光，其為酪氨酸激酶受體抑制劑，可抑制酪氨酸磷酸化過程[8]，阻斷EGFR-KRAS-P3IK/蛋白激酶B等通路的信號傳導，從而抑制腫瘤細胞生長[9]。新近研究顯示，肺腺癌患者血清腫瘤標志物——癌胚抗原（CEA）與EGFR基因突變相關[10]，但多數文獻僅報道了CEA表達水平的正常或異常，并未從其水平梯度層面進行剖析[11]。本研究擬通過回顧性分析本院行EGFR基因檢測的36例肺腺癌患者血清CEA水平，進一步對不同分層的CEA水平與EGFR基因突變情況進行相關性研究。

1 資料與方法

1.1 標本來源 選取2016年1月1日至2017年1月15日本院收治的肺腺癌患者36例，其中男27例，女9例；年齡 35～81歲，平均（63.6±0.78）歲。所有患者均經病理學和細胞學檢查確診為肺腺癌，所有標本均為病理組織標本和血標本。剔除信息不全的標本。

1.2 方法

1.2.1 血清CEA檢測 采集患者治療前晨起空腹靜脈血3 mL，靜置20 min后，室溫下3 000 r/min離心10 min，分離血清后采用貝克曼化學發光免疫儀（DXI-800）檢測CEA水平，嚴格按操作流程及試劑盒說明書操作，血清 CEA 水平以小于 5、5～20、＞20 ng/mL 為界限分為3個層次。

1.2.2 EGFR基因檢測 收集肺腺癌患者穿刺或纖維支氣管鏡采取的組織標本，用10%甲醛固定后進行石蠟包埋，切10張未染色石蠟切片。使用突變特異性擴增系統-聚合酶鏈反應方法進行29種EGFR基因熱點突變檢測，試劑購自廈門艾德生物醫藥科技有限公司，熒光定量聚合酶鏈反應采用ABI7500基因擴增儀。嚴格按儀器標準操作規程及試劑盒說明書操作。

2 結 果

2.1 EGFR突變狀態 36例患者中EGFR突變30例（83.3%），其中19號外顯子19-Del突變14例，20號外顯子T790M突變2例，19號外顯子19-Del突變合并20號外顯子Ins突變2例，20號外顯子20-Ins合并21號外顯子L858R突變2例，21號外顯子L858R突變10例。基因表型檢測結果分布情況見表1。

表1 基因表型檢測結果分布情況（n=36）

2.2 性別、CEA表達水平與EGFR基因突變的關系 女性、血清CEA≥5 ng/mL時，EGFR基因突變率更高，分別為100.0%、93.3%。見表2。

表2 性別、CEA表達水平與EGFR基因突變陽性率的關系

2.3 EGFR基因突變率與血清CEA水平的關系 以CEA水平作為自變量，以EGFR基因突變率作為因變量，根據原始數據作圖。當CEA＜5 ng/mL時，EGFR基因突變率為66.7%，當CEA為5～20 ng/mL時，EGFR基因突變率為90.0%，當CEA＞20 ng/mL時，EGFR基因突變率為100.0%；EGFR基因突變率在CEA＜5 ng/mL到5 ng/mL≤CAE≤20 ng/mL區域中，隨著CEA水平增加，EGFR突變率顯著上升。血清CEA水平升高，EGFR基因突變率隨之上升。見圖1。

圖1 EGFR基因突變率與血清CEA水平的關系

3 討 論

近年來，隨著基因組學和藥物組學研究的深入，陸續發現許多原癌基因編碼的蛋白可作為靶向治療靶點，其中研究最為廣泛和明確的即是EGFR家族。EGFR酪氨酸激酶活化是腫瘤信號傳導和腫瘤細胞生長的必要條件，已成為目前腫瘤分子靶向治療的一個最為重要的靶點。進行特異性酶抑制劑阻斷酪氨酸激酶活化通路可控制腫瘤信號通路的傳導，抑制腫瘤細胞生長，靶向使腫瘤細胞凋亡，發揮抗腫瘤作用[12]。

有研究證明，檢測EGFR基因突變對預測EGFRTKI的療效具有決定性意義[13]。EGFR基因熱點突變（19號外顯子缺失、21號外顯子點突變）已被美國國立綜合癌癥網絡指南、中國原發性肺癌診療規范定義為一線使用EGFR-TKI的先決條件，且是預測NSCLC療效的前提[14]。

EGFR-TKI的廣泛臨床應用使NSCLC的治療獲得了突破性進展，使更多的晚期患者獲益[15]。EGFR-TKI殺瘤機制是阻斷絡氨酸殘基磷酸化過程[16]，進一步阻止EGFR基因信號通路下游傳導途徑（EGFR-KRAS-P3IK/蛋白激酶B），進而抑制肺腺癌等腫瘤細胞增殖、遷徙、轉移、血管生成[17]等一系列腫瘤細胞活動。但目前檢測EGFR基因突變并無統一的方法，且技術門檻高、費用高，組織取材難、樣本量少，受檢測方法、費用、實驗室等條件因素的影響，該治療方案在臨床上較難推廣應用。因此，尋找替代或輔助EGFR基因突變檢測指標的腫瘤標志物極為重要。

CEA是最早用于診斷NSCLC的腫瘤標志物之一，血清CEA水平與NSCLC療效、患者預后等因素具有重要相關性。血清CEA水平高的NSCLC患者相較于血清CEA水平低的患者更能對EGFR-TKI分子靶向治療敏感和有效[18]。

大量的研究證實了血清CEA水平與EGFR基因突變相關。王進峰等[19]研究結果證實，治療前患者血清CEA水平與EGFR基因突變呈正相關，當血清CEA＜50 ng/mL時，EGFR基因突變率隨血清CEA水平升高而增加。日本學者SHOJI等[20]發現，48例肺腺癌患者血清CEA水平與EGFR基因突變直接相關，且肺癌患者EGFR基因突變與腫瘤復發時血清CEA水平有關，血清CEA水平高的肺腺癌患者EGFR基因突變率較高，血清CEA＞5 ng/mL時，EGFR基因突變率為35.0%；CEA為5～20 ng/mL時，EGFR基因突變率為55.0%；CEA≥20 ng/mL時，EGFR基因突變率高達87.5%。本研究結果顯示，EGFR基因突變率隨血清CEA水平升高而升高。肺腺癌患者EGFR基因突變與血清CEA具有重要的聯系，當CEA＜5 ng/mL時，EGFR基因突變率為66.7%，當CEA為5～20 ng/mL時，EGFR基因突變率為90.0%，當CEA＞20ng/mL時，EGFR基因突變率為100.0%；EGFR基因突變率在CEA＜5 ng/mL到5 ng/mL≤CAE≤20 ng/mL區域中，隨著CEA水平增加，EGFR基因突變率顯著上升。

總之，檢測肺腺癌患者血液CEA水平對EGFRTKI的療效具有一定預測作用，在肺腺癌患者中，EGFR基因突變與血清CEA水平重要相關，血清CEA水平升高，EGFR基因突變率隨之升高。但本研究納入病例數較少，尚需擴大樣本量進一步研究證實。

[1]支修益，石遠凱，于金明．中國原發性肺癌診療規范（2015年版）[J]．中華腫瘤雜志，2015，37（1）：67-78．

[2]劉付東，孫曉凱，鄭春早，等．2011—2014年江蘇省鹽城市惡性腫瘤發病和死亡分析[J]．中國腫瘤，2017，26（2）：86-90．

[3]周清華，范亞光，王穎，等．中國肺部結節分類、診斷與治療指南（2016 年版）[J]．中國肺癌雜志，2016，19（12）：793-798．

[4]LORTET-TIEULENT J，SOERJOMATARAM I，FERLAY J，et al.International trends in lung cancer incidence by histological subtype：adenocarcinoma stabilizing in men but still increasing in women[J].Lung Cancer，2014，84（1）：13-22.

[5]ASHWORTH A，RODRIGUES G，BOLDT G，et al.Is there an oligometastatic stateinnon-smallcelllungcancer：asystematicreviewoftheliterature[J].Lung Cancer，2013，82（2）：197-203.

[6]GARON EB，RIZVI NA，HUI R，et al.Pembrolizumab for the treatment of non-small-cell lung cancer[J].N Engl J Med，2015，372（21）：2018-2028.

[7]YANG JJ，CHEN HJ，YAN HH，et al.Clinical modes of EGFR tyrosine kinase inhibitor failure and subsequent management in advanced nonsmall cell lung cancer[J].Lung Cancer，2013，79（1）：33-39.

[8]WU YL，ZHOU C，HU CP，et al.Afatinib versus cisplatin plus gemcitabine for first-line treatment of Asian patients with advanced nonsmall-cell lung cancer harbouring EGFR mutations（LUX-Lung 6）：an open-label，randomised phase 3 trial[J].Lancet Oncology，2014，15（2）：213-222.

[9]KORPANTY GJ，GRAHAM DM，VINCENT MD，et al.Biomarkers that currentlyaffectclinicalpracticeinlungcancer：EGFR，ALK，Met，ROS-1，and KRAS[J].Front Oncol，2014，4：204.

[10]ROMERO-VENTOSA EY，BLANCO-PRIETO S，GONZáLEZ-PI?EIRO AL，etal.PretreatmentlevelsoftheserumbiomarkersCEA，CYFRA21-1，SCC and the soluble EGFR and its ligands EGF，TGF-alpha，HB-EGF in the prediction of outcome in erlotinib treated non-small-cell lung cancer patients[J].Springerplus，2015，4：171.

[11]YANG ZM，DING XP，PEN L，et al.Analysis of CEA expression and EGFR mutation status in non-small cell lung cancers[J].Asian Pac J Cancer Prev，2014，15（8）：3451-3455.

[12]ELLISON G，ZHU G，MOULIS A，et al.EGFR mutation testing in lung cancer：a review of available methods and their use for analysis of tumour tissue and cytology samples[J].J Clin Pathol，2013，66（2）：79-89.

[13]WU YL，ZHOU C，LIAM CK，et al.First-line erlotinib versus gemcitabine/cisplatin in patients with advanced EGFR mutation-positive nonsmall-cell lung cancer：analyses from the phaseⅢ，randomized，open-label，ENSURE study[J].Ann Oncol，2015，26（9）：1883-1889.

[14]HAALAND B，TAN PS，DE CASTRO G JR，et al.Meta-analysis of firstline therapies in advanced non-small-cell lung cancer harboring EGFR-activating mutations[J].J Thorac Oncol，2014，9（6）：805-811.

[15]GOLDBERG SB，OXNARD GR，DIGUMARTHY S，et al.Chemotherapy with Erlotinib or chemotherapy alone in advanced non-small cell lung cancer with acquired resistance to EGFR tyrosine kinase inhibitors[J].Oncologist，2013，18（11）：1214-1220.

[16]DELANEY C，FRANK S，HUANG RS.Pharmacogenomics of EGFR-targeted therapies in non-small cell lung cancer：EGFR and beyond[J].Chin J Cancer，2015，34（4）：149-160.

[17]LIANG W，WU X，FANG W，et al.Network meta-analysis of erlotinib，gefitinib，afatinib and icotinib in patients with advanced non-smallcell lung cancer harboring EGFR mutations[J].PLoS One，2014，9（2）：e85245.

[18]JIN B，ZHANG Y，ZHANG X，et al.Value of carcinoembryonic antigen levels in predicting the efficacy of EGFR-TKI in advanced non-small cell lung cancer harboring EGFR mutations[J].Zhonghua Yi Xue Za Zhi，2014，94（30）：2327-2331.

[19]王進峰，龍浩．非小細胞肺癌表皮生長因子受體基因突變與癌胚抗原表達水平的關系[J]．廣東醫學，2012，33（11）：1589-1592．

[20]SHOJI F，YOSHINO I，YANO T，et al.Serum carcinoembryonic antigen level is associated with epidermal growth factor receptor mutations in recurrent lung adenocarcinomas[J].Cancer，2007，110（12）：2793-2798.