通絡通散配方藥材的薄層色譜法鑒別

梁瑩瑩 ，張淑君 ，馬秉智 ，劉 曉 ，鞠 海 ，袁 焱 ，赫 軍 ?

（1.中日友好醫院 藥學部，北京 100029；2.北京中醫藥大學東直門醫院 藥學部，北京 100700）

通絡通方主要由老鸛草、淫羊藿、紅花等藥味組成，作為協定處方在我院中西醫結合腫瘤內科使用多年，其外用具有溫經通絡、活血化瘀之功效，可顯著改善化療引起的病理性神經疼痛[1～3]。根據臨床需求，擬將其開發成院內制劑通絡通散，方便患者攜帶。為控制其質量，筆者結合北京市醫療機構中藥制劑質量標準研究技術指導原則[4]，采用薄層色譜法（TLC）分別對處方中老鸛草、淫羊藿、紅花所含的柯里拉京、淫羊藿苷、羥基紅花黃色素A進行了定性鑒別，為建立該制劑的質量標準提供參考。其中以柯里拉京為對照品對老鸛草進行薄層鑒別尚未查到相關文獻，本文方法為首次提出，為今后老鸛草的鑒別方法研究提供參考。

1 儀器與試藥

BSA423S-CW千分之一電子天平 （德國Sartorius公司），薄層層析硅膠G板、H板（青島海洋化工有限公司）。

通絡通散（批號 20150123、20150205、20150219）為中日友好醫院中藥制劑室自制；淫羊藿苷 （批號：110737-200415）、柯里拉京（批號：111623-201308）、羥基紅花黃色素A（批號：120907-201412）均購自中國食品藥品檢定研究院；試驗中所用試劑均為分析純，水為娃哈哈純凈水。

綜上所述，“翻轉課堂”模式教學對學生的學習和教師的教學有很大的幫助。但是，在高中語文教學中實行“翻轉課堂”模式的時候，不能一味地借鑒，教師要注意分析學生的學習特點，結合學生的學習情況，制定適合自己班上學生學習的教學模式。

為驗證導師素質、學術態度、學術環境與研究生學術水平的關系,本研究對國內近5年已畢業的研究生進行紙質問卷調查。問卷設計主要包括兩部分:一是被調查者及導師的學術水平情況(如獲得的國家獎項、承擔的國家項目、發表的論文等);二是通過一系列具體問題獲得被調查者的學術認知程度、學術動機強度,被調查者導師的人格魅力、指導能力,被調查者所處學校(院)的學術氛圍情況。問卷中對導師和研究生學術水平采用發表論文及著作等進行直接測量。

2 定性鑒別

2.1 炙淫羊藿

取本品8g，加30%乙醇溶液80ml回流1h，過濾，濾液揮干乙醇，濃縮至10ml，加等量的稀鹽酸，水浴1h，冷卻，6000轉/min離心10min，取上清液至于125ml分液漏斗中，以乙酸乙酯提取 3 次，分別為 20ml、10ml、10ml，合并乙酸乙酯液，水浴揮干乙酸乙酯，以甲醇溶解至1ml作為供試品溶液。另取柯里拉京對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1ml含10μg的溶液，作為對照品溶液。按處方及制備工藝制備缺老鸛草的陰性對照樣品，按上述供試品溶液制備方法制成陰性對照溶液。照薄層色譜法（中國藥典2015年版第四部通則0502）試驗，吸取上述3種溶液各10μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸（5:5:3）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以2%三氯化鐵乙醇試液。結果顯示，供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點，且陰性對照無干擾，詳見圖1B（見封底）。

2.2 老鸛草

取本品8g，加40ml甲醇，回流1h，過濾，濾液水浴揮干甲醇，殘渣以30ml水溶解，置于125ml分液漏斗中，以水飽和的正丁醇提取2次，每次40ml；合并正丁醇液，以氨試液洗滌3次，每次30ml，以正丁醇飽和的水洗滌2次，每次30ml；揮干正丁醇液，以甲醇溶解定容至 1ml，作為供試品溶液。另取淫羊藿苷對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1ml含10μg的溶液，作為對照品溶液。按處方及制備工藝制備缺炙淫羊藿的陰性對照樣品，按上述供試品溶液制備方法制成陰性對照溶液。照薄層色譜法（中國藥典2015年版第四部通則0502）試驗，吸取上述3種溶液各10μl，分別點于同一硅膠H薄層板上，以乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水（10:1:1:1）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以三氯化鋁試液，置紫外光燈（365nm）下檢視。結果顯示，供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點，且陰性對照無干擾，詳見圖1A（見封底）。

選擇我院畢業生的業務信函作為案例不僅接近了學生與跨境電商英語的心理距離，適宜性也非常強。比如，往屆學生寫作上出現的種種問題往往也是在讀生會蹈的覆轍。通過評析往屆學生信函上的錯誤與不足之處，在讀生的寫作水平能得到切實提高。

2.3 紅花

取本品5g，加30ml 50%乙醇溶液超聲30min，濃縮至5ml，12000轉/min離心 5min，取上清液，加于已處理好的D101型大孔樹脂柱（內徑為1.5cm，柱高為15cm，濕法上柱，樹脂量高15cm）上，先用50ml水洗脫，洗脫液棄去，再用50%乙醇溶液50ml洗脫，收集洗脫液，水浴蒸干洗脫液，以甲醇溶解至1ml，作為供試品溶液。另取紅花對照藥材1g，同法制得紅花對照藥材溶液。另取羥基紅花黃色素A適量，精密稱定，加甲醇制成每1ml含10μg的溶液，作為對照品溶液。按處方及制備工藝制備缺紅花的陰性對照樣品，按上述供試品溶液制備方法制成陰性對照溶液。照薄層色譜法（中國藥典2015年版第四部通則0502）試驗，吸取上述3種溶液各10μl，分別點于同一硅膠H薄層板上，以正丁醇-甲醇-水（6:1:5）為展開劑，展開，取出，晾干，在365nm紫外燈下檢視。結果顯示，供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點，且陰性對照無干擾，詳見圖1C（見封底）。

3 討論

通絡通散為我院在研制劑，其君藥老鸛草中柯里拉京、臣藥紅花中羥基紅花黃色素A和淫羊藿中淫羊藿苷具有鑒別的特征性意義。考慮到劑型原因，筆者采用了超聲提取法制備供試液，其中老鸛草以30%乙醇提取后，揮干乙醇，加入等量的鹽酸，濾液以乙酸乙酯萃取[5]；淫羊藿以甲醇提取后，以正丁醇萃取；紅花則取D101大孔樹脂50%乙醇洗脫部分[6]；筆者根據文獻及實驗[7，8]，考慮到展開劑毒性問題，盡量選取毒性相對較低的試劑，老鸛草的薄層鑒別筆者未查到相關文獻，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸（5:3:1）展開后斑點拖尾嚴重，調整展開劑比例后以甲苯-乙酸乙酯-甲酸（5:5:3）展開情況改善。為增加薄層鑒別的專屬性，筆者在淫羊藿、紅花的鑒別中均增加了對照藥材與對照品共同作為對照，經過試驗，處方中其他藥味均沒有干擾性成分。上述色譜結果專屬性強、斑點清晰、陰性對照無干擾，可以用于老鸛草、淫羊藿和紅花的鑒別。

綜上所述，該方法操作簡便、重復性好，可用于通絡通散的質量控制。