冷沉淀制備時間對凝血Ⅷ因子及纖維蛋白原含量的影響分析

張 靖

（廣西壯族自治區玉林市中心血站成分科，廣西 玉林 537000）

冷沉淀技術是指在2～6℃的封閉狀態下將處在保存期的新鮮冰凍血漿融化，并將血漿中的沉淀物分離，而這些沉淀物中包含的凝血Ⅷ因子與纖維蛋白原對諸如術后大出血等癥狀的治療中有良好的代替作用[1]。400毫升的全血通過冷沉淀制備可得出大約40～50毫升的冷沉淀，將其放置在低于-18℃的環境中可保存一年，若將冷沉淀融化后保存在2～6℃條件下，需要在24小時以內輸注，且滴速應保持在每小時200毫升以上。在冷沉淀制備時，全血采集后制備成新鮮冰凍血漿的時間長短可能會影響血液中物質的活性，因此，本文將針對我站近期采集的部分血樣進行冷沉淀制備，觀察分別在采血后4/6/8小時的血樣制備冷沉淀對凝血Ⅷ因子與纖維蛋白原的影響，現將研究結果作如下報告。

1 資料與方法

1.1 一般資料

本組研究所涉及的血液樣本是選取自2016年1月～2017年4月期間采集99份獻血者的全血樣本，每份樣本均為400毫升，且均無色澤異常，溶血，凝塊，氣泡及重度乳糜等現象，且血液采集均未超過13分鐘。

1.2 制備方法

血樣制備的儀器與試劑：由德國美創公司生產，型號為Contron1800的全自動血凝儀以及由盧森堡公司生產，型號為MBF-21的速凍機；德國賽默飛公司生產，型號為6000i的離心機；美國科瑞特公司生產，型號為CT-4T-6C的低溫融化箱以及Beckman公司的檢測試劑。

制備方法：使用離心機以每分鐘4000 r的轉速對全血進行離心操作10分鐘，將新鮮血漿從全血中分離出來，放置于速凍機中進行速凍。隨后轉入-18℃以下的低溫冰箱中保存，99份新鮮冰凍血漿分為3組，分別在采血后4/6/8小時將各組血漿樣本進行冷沉淀制備；冷沉淀制備的方法使用的是虹吸法，其具體步驟為：將新鮮冰凍血漿（A袋）置于4℃水浴箱中，另一空袋（B袋）懸于水浴箱外，位置低于血漿袋，兩袋之間形成一定的高度差。血漿融化后，隨時被虹吸到B袋中，當融化至剩下40～50 mL血漿與沉淀物混合，制成冷沉淀凝血因子（A袋）。將A袋和B袋（冰凍血漿）熱合斷離。隨后將冷沉淀速凍后保存保存在－18℃以下的低溫冰箱中。

1.3 指標的觀察

對在不同時間點采集的血液制備的冷沉淀樣本進行水浴箱融化，水溫設置為37℃，對冷沉淀物質使用試劑盒實施測定其中的凝血Ⅷ因子及纖維蛋白原含量。

1.4 統計學方法

本組研究采用的是SPSS 20.0統計軟件實施數據的分析，計數信息運用x2檢驗，計量數據則用t檢驗，組間的對比組以P＜0.05視為具有統計意義。

2 結 果

2.1 凝血Ⅷ因子以及纖維蛋白原的含量以及回收率

經觀察3組血樣的凝血Ⅷ因子的含量無明顯差異，P＞0.05。纖維蛋白原的含量組間差異較為明顯，P＜0.05；兩組的回收率對比均有明顯差異，P＜0.05。見表1。

表1 凝血Ⅷ因子以及纖維蛋白原的含量以及回收率（±s）

表1 凝血Ⅷ因子以及纖維蛋白原的含量以及回收率（±s）

組別凝血因子含量回收率纖維蛋白原含量回收率4小時113.58±31.7280.47±15.18228.03±12.5279.30±15.456小時112.14±29.6865.67±14.97219.24±12.4660.66±15.048小時115.35±31.4859.40±15.31211.96±11.7859.73±15.29

3 討 論

現階段的醫療技術日漸發達，以致于冷沉淀技術在臨床上獲得廣泛的應用。在治療先天性或是獲得性凝血因子Ⅷ缺失以及纖維蛋白原的缺乏等癥狀中呈現出了良好療效，冷沉淀在臨床上的需求量不斷增加，為避免醫療事故的發生，其制備的要求也越發嚴格。由于凝血Ⅷ因子在冷沉淀的制備過程中呈現出較短的半衰期[2]，在脫離人體之后比較容易失活，因此需要嚴格控制冷沉淀的制備過程，以保證其質量。相關文件規定冷沉淀的原材料必須是采血后8小時內制備成新鮮冰凍血漿，否則凝血因子等的活性會相應降低[3]。本組結果顯示：在3個不同時間點（4/6/8小時）采集的血液進行冷沉淀制備的凝血VIII因子及纖維蛋白原含量并無明顯差異，所以在8小時之內進行血樣的冷沉淀制備并不會對臨床治療效果造成較大影響，綜上，8小時內，不同時間點采集的新鮮冰凍血漿制備冷沉淀并不能對凝血VIII因子以及纖維蛋白原含量造成較大影響，但會影響其中的回收率。

[1] 肖樂宇,肖聲宇,岐紅陽,等.探討手工制備血小板后的血漿再制備冷沉淀的可行性[J].醫藥論壇雜志,2017,38(04):81-82.

[2] 畢承恩,楊 婷,馬佩琴,等.冷沉淀凝血因子制備技術的應用研究[J].臨床醫藥文獻電子雜志,2017,4(01):27-29+32.

[3] 肖樂宇.冷沉淀凝血因子制備儀制備冷沉淀的質量評價[J].中國輸血雜志,2016,29(01):96-97.