吸煙女性原發性高血壓腦出血患者血清炎性因子表達水平

何 鵬 陳 玲 王戩萌 徐文浩

(孝感市中心醫院重癥醫學科，湖北 孝感 432100)

腦出血是臨床神經內外科的常見病和多發病，是受環境因素和遺傳因素共同影響的多因素疾病，發病率、致死率、致殘率均很高，嚴重影響人類的生活質量〔1〕。近年來有研究〔2～4〕報道高血壓、吸煙是腦出血的高危因素，吸煙與高血壓有確切的劑量-效應關系，而原發性高血壓又與腦卒中事件發生率及致死率密切相關；炎性因子參與腦出血這一復雜的病理生理過程。本研究通過監測不同病情吸煙女性血清中白細胞介素(IL)-2、IL-6和腫瘤壞死因子(TNF)-α蛋白含量及mRNA水平，為女性原發性高血壓腦出血的發生、發展、預防、治療、轉歸及預后提供重要的臨床指導。

1 資料與方法

1.1臨床資料及實驗分組 隨機選擇孝感市中心醫院2015年11月至2017年2月體檢、就診及住院女性180例，分為正常不吸煙女性為對照組〔平均年齡(55.6±3.9)歲，n=25〕、正常吸煙女性為實驗1組〔平均年齡(56.3±5.4)歲，n=25〕、不吸煙原發性高血壓女性為實驗2組〔平均(57.8±4.2)歲，n=40〕、吸煙原發性高血壓女性為實驗3組〔平均年齡(56.8±6.1)歲，n=40〕、吸煙原發性高血壓腦出血女性為實驗4組〔平均年齡(52.9±4.5)歲，n=50〕。

所有患者均為首次出血，符合中華醫學會第四屆腦血管病會議確定的腦出血的診斷標準〔5〕，排除其他重要器官功能障礙、繼發性高血壓、惡性腫瘤、內分泌及自身免疫性疾病，一般資料比較差異無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2實驗試劑及儀器 白細胞介素(IL)-2、IL-6、腫瘤壞死因子(TNF)-α的酶聯免疫試劑盒購于南京建成生物有限公司；Trizol、引物、RT-PCR試劑盒購于塔克拉生物有限公司。Biotek Epoch酶標儀(美國)；實時熒光定量PCR儀(型號ABI7300，美國)；Biometra PCR擴增儀(美國)。

1.3標本采集 5組受試者均在清晨空腹抽取靜脈血5 ml，離心1 500 r/min，10 min，分離血清待測。

1.4檢測指標

1.4.1血清炎性因子IL-2、IL-6、TNF-α蛋白含量檢測 采用酶聯免疫法檢測IL-2、IL-6、TNF-α的蛋白含量，首先酶標板封閉40 min，洗滌3次，3 min/次；加入待測樣本80 μl/孔，37℃60 min，洗滌3次，3 min/次；加入酶標抗體80 μl/孔，底物顯色3～5 min，加入終止液終止反應，20 min內上Epoch酶標儀檢測，嚴格按照試劑盒方法操作。

1.4.2IL-2、IL-6、TNF-α mRNA水平的檢測 采用熒光定量法檢測，引物序列由北京鼎國生物有限公司合成。IL-2：正義:5′-GACGCTG-TAAGTCACGAAGGAT-3′，反義：5′-CGTAGCTTCTAGCCTGCAGG-3′，產物212 bp；IL-6：正義：5′-ACAGATGTAGCGCATGCTAT-3′，反義：5′-TAGCTGTAGCTGGTACGTG-3′，產物239 bp；TNF-α：正義:5′-GGTGATCGGTGCCAACAAGGA-3′，反義：5′-CACGCTGGCTCAGCCACTG-3′,產物173 bp。

1.5統計學分析 采用SPSS16.0軟件行t檢驗。

2 結 果

2.1各組血清IL-2、IL-6、TNF-α蛋白含量比較 實驗1、2、3、4組血清中IL-2蛋白含量依次降低，明顯低于對照組(P<0.05)；血清IL-6和TNF-α蛋白含量依次升高，明顯高于對照組(P<0.05)，見表1。

2.2各組血清IL-2、IL-6、TNF-α mRNA水平比較 實驗1、2、3、4組血清IL-2 mRNA水平依次降低，明顯低于對照組(P<0.05)；實驗1、2、3、4組血清IL-6和TNF-α mRNA水平依次升高，明顯高于對照組(P<0.05)，見表2。

表1 各組血清IL-2、IL-6和TNF-α蛋白含量比較

與對照組比較：1)P<0.01；與實驗1組比較：2)P<0.01；與實驗2組比較：3)P<0.01；與實驗3組比較：4)P<0.01；下表同

表2 各組血清IL-2、IL-6和TNF-α mRNA水平比較值)

3 討 論

在腦出血的眾多發病因素中高血壓是最重要的高危因素，原發性高血壓能加重機體血管內皮功能障礙，二者相互作用導致惡性循環，與腦血管事件發生率、致死率密切相關〔6，7〕。高血壓腦出血的患者存在免疫功能紊亂和免疫反應炎癥，其中細胞因子網絡(IL-2、IL-2R、IL-6和TNF-α等)發揮重要的調節作用，是腦組織損傷的一種急性應激反應，細胞因子參與腦出血這一復雜的病理生理過程〔8～10〕。

目前研究〔2〕已經證實，煙草中的有害物質能夠損傷血管的結構和功能，吸煙人群高血壓的患病率明顯高于不吸煙人群，且吸煙與高血壓有確切的劑量-效應關系。吸煙和高血壓對心腦血管疾病影響的嚴重性日趨明確，但其作用機制不明。本研究結果顯示：吸煙能降低機體免疫力，導致IL-2水平下調、IL-6和TNF-α水平上調，炎性因子IL-2、IL-6和TNF-α參與原發性高血壓的發病機制，臨床監測原發性高血壓吸煙女性血清中IL-2、IL-6和TNF-α的含量，可為女性原發性高血壓腦出血的發生、發展、預防、治療、轉歸及預后提供重要的臨床指導。

1段淑霞,劉 濤,王戩萌.尼莫地平對不同時間點高血壓腦出血患者血清炎性因子影響的實驗研究〔J〕.中國實驗診斷學,2015;19(7):1065-7.

2向全永,潘曉群,呂淑榮,等.吸煙與高血壓相關關系研究〔J〕.中國預防醫學雜志,2010;11(11):1129-31.

3郭宗強,孫同文.高血壓病患者并發腦卒中的危險因素研究〔J〕.中國現代醫生,2010;48(15):77-8.

4藍少勇,吳傳喜,林 東.老年急性腦出血患者血清炎性因子水平變化及其臨床意義〔J〕.實用心腦肺血管病雜志,2017;25(5):124-5.

5王文志.《中國腦血管病防治指南》節選〔J〕.中國慢性病預防與控制,2006;14(2):143-5.

6張 玲,張 蕾.阿托伐他汀對高血壓患者血清炎性因子、血管內皮功能及血脂水平的影響〔J〕.海南醫學院學報,2015；21(7):905-8.

7黃 俊,黃江燕,吳鈞芳,等.貝那普利對高血壓患者外周血中內皮祖細胞功能的影響〔J〕.中國老年學雜志,2013;33(20):4965-7.

8秋 楠,黨小軍,張越林,等.高血壓腦出血患者IL-2、sIL-2R表達意義的研究〔J〕.現代檢驗醫學雜志,2005;20(4):21-2.

9張越林,劉 瑄,師 蔚.高血壓腦出血患者細胞免疫及IL-2、sIL-2R表達的意義〔J〕.西安交通大學學報(醫學版),2002;23(6):555-7.

10張明偉,彭 俊,劉 陽,等.高血壓腦出血患者血清和顱內血腫液中IL-1β、IL-6、TNF-α的含量研究〔J〕.中華神經外科疾病研究雜志,2010;9(2):138-40.