探討肝病患者HBsAg、HBeAg與HBV DNA定量水平的相關性和臨床價值

沈 蓉，黃 新，姚紅玉，曹利華，宋健輝

（啟東市人民醫院，江蘇 南通 226200）

乙型肝炎多為散發性，無一定的流行周期及季節性，我國是乙肝高發區，中國曾是乙肝高感染率的國家，1992年全國血清流行病學調查人群乙肝病毒感染率達60%，表面抗原攜帶率為9.75%，全國乙肝病毒攜帶者約為1.2億人。其中1/4最終要發展為慢性肝炎，現有慢性肝炎病人1300萬左右，每年新發的肝炎（多為乙型）病人約230萬[1-3]。原發性肝癌的發生率仍有38/10萬，提示對肝癌早診早治及病因的研究還需持續深入進行。在乙肝患者中，部分病人由于病毒長期活動未能控制，則易發生肝纖維化，并可進展為肝硬化、肝癌。因此如何通過檢測指標的高低來衡量病情程度，從而控制病情的進展，降低肝硬化、肝癌患者的發生率和死亡率，是迫切需要解決的問題。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

入選患者共200例乙肝病例，男性149例，女性51例，均為2011年6月～2014年12月我院肝病隊列庫中慢性肝病患者，其中慢性乙肝128例，肝硬化35例，原發性肝癌16例，既往均未抗病毒藥物。

1.2 血清學檢測指標及方法

采用負壓靜脈采血法，離心分離后，提取血清，凍存與-20°C以下冰箱備檢。采用雙抗體夾心時間分辨免疫熒光法定量檢測血清中的HBsAg、HBeAg，試劑由上海新波生物技術有限公司提供。HBsAg參考范圍≥0.2 ng/ml的樣品判斷為陽性，否則為陰性。濃度值＞150 ng/ml的血樣應稀釋后再計算濃度值，稀釋后濃度應在線性范圍內。HBeAg參考范圍本試劑盒CUT OFF值為0.5 PEIU/ml。采用PCR體外擴增的方法，通過熒光信號的變化，定量檢測血清中的HBV-DNA的含量。HBV-DNA定量采用PCR-熒光探針法，參考值測定拷貝數＜500。該試劑由上海科華實業有限公司提供。

1.3 統計學方法

采用SPSS 19.0或Graphpad.prism4.0軟件進行x2檢驗、r檢驗統計分析。

2 結 果

2.1 不同慢性肝病男女性發病構成性比

結果顯示，慢性乙型肝炎患者男女發病構成性比2.12:1，肝硬化患者男女發病構成性比為4.83:1，肝癌患者男女發病構成性比為3:1。見表1。

表1 不同慢性肝病男女性構成比例

2.2 慢性肝病HBsAg、HBeAg與HBV DNA定量的分析

HBsAg定量平均數為4317.65±4006.43，HBeAg平均數為505.19±522.57，經統計分析γ=-0.41，P＜0.05，HBV DNA平均數為6.97±1.65，經統計分析γ=-0.44，P＜0.05，HBsAg和HBeAg與HBV DNA定量均呈負相關性。見表2。

表2 HBsAg、HBeAg與HBV DNA定量的相關性分析

4317.65±4006.43 HBeAg 505.19±522.57 -0.41 ＜0.05 HBV DNA 6.97±1.65 -0.44 ＜0.05±s γ P HBsAg 200指標 n x

2.3 對三種肝病的HBeAg與HBV DNA陽性率比較

HBeAg定量分析采用x2檢驗x2=26.72，P＜0.005，表明三種肝病HBeAg陽性率之間有顯著意義；慢肝與肝硬化相比，經統計分析x2=4.005，P＜0.05有顯著意義；慢肝與肝癌相比，經統計分析x2=5.43，P＜0.025有非常顯著意義；肝硬化與肝癌相比結果較接近，經統計分析x2=0.62，P＞0.05無顯著意義。

三種肝病HBV-DNA定量分析采用x2檢驗x2=4.68，P＞0.05無顯著意義；慢肝和肝硬化比較x2=0.0017，P＞0.5無統計意義；慢肝和肝癌比較x2=4.57，P＜0.05有意義；肝硬化與肝癌比較x2=4.95，P＜0.05有意義。

3 討 論

表面抗原大量存在于感染者血液中，是HBV感染以及檢測的主要標志。它具有抗原性，可誘導機體產生特意保護性的抗-HBs，也是制備疫苗的最主要成分。E抗原為可溶性蛋白質，傳染性強，游離存在于血液中，雖然很早就被發現，在病理上認為是HBV復制以具有強感染性的一個指標，但其功能尚不清楚。乙肝病毒DNA是HBV感染最直接、特異性強和靈敏性高的指標，HBV-DNA陽性，提示HBV復制和有傳染性。HBV-DNA越高表示病毒復制越厲害，傳染性強。中國以及亞太地區乙肝治療指家均指出：乙肝病毒的持續復制是乙肝致病的根本原因，乙肝治療的根本目的是抑制病毒復制。

本研究顯示，入選的肝病患者血清HBsAg與HBeAg定量相關分析，γ=-0.41，P＜0.05，表明HBsAg與HBeAg有負相關性，入選肝病患者血清HBsAg與HBV DNA定量相關分析，γ=-0.44，P＜0.05，表明HBsAg與HBV DNA復制水平亦呈負相關，與丁佳臣等報道的一致。但也有孫丹鳳、陸許貞等研究認為HBsAg與HBV DNA定量水平呈正相關，可能本研究中研究病例數量少，病例中有使用抗病毒藥物等因素有關，有待進一步考證。

本研究還顯示，從慢性乙肝至肝硬化、肝癌的HBeAg、HBV-DNA定量數據的陽性數及陽性率統計分析，HBeAg、HBV-DNA的陽性率隨著肝病程度的嚴重反而逐漸下降，這也提示肝標志物的定量檢測數逐漸下降反而是肝病進展的信號，因結合B超，CT等輔助檢查加以鑒別。

國內近年來一些醫務工作者也曾探討過慢性乙型肝炎患者血清中HBsAg、HBeAg、與HBV-DNA定量的關系，徐敬軒，謝而付等認為同時檢測HBVDNA與HBeAg能更好地用于臨床診斷與療效觀察，HBeAg隨著HBV-DNA拷貝數的增加而增加，而HBsAg卻呈下降趨勢。謝而付，黃佩珺等在研究慢性HBV感染者血清中HBV-DNA與HBsAg、HBeAg的關系中選取555例HBsAg陽性的慢性HBV感染患者血清標本，有338例檢出HBVDNA陽性，陽性率為60.9%，對HBV-DNA濃度取對數后分為3組，＞6組，3-6組，＜3組。三組之間HBsAg、HBeAg存在顯著差異，隨著HBV-DNA拷貝數的增加，HBsAg量呈下降趨勢，而HBeAg濃度呈上升趨勢，且均存在相關性。對肝病的治療和評估有一定的指導意義。

慢性乙肝、肝硬化和肝癌已經成為人類健康的常見病、多發病。本研究通過對不同慢性肝病患者的HBsAg、HBeAg與HBV DNA定量的相關性分析，積極探索相關血清學指標對肝癌早期鑒別診斷以及慢性乙型肝炎患者預后進展的判斷。

綜上所述，加強對HBsAg、HBeAg、HBV-DNA定量的聯合檢測，可以及早的采取措施，控制病情的進展，從而降低肝硬化、肝癌患者的發生率和死亡率。

[1] 張文瑾,范振平.慢性乙型肝炎抗病毒治療[J].中國臨床醫生,2012,40(1):7-10.

[2] 孫 慧,吳金明.乙型病毒性肝炎肝細胞損傷機制的研究進展[J].醫學綜述,2008,14(21):3296-3300.

[3] 王曉琳,鄒桂舟,葉 珺,等.乙肝表面抗原在慢性乙型肝炎病毒感染臨床不同階段的變化[J].實用醫學雜志,2014,30(17):2756-2767.