景德鎮市3例人感染H7N9禽流感外環境監測數據分析

涂智杰，胡芹

本流感網絡實驗室從2016年12月29日到2017年1月9日共發現3例人感染H7N9病例，3位感染者都為男性，分別為63歲，53歲和3歲。根據流行病學調查，發現三位感染者均有活禽暴露史。為了防止更多人感染H7N9病例的出現，對三位感染者的外環境進行采樣，送至實驗室檢測并進行數據分析，實驗數據報告如下。

1 材料與方法

1.1 材料 根據《人感染H7N9禽流感疫情防控方案》（第3版）[1]對病例可能暴露的禽類飼養或交易等場所，采集禽類糞便、籠具涂拭標本等環境標本共37例，涉及7個活禽交易菜市場的29例標本，4個家庭散養的8例標本。

1.2 方法 由人感染H7N9禽流感的患者所在地的區疾控專業人員進行外環境標本采集。采集外環境標本的病毒管購置友康恒業生物科技（北京）有限公司。采集外環境標本時用隨管配備的醫用棉拭子涂抹籠具表面、糞便、宰殺或擺放肉案板表面及其他（如飼料盒或宰殺盆）和收集禽類飲水。采樣后立即將棉簽放入裝有3ml保存液的采樣管中，保存在4℃條件下24h內送至景德鎮市疾病預防控制中心國家流感網絡實驗室檢測。儀器為ABI7300實時熒光PCR儀；RNA提取采用江蘇碩世生物科技有限公司全自動核酸提取儀 （SSNP-2000A）提??；核酸檢測采用甲型流感通用、禽流感H5亞型、H7亞型和H9亞型4種單通道病毒核酸檢測試劑盒（江蘇碩世生物科技有限公司），具體聚合酶鏈反應體系、反應參數及實驗操作參照試劑盒說明書。

2 結果

2.1 活禽交易市場檢測結果 共采集7個活禽交易市場的29例環境標本，檢測陽性數27例。涵蓋5種標本類型，其中籠具表面標本9例，陽性數8例分別為H5+H7亞型混合型1例、H7+H9亞型混合型4例、H5+H7+H9亞型三種混合型3例；糞便標本9例，陽性數9例分別為H5亞型1例、H7亞型1例、H5+H7亞型混合型2例、H7+H9亞型混合型3例、H5+H7+H9亞型三種混合型2例；禽類飲水標本2例，陽性數2例分別為H5+H7亞型混合型1例、H5+H7+H9三種混合型1例；宰殺案板表面標本4例，陽性數3例分別為H5+H7+H9亞型三種混合型3例；其他（飼料盒/宰殺水）標本5例，陽性數5例分別為H5亞型1例、H7亞型1例、H5+H7亞型混合型1例、H5+H7+H9亞型三種混合型2例。見表1、圖1。

2.2 家庭散養禽類檢測結果 共采集4個家庭散養禽類標本共8例，陽性數6例。涵蓋3種標本類型，其中籠具表面標本2例，陽性數1例為H7+H9亞型混合型；糞便標本4例，陽性數3例分別為H7亞型1例、H7+H9亞型混合型1例和1例未分型；其他（飼料盒）標本2例，陽性數2例分別為H7亞型1例、H9亞型1例。見表2、圖2。

表1 活禽交易市場采集標本檢測情況

表2 家庭散養禽類采集標本檢測情況

圖1 活禽交易市場采集樣品檢測情況

3 討論

此次外環境標本采集共有37例，其中只有4例標本檢測結果為陰性，分別為2例為籠具、1例鳥糞（庭院內）和1例宰殺盆標本。分析此4例標本檢測結果陰性，可能與采集位置有關，并不能完全排除4例標本不含有禽流感病毒。7個活禽交易市場的標本共采集29例標本，其中27例甲型陽性，而H7亞型陽性就占了25例，呈現出單獨H7亞型或是H5+H7混合型和H5+H7+H9混合型出現，具有較高的流感基因重配風險；2例單獨H5亞型標本。提示7個活禽交易市場是感染H7N9的高危因素，需要休市或是或關閉活禽市場。4個家庭散養禽類標本共采集8例，其中6例甲型陽性，而H7亞型陽性就占了4例，呈現單獨H7亞型或是H7+H9混合型出現，具有流感基因重配風險；1例H9亞型和一份未分型。提示家庭散養禽類也是感染H7N9的高危因素，建議對散養禽類進行撲殺，降低感染風險。

圖2 家庭散養禽類采集標本檢測情況

本實驗室檢出的人感染H7N9禽流感病例與文獻中報道的情況一致，確診病例以男性病例和中老年病例為主[2]。目前人感染H7N9禽流感主要通過禽類接觸引起，相關資料不支持存在人與人之間接觸傳播，主要以散發為主[3-11]。H7N9感染人群具有特別的型別、年齡分布流行病學特征。然而H7N9禽流感病毒在禽類動物尤其是家禽中無明顯致病性，而且此次檢測的家禽攜帶多種亞型禽流感病毒，病毒內部的高頻率基因突變，以及抗藥性毒株的出現等[12-15]，表明該禽病毒進一步擴散引發人間大流行的風險很大。因此，常年監測活禽交易市場和家庭散養禽類攜帶禽流感病毒相關數據，建立可靠的風險評估和預防控制措施很有必要。