血小板計(jì)數(shù)假性減低的原因分析

劉春都

（南京市浦口醫(yī)院檢驗(yàn)科，江蘇 南京 210031）

當(dāng)前，血細(xì)胞分析儀在計(jì)數(shù)血小板時(shí)，常采用電阻抗原理，并且與紅細(xì)胞在同一通道內(nèi)檢測，在計(jì)數(shù)血小板時(shí)，常受到干擾，使得血小板測定值假性降低。本文著重討論血細(xì)胞分析儀在測定血小板時(shí)，出現(xiàn)假性降低的原因。

1 材料和方法

1.1 儀器和試劑

SysmexTX-4000i血細(xì)胞分析儀；Olypus雙目顯微鏡；EDTA-K2抗凝管。試劑：血細(xì)胞分析儀配套原裝試劑及高、中、低值質(zhì)控品。草酸銨稀釋液；瑞氏染液。

1.2 試驗(yàn)標(biāo)本來源

試驗(yàn)所需標(biāo)本來自本院2017年1月～2017年6月靜脈血分析標(biāo)本，共累計(jì)收集27416例，然后按本科室血小板復(fù)檢標(biāo)準(zhǔn)，對于血小板數(shù)＜100×109/L或＞300×109/L或血小板直方圖異常的標(biāo)本均需涂片染色鏡檢及人工計(jì)數(shù)，共篩選出2164份。

1.3 方法

（1）在血分析儀上檢測27416份標(biāo)本，獲得血小板數(shù)量及直方圖。

（2）人工計(jì)數(shù)血小板，采用草酸銨溶血?jiǎng)┲苯佑?jì)數(shù)法，由2名有經(jīng)驗(yàn)的檢驗(yàn)人員按照《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》的要求進(jìn)行計(jì)數(shù)[1-2]，再取均值。

（3）制作血涂片，瑞氏染色后，顯微鏡觀察血小板分布及形態(tài)。

本試驗(yàn)所需的儀器、試劑、操作均按照操作程序要求。儀器狀態(tài)良好、穩(wěn)定，試劑有效、在控，操作規(guī)范標(biāo)準(zhǔn)，室內(nèi)質(zhì)控在控。

2 結(jié) 果

（1）依據(jù)儀器上檢測的血小板的數(shù)目及直方圖，按照本科室的復(fù)檢標(biāo)準(zhǔn)，共篩選出2164份標(biāo)本進(jìn)行復(fù)檢，復(fù)檢率為7.89%。

（2）將2164份需復(fù)檢的標(biāo)本進(jìn)行人工計(jì)數(shù)，并將兩種方法的結(jié)果相比較，結(jié)果有1428例標(biāo)本出現(xiàn)兩種方法不符。見表1。

表1 儀器法與人工法血小板數(shù)結(jié)果比較

（3）在這1428例標(biāo)本中，有673例出現(xiàn)血小板假性減少，按其形成原因分類。見表2。

表2 原因分類（±s）

表2 原因分類（±s）

EDTA-PTCP6765±12197±238.425＜0.01血小板衛(wèi)星現(xiàn)象273±19176±3112.341＜0.01大血小板5394±13204±197.658＜0.01冷凝集現(xiàn)象1675±18191±2211.574＜0.01藥物誘發(fā)6292±14154±1810.521＜0.01高脂血癥7587±11184±169.587＜0.01疾病引起11179±12135±218.683＜0.01血液采集方面17856±17214±2514.251＜0.01儀器吸樣不足8765±15205±2412.541＜0.01其它原因2261±19167±2313.841＜0.01

3 討 論

血細(xì)胞分析儀具有簡便、快速、效率高、重復(fù)性好、檢測指標(biāo)多等優(yōu)點(diǎn)，使得它在醫(yī)院檢驗(yàn)科具有無可替代的優(yōu)勢作用，但由于其本生設(shè)計(jì)原理的限制，紅細(xì)胞和血小板在同一通道內(nèi)檢測，它們相互影響，血小板更易出現(xiàn)假性減少，常見原因分析如下。

3.1 EDTA-依賴性血小板假性減少（EDTAPTCP）

由表2可知，它占血小板假性減少的10.0%，雖然比例不小，但其發(fā)生機(jī)制尚不確定，有報(bào)道[3-4]認(rèn)為是EDTA誘導(dǎo)了血小板表面隱匿性抗原，與抗血漿中的抗血小板抗體和抗心磷脂抗體結(jié)合而形成血小板聚集團(tuán)塊，本來是幾個(gè)、幾十個(gè)甚至更多的血小板，儀器誤認(rèn)為是一個(gè)血小板，當(dāng)血小板團(tuán)塊大小達(dá)到紅細(xì)胞檢測閾值，儀器誤認(rèn)為為紅細(xì)胞，這樣就導(dǎo)致了血小板明顯假性減少（P＜0.01），這容易引起臨床上的誤診誤治，帶來嚴(yán)重的后果。因此，需要盡早發(fā)現(xiàn)EDTA-PTCP，常采用手工法計(jì)數(shù)和染色鏡檢，重新采集用肝素抗凝的靜脈血及時(shí)儀器法檢測，可以糾正這種情況。

3.2 血小板衛(wèi)星現(xiàn)象

本試驗(yàn)共發(fā)現(xiàn)2例，是血小板通過其表面的GPⅡb/Ⅲa與中性粒細(xì)胞或其它白細(xì)胞表面的IgG Fc段結(jié)合[5-6]，在這些細(xì)胞周圍形成一圈血小板，有的血小板還被這些白細(xì)胞吞噬，使得血小板計(jì)數(shù)假性降低，可通過染色鏡檢觀察到，用枸櫞酸鹽更換EDTA后，可以克服。

3.3 巨大血小板造成的血小板假性降低[7]

在本次試驗(yàn)中共有53例。當(dāng)血小板體積過大，大小超過25 fl時(shí)[8]，血小板會(huì)被儀器認(rèn)為是紅細(xì)胞，使得血小板計(jì)數(shù)減少。通過人工法計(jì)數(shù)得到糾正，涂片染色鏡檢觀察到血小板的形態(tài)。

3.4 冷凝集現(xiàn)象使得血小板假性減少[9]

一些病人體內(nèi)冷凝集素效價(jià)高，當(dāng)采集的抗凝血在室溫低的特殊情況下，可以使得血小板聚集在一起，導(dǎo)致儀器法計(jì)數(shù)減少，當(dāng)遇到這種情況時(shí)，可將標(biāo)本置于37℃的水浴箱30分鐘后，聚集的血小板可以分開，從而得到糾正。

3.5 藥物

某些藥物，如甲基多巴、青霉素可以誘發(fā)血小板聚集，當(dāng)儀器法計(jì)數(shù)血小板時(shí)，出現(xiàn)假性減少。這時(shí)涂片染色鏡檢可看到有多少不一的血小板聚集在一起。

3.6 高脂血癥

當(dāng)血液處于高脂狀態(tài)[10]下，血小板聚集性增強(qiáng)，使某些患者血小板聚集，而引起血小板儀器法計(jì)數(shù)時(shí)減少。從上表2可知，在本次試驗(yàn)中，儀器法血小板計(jì)數(shù)為87±11，而人工計(jì)數(shù)為184±16，有極顯著性差異（P＜0.01）。

3.7 疾病

某些疾病如糖尿病、高血壓等，容易引起血管內(nèi)膜損傷，血小板聚集在破損處，引起循環(huán)血液中的血小板減少。由表2可知，兩種方法有極顯著差異（P＜0.01）。

3.8 采集血液時(shí)不順利

過分?jǐn)D壓周圍組織，或血液沒有充分混勻，使血液凝固，使得血小板消耗掉。雖然，我們也強(qiáng)調(diào)了操作要標(biāo)準(zhǔn)，但本文還是有178例不合格的標(biāo)本，所以當(dāng)涂片鏡檢有血小板聚集，就要想到可能是人為技術(shù)性的問題，這時(shí)需要重新抽血，再次儀器法計(jì)數(shù)，同時(shí)需鏡檢，綜合分析引起血小板假性減少的原因。

3.9 儀器吸樣量不足

當(dāng)采集的血液有少量不足，或是吸樣針內(nèi)壁有少許殘?jiān)蚱渌蛴绊懥搜“宓奈鼧恿?，使得血小板?jì)數(shù)減少，往往也伴隨有紅細(xì)胞計(jì)數(shù)的減少，通過人工計(jì)數(shù)就可以糾正。

3.10 其它原因

本文共有22例標(biāo)本，沒有找到可以解釋的原因，儀器法計(jì)數(shù)為61±19，而人工計(jì)數(shù)為167±23，兩者有極顯著差異（P＜0.01），至于引起的原因，可能是自己還沒有發(fā)現(xiàn)而已。

綜上，引起血小板假性減少的原因很多，當(dāng)結(jié)果與患者臨床表現(xiàn)，癥狀體征不相符時(shí)，要考慮到血小板假性減少的情況，結(jié)合血小板直方圖及報(bào)警提示、人工計(jì)數(shù)、涂片染色鏡檢找到合理解釋的原因，糾正假性減少的結(jié)果，獲得準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)，供臨床醫(yī)生的診斷治療提供有力的幫助。

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