波蘭豬場中首次檢測到豬圓環(huán)病毒3型

何小莉，曾智勇，梁海英 （編譯）

（貴州大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院，貴州 貴陽 550025）

豬圓環(huán)病毒系圓環(huán)病毒科圓環(huán)病毒屬成員，為二十面體對(duì)稱結(jié)構(gòu)，無囊膜，單股負(fù)鏈DNA，基因大小約2 000 bp，是現(xiàn)在已知最小的能自主復(fù)制的病毒之一。迄今為止，兩種豬圓環(huán)病毒（PCV）已被人們廣泛研究，PCV1對(duì)豬沒有致病性，PCV2是PCV相關(guān)疾病的主要致病因子。2016年，Phan等從美國不同地區(qū)的哺乳仔豬、9～10周齡患有心肌炎或呼吸系統(tǒng)疾病的育肥豬中檢測出一種新型的豬圓環(huán)病毒，并命名為PCV3。Palinski等（2016年）從患有豬皮炎腎炎綜合征、繁殖障礙組織樣品中，也先后檢測到PCV3，并對(duì)2010年至2016年期間的48例豬皮炎腎病綜合征、271例豬呼吸系統(tǒng)疾病、34例的口腔液或鼻拭子的病例樣本進(jìn)行檢測，結(jié)果顯示有45例為PCV3陽性。在中國，Shen等（2017年）從患有呼吸系統(tǒng)疾病并伴有高熱(＞40 ℃)的仔豬中檢測到PCV3，而PCV2、PRRSV（繁殖與呼吸綜合征病毒）和PRV（豬偽狂犬病毒）檢測結(jié)果均為陰性。Ku等（2017年）在中國的35個(gè)豬場中發(fā)現(xiàn)有24個(gè)豬場存在PCV3的感染，推測是引起繁殖障礙的重要原因。早在2009年，Li等曾從加利福尼亞州的商品豬樣本中檢測到類PCV3樣序列。上述結(jié)果表明PCV3已廣泛存在，但所有關(guān)于PCV3檢測的報(bào)道都集中在未知病因的病例上。目前為止，歐洲尚無PCV3的相關(guān)報(bào)道。

試驗(yàn)隨機(jī)選取了2014～2017年期間-20 ℃保存的源自波蘭5個(gè)省，共14個(gè)常規(guī)豬場的3～20周齡豬血清樣本共1 050份，按周齡分組后，每個(gè)組選取8～10個(gè)血清樣品，每個(gè)組中取4～6個(gè)血樣合為1份，所有組共184份。同時(shí)，從其中12個(gè)豬場中，再分別隨機(jī)抽取10～20頭母豬血液樣品，每個(gè)豬場按每5個(gè)血樣合為1份，共32份。分別提取每份樣本核酸，對(duì)樣本進(jìn)行PCV3 ORF2的實(shí)時(shí)PCR檢測，Ct值≤37判斷為陽性，再將Ct值最小的樣本進(jìn)行靶向PCV3 ORF2的PCR檢測，將獲得的基因組序列應(yīng)用Lasergene 14.0進(jìn)行比對(duì)。

在上述調(diào)查豬場中PCV3的總體陽性率為85.7%（12/14），在單個(gè)豬場中，PCV3陽性率在5.9%～65%之間不等。在檢測的184份豬血清中，共46份PCV3檢測為陽性；母豬血液陽性率為29%（9/31），斷奶仔豬和育肥豬的陽性率分別為26.1%（12/46）和28.0%（33/118）。除此之外，在所檢測的12個(gè)豬場中有6個(gè)豬場母豬檢測到了PCV3；從源于10個(gè)豬場的20份斷奶仔豬樣品中，僅1份樣品實(shí)時(shí)PCR檢測為陽性。

將來自SU豬場的育肥豬的血清進(jìn)行PCV3 ORF2的PCR擴(kuò)增及測序，大小為359 bp，對(duì)應(yīng)PCV3基因組序列位置為1 629～1 987。將序列進(jìn)行比對(duì)，與此前報(bào)道的PCV3 29160（登錄號(hào)：KT869077）和PCV3-US/SD2016（登錄號(hào)：KX966193）的同源性分別為97.5%和99.7%。

14個(gè)豬場血清中PCV3的檢測結(jié)果表明，該病毒廣泛流行于波蘭各豬場中，可能在歐洲的其他地方也廣泛存在。然而，尚無法判斷豬只的健康狀況與PCV3的流行有何直接聯(lián)系。在所檢測的豬場中，名為KS和PR的豬場PCV3的陽性率分別高達(dá)64.3%和65%，而名為RO豬場的PCV3陽性率僅為5.9%。導(dǎo)致這些差異的原因，可能與豬場的管理制度、生物安全體系和衛(wèi)生管理水平有關(guān)，同時(shí)不排除人畜共患這一傳播途徑的可能。

根據(jù)本次研究結(jié)果表明，3～4周齡的仔豬較少感染PCV3，說明母源抗體可能發(fā)揮了一定的保護(hù)作用。PCV3感染大多發(fā)生于斷奶后，所檢測的14個(gè)豬場中，斷奶仔豬抗原陽性率為26.1%，育肥豬抗原陽性率為28%。在KS豬場（剛發(fā)生繁殖障礙不久），PCV3在3～16周齡豬群中感染比例較大，但是，源自母豬血液樣品的實(shí)時(shí)PCR檢測結(jié)果卻均為陰性。

本次研究結(jié)果表明波蘭豬場存在PCV3感染，而且非常普遍，同時(shí)這是歐洲第1例關(guān)于PCV3感染豬的報(bào)道。目前還未發(fā)現(xiàn)因PCV3導(dǎo)致的急性病例，但并不能排除這些亞臨床感染會(huì)對(duì)豬只健康造成影響。PCV3病原檢測的發(fā)現(xiàn)和進(jìn)一步研究是有挑戰(zhàn)性的，所以更需要專注于具有不同臨床體征患病動(dòng)物監(jiān)測，以檢測其他已知或潛在的病原體，以期對(duì)新病毒的遺傳多樣性展開分析。