不孕癥患者宮頸分泌物沙眼衣原體和解脲支原體的檢測及臨床意義

宋玉美

(周口市疾病預防控制中心專科病醫院 檢驗科 河南 周口 466000)

隨著社會生活節奏加快，工作壓力不斷增大，女性不孕癥的發病率呈逐年增長趨勢，其影響因素主要有排卵因素、輸卵管因素、子宮因素等，給患者造成較大痛苦[1-2]。宮頸分泌物沙眼衣原體(chlamydia trachomatis，CT)與解脲支原體(ureaplasm urealyticum，UU)容易對生殖道產生感染，引發宮頸炎，甚至導致不孕[3]。熒光定量PCR技術(realtime fluorescence quantitative PCR，RTFQ-PCR)是一種基于酶促化學反應放大試管中待測基因，能短時間內將待測基因擴增至上百萬倍，提高基因診斷靈敏度，降低診斷難度[4]。本研究通過檢測不孕癥患者宮頸分泌物沙眼衣原體和解脲支原體的感染情況，探討其臨床意義。

1 資料與方法

1.1一般資料選取2014年8月至2016年9月周口市疾病預防控制中心專科病醫院106例不孕癥女性患者作為觀察組，年齡21～36歲，平均(28.45±2.64)歲，其中59例原發性不孕患者(原發性不孕組)和47例繼發性不孕患者(繼發性不孕組)。另選同期102例已生育健康體檢女性作為對照組，年齡20～37歲，平均(29.25±3.13)歲。觀察組與對照組受檢者一般資料比較，差異無統計學意義(P>0.05)，所有患者均自愿參加本研究并簽署知情同意書。且本研究經周口市疾病預防控制中心專科病醫院倫理協會審核批準。

1.2方法

1.2.1儀器選擇及標本采集 以定時熒光定量PCR技術檢查，儀器由中山大學達安基因股份有限公司提供。采用無菌窺陰器，充分顯露宮頸，宮頸外分泌物用無菌棉球擦拭獲取，并于不孕患者宮頸處插入無菌棉拭子，同時轉動，停留數秒后取出，將棉拭子置于無菌試管，密閉送檢。

1.2.2FQ-PCR檢測 試劑盒由深圳匹基生物工程公司提供，嚴格依照劑盒說明書操作，標本棉拭+1.5 ml生理鹽水充分洗滌，吸取混懸液，再加入核酸提取液A(100 μl)，混勻，離心(13 000 r/min)10 min，棄上清液；加入核酸提取液B(50 μl)，混勻，100 ℃裂解10 min，離心(13 000 r/min)處理5 min，取上清液(DNA)，將其作為反應模板，并進行FQ-PCR檢測。反應條件：93 ℃ 5 min預變性，再按93 ℃ 45 s、55 ℃ 45 s進行40個反應循環。結束后電腦自動計算定量結果，標本均按試劑盒提供定量陽性質控標準，做定量陽性質控，檢測后均進行陰性及陽性對照。

1.3觀察指標①統計對比兩組UU、CT及混合UU+CT感染檢測結果；②對比觀察組中原發性不孕組及繼發性不孕組UU、CT及混合UU+CT感染檢測結果。

1.4統計學分析采用SPSS 20.0軟件進行數據分析，定性資料以率(%)表示，組間比較采用χ2檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

觀察組UU DNA、CT DNA及混合感染陽性率均高于對照組，差異有統計學意義(P均<0.05)；繼發性不孕組UU DNA、CT DNA及混合感染陽性率均高于原發性不孕組，差異有統計學意義(P均<0.05)。見表1、2。

表1 觀察組與對照組受檢者檢測結果比較[n(%)]

3 討論

表2 原發性不孕組及繼發性不孕組患者檢測結果比較[n(%)]

不孕癥是指1 a未采取任何避孕措施，性生活正常而沒有成功妊娠，主要分為原發性不孕及繼發性不孕。生殖系統感染是影響女性不孕主要因素之一，多種微生物均可引起女性生殖道感染，由于UU、CT感染癥狀較輕，未受到重視，易導致反復感染，嚴重者甚至造成不孕[5-6]。熒光定量PCR技術是一種新型檢查技術，可及早檢測出宮頸分泌物中UU、CT感染情況，逐漸廣泛應用于臨床。

UU是女性下生殖道最常見的微生物，可損害精子代謝和生理機能，影響傳統卵細胞能力，導致女性不孕；同時，UU可導致輸卵管黏膜的纖毛細胞脫落，影響其正常受精。CT結構獨特，自身無法合成能量物質，常通過寄生宿主細胞獲取三磷酸腺苷及氨基酸，傳染性極高；CT于人體黏膜最常見，繁殖力強，累及宮頸柱狀上皮，引起宮頸管炎，進而侵犯輸卵管上皮，導致輸卵管蠕動異常及阻塞造成繼發不孕。UU、CT混合感染易導致輸卵管炎癥反應，導致宮腔阻塞，影響正常受精，破壞妊娠條件引起不孕。熒光定量PCR技術是一種新型臨床檢測技術，可有效檢測女性UU、CT感染，本研究采用FQ-PCR技術對女性宮頸分泌物進行檢查，具有以下優點。①檢測簡單、迅速：熒光探針具有DNA探針雜交作用，閉管操作可降低假陽性率；②通過對熒光信號進行測定，具有較高敏感度，定量范圍寬且準確度高，可滿足臨床需要。本研究結果顯示，觀察組UU DNA、CT DNA及混合感染陽性率均高于對照組，差異有統計學意義(P均<0.05)；繼發性不孕組UU DNA、CT DNA及混合感染陽性率均高于原發性不孕組，差異有統計學意義(P<0.05)。該結果表明UU、CT感染可能為引發不孕癥發生的重要因素，通過熒光定量PC技術對不孕癥患者行生殖道UU、CT進行篩查，有助于降低不孕癥的發生風險。

綜上所述，UU、CT感染可能是導致不孕癥影響因素，臨床應及早檢測UU、CT及混合感染情況，有助于臨床及時診斷治療，降低不孕癥的發生風險。

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