貴州雷山縣春茶中農藥殘留膳食攝入風險評估

王 微，胡 毅，鄢人雨，蘭吉玉

（黔東南州農產品質量安全檢測中心 ，貴州 凱里 556000）

“柴米油鹽醬醋茶”，俗稱開門七件事，可見茶的重要性。黔東南州是茶葉生產大州，茶產業亦是雷山縣的支柱產業，已成為茶區農民增收致富奔小康的重要途徑。截止2016年，雷山縣茶園面積1.07萬hm2（其中無公害茶葉基地達1萬hm2，有機茶葉面積達到624.5 hm2）。登記茶企業156家，其中合作社51家、省級龍頭企業5家、州級龍頭企業7家、州級示范社1家、獲得對外貿易經營資格2家。

2013年，雷山縣獲中國國際茶文化研究會授予的“中國茶文化之鄉”，雷山銀球茶被授予“中華文化名茶”稱號；2015年，“雷山銀球茶”獲國家地理標志保護產品、貴州省首屆春茶斗茶大賽綠茶類金獎“茶王”和百年世博中國名茶金獎。

目前，我國茶園中仍存在農藥用量大、次數多甚至濫用等情況[1-2]，農藥污染后的茶葉，除降低其品質外，飲用隨之帶來的對人體的急慢性毒性問題，特別是致癌和致突變等問題更是讓人聞之后怕[3]。為了解雷山縣茶葉農藥殘留情況，我們對雷山縣春茶農藥殘留進行了檢測分析。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

1.1.1 儀器

分散機（德國IKA），旋轉蒸發儀（上海亞榮生化儀器廠），氮吹儀（UGC-24C 北京優晟），離心機（TG-16-WS 湖南湘儀），電子天平（JY5002 上海舜宇恒平），三重四級桿串聯氣相色譜-質譜聯用儀（7890B-7000C 安捷倫），三重四級桿串聯液相色譜-質譜聯用儀（AcQuity H/TQ-Smicro沃特世）。

1.1.2 試劑

乙腈（色譜純），甲苯（色譜純），正己烷（TEDIA公司，色譜純），氯化鈉（分析純），無水硫酸鈉（分析純），Cleanert TPT柱（艾杰爾）。

1.2 樣品采集

雷山縣以春茶為主，約占該縣茶葉生產總量的90%以上，其中名優茶占40%、大眾茶占60%。采集當地生產的有代表性的綠茶、紅茶樣品，每份樣品取樣量不少于500 g，同時記錄原料來源和生產批次。采樣時間：春茶4月至5月15日。共采集樣品59個。

1.3 檢測指標

吡蚜酮、蟲螨腈、敵百蟲、啶蟲脒、甲胺磷、甲拌磷、甲基對硫磷、甲基硫環磷、克百威、硫環磷、氯唑磷、滅線磷、內吸磷、氰戊菊酯、三氯殺螨醇、水胺硫磷、特丁硫磷、辛硫磷、氧樂果、茚蟲威、滅多威、乙酰甲胺磷、氯氰菊酯、滴滴涕、溴氰菊酯、殺螟硫磷、氟氰戊菊酯、六六六、氯菊酯、苯醚甲環唑、除蟲脲、硫丹、噻嗪酮、噠螨靈、丁醚脲、聯苯菊酯、氯氟氰菊酯和高效氯氟氰菊酯、甲氰菊酯、吡蟲啉、多菌靈、噻蟲嗪、氟氯氰菊酯和高效氟氯氰菊酯、噻螨酮、喹螨醚、氯噻啉、毒死蜱、殺撲磷、炔螨特、丙溴磷、噻蟲胺、乙螨唑、氟苯蟲酰胺、唑蟲酰胺、氟蟲脲、百菌清、噻蟲啉、西瑪津、莠去津、吡唑醚菌酯、甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽、甲萘威、草甘膦和草銨膦共63個農藥指標和1個化學物質：蒽醌[4]。

1.4 樣品前處理

提?。悍Q取5.0 g茶葉于100 mL離心管中，加入 25 mL 乙腈，15000 r/min 均質提取 1 min，4500 r/min 離心 5 min 取上清液 10 mL。凈化：用 Cleanert TPT 柱凈化后濃縮定容至 2 mL。待測上機：上述液體取1 mL進行GC-MS/MS上機檢測，取1 mL用甲醇-水進行溶劑交換并定容1 mL，進行LC-MS/MS上機檢測。

1.5 數據分析方法

檢測后根據GB 2763-2016中規定的茶葉限量要求進行判定樣品的合格率，同時作農藥指標的檢出規律和殘留水平等分析；并根據膳食評估公式對樣品進行風險評估分析。膳食暴露評估是食品危險度評估的重要組成部分，也是膳食安全性的衡量指標，分為長期膳食攝入和慢性風險評估

長期膳食攝入評估[5]：按照FAO（聯合國糧食及農業組織）統計數據[6]中國居民每人每天飲茶 11.4 g、成人體重按照60 kg，用公式（1）計算國家估算每日攝入量：

式中：NEDI—國家估算每日攝入量，單位mg/kg bw/d；STMR—農產品的規范試驗殘留平均值，單位mg/kg；F—農產品的消費量，單位kg/d；bw—人群平均體重，單位kg。

農殘慢性攝入風險[7]用國家估算每日攝入量占ADI的百分比表示，用公式（2）計算：

式中：ADI—每日允許攝入量，單位mg/kg bw/d；%ADI—慢性風險。

%ADI≤100%時，表示慢性風險可以接受，%ADI越小，風險越小；當%ADI＞100%時，表示有不可接受的慢性風險，%ADI越大，風險越大。

短期膳食攝入評估[8]：根據世界衛生組織數據，中國居民茶葉消費的大份餐（LP）每天為 75.88 g。

式中：NESTI—國家估計急性攝入量，單位mg/kg bw/d；LP—大份餐，即某類食品一餐的最大消費量，一般以日消費量的97.5百分位點值為準；單位kg/d；HR—最高殘留量，單位mg/kg；%ARfD — 急性膳食攝入風險；SM—安全界限，單位mg/kg。

%ARf D 越小風險越小，當 % ARf D ≤ 100%時，表示風險在可以接受范圍；反之，% ARf D＞100%時，表示風險不可以接受。

借鑒 VRC 的獸藥殘留風險排序矩陣[9]，并用農藥毒性指標代替獸藥藥性指標，進行農藥殘留風險排序。用公式（6）計算農藥使用頻率：

公式（7）計算各樣品中各農藥殘留的風險得分（S）：

其中：FOD—農藥使用頻率；P—為果實發育日數，單位為d（天）；T—果實發育過程中使用該農藥的次數 ；A—毒性得分；B—毒效得分；C—膳食比例得分；D—農藥使用頻率得分；E—高暴露人群得分；F—殘留水平得分；S—殘留風險得分。

毒性（A）采用急性經口毒性（LD50）；毒效（B）采用ADI值；殘留水平采用殘留檢測值；膳食比例根據中國茶葉產量、出口量及貯藏損耗率推算中國居民茶葉暴露量占總膳食的比例。每種農藥殘留的風險得分以該農藥在所有樣品中殘留風險得分平均值計算，風險得分越大，殘留風險越高。

2 結果與分析

2.1 回收率與精密度

本 實 驗方法 在 GB/T 23204-2008[10]和 GB 23200.13-2016[11]的前處理方法上進行了優化，使前處理更簡單、便捷，一個前處理后能同時進行GC-MS/MS和LC-MS/MS上機檢測。本方法采用乙腈提取，能很好的提取出大部分農藥殘留；與GB/T 23204-2008標準相比，減少了一個濃縮步驟，能盡量減少前處理中的損失；同時采用TPT柱進行凈化，能很好的去除色素和雜質[12]。本方法的大部分農藥在添加量為0.1 mg/kg時，回收率在85%～105%之間，表示該方法滿足檢測要求；部分指標如甲胺磷、乙酰甲胺磷、氧樂果、氟胺氰菊酯和丁醚脲等的回收率為80%～120%，其回收率仍在可行范圍；相對偏差RSD值在1.8%～5.6%之間，RSD＜10%，表示該方法的精密度較好。

2.2 樣品的檢測結果

59份樣品中，共檢出含農藥殘留樣品33份，檢出率55.9%，未檢出農藥殘留樣品26份。按照食品中農藥最大殘留限量GB 2763-2016[13]中規定值，樣品合格率為100%；其中檢出指標17個，檢測項次101次（表1）。

由表1可見，草甘膦、聯苯菊酯、唑蟲酰胺、氯氟氰菊酯、噻嗪酮等5種農殘檢出率較高。其中，檢出率最高的為草甘膦和聯苯菊酯，其次是唑蟲酰胺和氯氟氰菊酯。唑蟲酰胺在GB 2763-2016中沒有規定其最大殘留限量，其檢出范圍在0.0141～0.4402 mg/kg，無法判定殘留情況。此外，檢出率較高、在GB 2763-2016中沒有規定其最大殘留限量的吡唑醚菌酯，其檢出率達到 10.17%，檢出范圍 0.0093～0.0681 mg/kg。另檢出率較高的噻嗪酮，檢出率達到16.95%，但其殘留限量為10 mg/kg，檢出值低于殘留限量標準10倍以上，可視為較安全的。而在GB 2763-2016中雖沒有規定最大殘留限量指標的唑蟲酰胺、吡唑醚菌酯、毒死蜱3種農藥，但仍有一定的使用和檢出，應引起重視。

2.3 樣品風險評估

2.3.1 慢性膳食攝入風險

根據膳食評估公式計算得到表2。從表2可以看出，17個農藥的慢性風險（%ADI）均小于100%，表示慢性風險可以接受。%ADI越小表示慢性風險越小，表2中所有指標的慢性風險均小于1%（0.004%～0.544%），表示雷山茶葉的慢性風險是完全可以接受的，且均很低。其中檢出率最高的草甘膦的慢性風險為0.004%，遠低于1%，風險可以接受，但是除草劑的使用不僅僅影響茶葉的品質，還會破壞環境的生態平衡，仍需慎重使用。檢出農藥中最高的聯苯菊酯的慢性風險值為0.544%，也小于1%。

2.3.2 急性膳食攝入風險

根據世界衛生組織（WHO）數據庫，除草甘膦、噠螨靈和唑蟲酰胺3個指標沒有急性參考劑量（ARfD）外，其余指標的急性參考劑量（ARfD）見表2。急性風險（%ARfD）＜100%時，急性風險可接受。表2可以看出，雷山茶葉14項農藥急性風險（%ARfD）均＜100%，急性風險都可接受，%ARfD范圍在0.007%～42.285%。但是聯苯菊酯的急性風險%ARfD為42.285%，急性風險較高，應引起重視。結果表明，所檢農藥的最高殘留值均低于安全界限（SM），進一步證實了這些農藥的急性膳食風險很低。

表1 茶葉中農藥殘留檢出結果Table 1 Determination result of pesticides residues in tea

表2 農藥殘留慢性風險和急性風險評估Table 2 Chronic and acute risk assessment of pesticide residues in Tea

2.3.3 農藥殘留風險排序

根據中國茶葉產量、出口量及貯藏損耗率推算，中國居民茶葉暴露量占總膳食比例小于2.5%，因此膳食比例得分（C）為0；按照農藥標簽和調研資料顯示農藥每季在茶樹上使用次數最多不超過3次，按最大3次計，每季按90 d計算，則農藥使用頻率評分（D）為1分。由于無確定性資料判定是否存在高暴露人群，因此沒有高暴露人群得分（E）為3分。由表2可見每種農藥的殘留水平，計算得到每種農藥的殘留水平得分。殘留水平中的MRL值以GB 2763-2016中限量值來作為參考值，其中毒死蜱、唑蟲酰胺和吡唑醚菌酯沒有限量要求，則以歐盟標準中茶葉限量要求作為參考。

圖1 茶葉中17種農藥殘留的風險排序（A：高風險；B：中風險；C：低風險）Fig.1 Ranking of residue risk of 17 pesticides in Tea

借鑒 VRC 獸藥殘留風險排序矩陣，根據公式（4）計算各農藥的殘留風險得分，進行茶葉產品中農藥殘留風險排序，結果如圖1所示。根據各農藥的殘留風險得分將風險大小劃分為3類，第1類為高風險農藥，風險得分均≥20，共有3種，分別為毒死蜱、聯苯菊酯和唑蟲酰胺；第2類為中風險農藥，風險得分在15～20之間，共有8種；第3類為低風險農藥，共有6種，風險得分介于10～15之間。17種農藥在低、中和高風險水平的比例分別為35.3%、47.1%和17.6%。由此可見，茶葉中農藥殘留總體上處在中低風險水平，但需重點關注3種高風險水平的農藥。

3 結論與建議

增加檢測指標后，農藥檢出率大幅提高[14]。本次實驗可看出：本次采集的59份樣品，農藥殘留檢出率為55.9%，檢出指標均遠低于GB 2763-2016規定的最大殘留限量，全部合格；其中，有26份未檢出任何農藥殘留，占44.1%。所有樣品均未檢出含有化學污染物蒽醌。所檢出的農藥慢性攝入風險和急性攝入風險均在可接受范圍，且大部分都很低。所檢出農藥中，大部分是中低風險農藥（82.4%），高風險農藥僅為3種（17.6%）。

黔東南州雷山縣地勢較高，茶園位置在海拔900～1400 m之間，且初春氣溫較低，因此，茶樹的病蟲害相對較少。據調查，雷山茶園病蟲害春季均較少，隨氣溫和雨水量的增加，以夏秋季節病蟲害為主。因此，夏秋季節的病蟲害可能會導致農藥的大量使用，從而增大農藥殘留風險。但春茶農藥檢出率較高，所以夏秋季節農藥殘留問題應更加重視。建議首先從源頭抓起，科學合理用藥，注意農藥的安全間隔期。其次，政府相關部門加強農資市場和基地監管，禁止銷售、使用國家禁用農藥。同時，大力推廣物理防治和生物農藥、植物源農藥或者水浸出率低的農藥。

[1]蘭凌.我國綠茶衛生質量的現狀與綠茶質量安全控制[J].信陽農業高等專科學校學報,2006,16(2):81-83.

[2]沈向紅,張晶,管建,等 .浙江省部分食品中農藥殘留水平研究[J].中國衛生檢驗雜志,2007,17(8):1347-1380.

[3]李玲琴.茶葉中農藥殘留動態及降解技術[D].福州：福建農林大學,2007.

[4]何正和,魏斌,魏云計,等 .氣相色譜 -串聯質譜法快速測定茶葉中的蒽醌[J].化學分析計量,2017,26(3):18-21.

[5]喬浩,孫小鳳,韓燕,等 .柴達木地區枸杞農藥殘留風險評估[J].農產品質量與安全,2017(5):38-42.

[6]吳雪原.茶葉中農藥殘留的最大限量及風險評估研究[D].安徽農業大學,2007.

[7]葉孟亮,聶繼云,徐國峰,等 .蘋果中 4 種常用農藥殘留及其膳食評估[J].中國農業科學,2016,49(7):1289-1302.

[8]高仁君,王蔚,陳隆智,等 .JMPR 農藥殘留急性膳食攝入量計算方法[J].中國農學通報.2006,22(4):101-105.

[9]聶繼云,李志霞,劉傳德,等 .蘋果農藥殘留風險評估[J].中國農業科學,2014,47（18）:3655-3667.

[10]中華人民共和國農業部 .GB/T 23204-2008.茶葉中 519 種農藥及相關化學品殘留量的測定 氣相色譜-質譜法[S].北京:中國標準出版社,2008.

[11]中華人民共和國農業部 .GB 23200.13-2016.茶葉中 519 種農藥及相關化學品殘留量的測定 氣相色譜-質譜法[S].北京:中國標準出版社,2016.

[12]顏鴻飛,王美玲,陳紅,等 .固相萃取 -氣相色譜法 -串聯質譜法測定茶葉中9種農藥殘留限量[J].化學分析計量,2016,25(6):62-66.

[13]中華人民共和國農業部 .GB 2763-2016 食品安全國家標準 食品中農藥最大殘留限量[S].北京:中國標準出版社,2016.

[14]任韌,王姝婷,何華麗,等 .杭州地區市售茶葉中擬除蟲菊酯類農藥殘留調查和分析[S].中國衛生檢驗雜志.2016,26(16):1465-1467.