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規模化豬場仔豬腹瀉病原的感染情況分析

2018-01-25 02:41:17
中國畜牧獸醫文摘 2018年5期
關鍵詞:檢測

(如皋市家畜改良站,江蘇如皋 226500)

在規模化豬場的養殖過程當中,仔豬腹瀉是一種常見的疾病和狀況。仔豬腹瀉會帶來嚴重的后果,在很大程度上降低養殖場的經濟效益,并且仔豬腹瀉的病原類型非常多,具有傳染性,所以必須防止疾病的蔓延,從而做出準確的判斷。通過實驗表明,仔豬腹瀉的病原主要分為大腸桿菌、胃腸炎病毒、豬輪狀病毒以及豬流行性腹瀉病毒。這四種不同的病原,分別對仔豬腹瀉產生不同的影響。

1 使用材料以及具體方法

想要確診規?;i場仔豬腹瀉幾種不同病原的具體感染情況,就應該進行一定的實驗。在實驗過程當中,應該選擇合理的材料,并且使用恰當的方法。對于材料的選擇,應該對照大腸桿菌進行選購,并且準備好在實驗過程當中所使用的試劑盒以及相關的工具和材料。

首先,應該對大腸桿菌進行分離純化處理。應該通過具體的調查,明確規?;i場仔豬腹瀉的具體情況,并且選擇典型的豬場進行調查和研究??梢圆捎檬占胸i腹瀉的糞便樣本,對這些樣本進行處理,涂抹于培養基之上。并且保證這些樣本的所處的環境,應該在37℃,進行培養,具體的培養時間是24小時。與此同時,應該選取紅色的典型菌落進行培養,并且使用甘油進行保存。

其次,進行致病性大腸桿菌的鑒定工作。應該準備好反應的模板,將大腸桿菌進行分離處理,并且對照相應的菌種進行接種,平行放置。在37℃的環境之下,培養24個小時,并且使用清水進行洗滌。PCR檢測工作應該針對大腸桿菌進行,并且設計相應的菌毛引物,使用相應的擴增方法進行實驗。其中應該明確反映的具體體積,并且進行模板點樣。反應程序具有一定的預變性,所以必須不斷地變化溫度和時間進行保存。這樣才能夠在具體的瓊脂糖凝膠上進行電泳。另外,PCR檢測仔豬水腫病大腸桿菌也是一項重要的工作內容。這種仔豬的大腸桿菌與兩個毒力因子息息相關。這兩個毒力因子分別為菌毛以及水腫毒素。不斷地進行循環處理,在處理過程當中應該延伸和保存。

最后,上文已經提到規?;i場仔豬腹瀉的幾種病原,其中分別為傳染性胃腸炎病毒、豬輪狀病毒、流行性腹瀉病毒等。對這幾種病毒的感染情況進行調查和分析。就應該做好病料的處理工作。在采集樣本之后,應該使用溶液進行稀釋處理,并且將處理之后的溶液反復的動容,這樣才能夠做好離心處理工作。隨后應該加入清液,再次離心,不斷地收集清液,進行合理的保存。RNA的提取工作應該值得關注,使用相應的試劑盒進行提取,上文提到的樣品應該加入試劑盒之內,在室溫的條件之下,應該放置10min。隨后將這種混合溶液進行轉移,再次放置2min。在2min之后進行離心處理,離心處理的時間為1分鐘。經過一系列的處理之后,應該丟棄流出的溶液,并且將殘留RNA溶液進行收集。從而放入專業的離心管當中,放置2min之后進行反轉錄。

2 實驗結果及分析

2.1 使用PCR鑒定致病性大腸桿菌

根據規?;i場仔豬腹瀉的幾個不同的樣本,進行實驗和分析,并且分離出大腸桿菌,經過PCR的鑒定,擴增之后會形成凝膠電泳。結果顯示,幾個不同的規模化豬場仔豬腹瀉病人感染當中,檢測為陰性,與此同時,檢測到的大腸桿菌以及只豬水腫病大腸桿菌,出現異常狀況。所有的豬場當中,并沒有發現并且明確大腸桿菌的條帶以及水腫毒素條帶。

2.2 使用RT-PCR鑒定豬輪狀病毒

對豬輪狀病毒進行RT-PCR鑒定工作,首先應該進行擴增產物的凝膠電泳處理,結果顯示豬場當中檢測到的特有條帶,所以具有陽性性質。

2.3 使用RT-PCR鑒定傳染性胃腸炎病毒以及流行性病毒

對豬傳染性胃腸炎病毒以及豬流行性腹瀉病毒進行RT—PCR的鑒定工作,結果顯示,某個豬場當中檢測到特有條帶。另外其他的豬場當中經過檢測可以發現有一種特有條帶。這就說明這個豬場同時感染了兩種不同的病原。而其他的豬場當中沒有發現特有條帶,因此具有一定的陽性率。

3 探討

上文在實驗檢測過程當中,充分應用的PCR技術以及IRTPCR技術,這兩種方法受到一定的認可。與傳統的實驗室方法相比較,這兩種方法具有一定的特殊性,反應靈敏迅速,并且能夠直接檢測到相關的樣品。因此在對規?;i場仔豬腹瀉幾種病原感染情況的調查過程當中,必須充分應用這兩種專業檢測技術。規模化豬場仔豬腹瀉是一種常見的疾病,并且在寒冷季節容易發病。這病的原因大多數是病毒的感染。而引起規模化豬場仔豬腹瀉的幾種病原,也根據不同的地區,以及不同的時間存在較大的差異性。隨著現代科學技術的不斷發展,在豬場管理工作進行過程當中,不斷地提高養殖技術,并且改善養殖的環境和條件。因此能夠較好地控制相應的病毒。這種情況之下,病原檢測工作一般不會檢測到陽性。

豬傳染性胃腸炎病毒、豬流行性腹瀉病毒以及豬輪狀病毒是引起規模化豬場仔豬腹瀉的幾種常見的病原,因此必須對這幾種病毒進行深入的研究和分析,這樣才能夠控制病毒的蔓延,有效解決規?;i場仔豬腹瀉問題。這幾種病毒通常呈現出單獨感染或者多重混合感染的狀態。通過對黑龍江某地區規?;i場養豬的樣品進行病原檢測分析,結果顯示,在所選取的樣品當中,有三分之一的樣品存在豬傳染性胃腸炎病毒,另外也有一部分檢測的豬輪狀病毒和胃腸炎病毒呈現出陽性特點。這就說明這個地區規模化豬場養豬存在比較嚴重的仔豬腹瀉問題。必須加強對這些感染病的控制和處理,提高管理力度。在我國很大一部分的范圍之內,這幾種病毒呈現出點狀散發的狀態,因此具有一定的蔓延性,影響的后果也是非常嚴重的。所以必須投入經濟成本以及相應的管理力度,進行疾病的控制工作。

通過實驗檢測我們發現,在南方的一些地區當中,規?;i場仔豬養殖都會出現不同程度的腹瀉問題,并且在檢測病原的過程當中存在多種類型。所以必須做出正確的診斷,找到病原所在,才能對癥下藥。弄清致病因子,保證明確病原感染的種類和類型,有效地降低經濟損失。

4 結語

綜上所述,上文已經對我國一些地區規?;i場仔豬腹瀉的病原感染情況進行了實驗研究和分析,總結出導致規?;i場紫竹腹瀉的幾種不同的病源類型。其中包括致病性大腸桿菌病毒、不輪狀病毒,以及傳染性胃腸炎病毒等。這幾種不同的病原是比較常見的,必須使用專業的技術手段進行鑒定。這樣才能夠保證豬場以及相關養殖業經濟不會受到損失,有效解決病毒問題。

[1]蔡雨函,周遠成,艾能,等.四川規模化豬場腹瀉仔豬病毒性腹瀉病原的分子檢測[J].豬業科學,2016,33(2):76-77.

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