一例豬瘟免疫失敗引起的反思

（新鄉(xiāng)市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，河南新鄉(xiāng) 453003）

豬瘟是一種具有高度傳染性疫病，是威脅養(yǎng)豬業(yè)的主要傳染病之一。其主要特征是急性敗血性變化，實(shí)質(zhì)器官出血、壞死和梗死；慢性則呈纖維素性壞死性腸炎，后期常繼發(fā)副傷寒及巴氏桿菌病，對(duì)養(yǎng)豬業(yè)危害極大。自 2007 年以來(lái)，隨著我國(guó)豬瘟強(qiáng)制免疫的全面鋪開(kāi)，豬瘟在得到了有效控制的同時(shí)，流行形式和發(fā)病特點(diǎn)已發(fā)生了較大變化。目前，豬瘟疫情以點(diǎn)狀散發(fā)為主，典型發(fā)病病例較少，非典型豬瘟病例較多，主要表現(xiàn)是母豬繁殖障礙、持續(xù)感染、隱性感染和免疫耐受，危害更加隱蔽。

另外，豬瘟與豬繁殖與呼吸綜合征、豬圓環(huán)病毒病、豬偽狂犬病、副豬嗜血分枝桿菌病等多種疫病存在混合感染的現(xiàn)象，再加上我國(guó)規(guī)模龐大的散養(yǎng)豬群，進(jìn)一步加大了豬瘟的防治難度。今日，新鄉(xiāng)市就遇到了一起與此相關(guān)的典型疫情。

1 豬場(chǎng)情況及發(fā)病情況

該豬場(chǎng)發(fā)病豬只用普通抗生素治療無(wú)效，在一周內(nèi)已經(jīng)造成數(shù)10頭豬相繼發(fā)病，近10頭豬死亡，損失較大。經(jīng)了解，該養(yǎng)殖戶已有10年養(yǎng)豬歷史，為農(nóng)民自建的養(yǎng)豬圈舍，臨近公路，自繁自養(yǎng)，口蹄疫、豬瘟、藍(lán)耳、偽狂犬疫苗已經(jīng)免疫。患豬呈現(xiàn)體溫上升至40℃左右，食欲減退，有嘔吐、腹瀉現(xiàn)象。該養(yǎng)殖場(chǎng)戶歷史上沒(méi)有該現(xiàn)象發(fā)生，周圍養(yǎng)殖場(chǎng)戶也沒(méi)有該現(xiàn)象發(fā)生。

2 剖檢情況及實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)情況

我們立即挑選剛死亡的豬只進(jìn)行剖檢。發(fā)現(xiàn)患豬脾臟有出血點(diǎn)，邊緣有梗死現(xiàn)象；心臟也有出血點(diǎn)，肺部正常，與豬瘟病毒感染比較相似。于是我們采集了相關(guān)病料送實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)。

2.1 樣品的處理

樣品在冷藏條件下送實(shí)驗(yàn)室，在無(wú)菌條件下分別剪去各個(gè)組織一小塊放置到1.5ml離心管中，加入適量生理鹽水和鋼珠，用組織研磨儀研磨，放入冰箱反復(fù)凍融2次，離心，取200ml上清液備用。

2.2 核酸的提取

應(yīng)用核酸提取儀對(duì)樣品核酸進(jìn)行提取。提取完成后，立即將核酸轉(zhuǎn)移至無(wú)RNA抑制酶的離心管中冷藏備用。

2.3 檢測(cè)

應(yīng)用廣州維伯鑫生物科技有限公司生產(chǎn)的豬瘟熒光PCR試劑盒對(duì)樣品進(jìn)行檢測(cè)。

2.4 程序設(shè)置

熒光通道選擇FAM通道，42℃1個(gè)循環(huán)，20min；95℃1個(gè)循環(huán)，10min；94℃15s，55℃30s搜集熒光信號(hào)。

2.5 質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)

陰性對(duì)照應(yīng)無(wú)明顯擴(kuò)增曲線或無(wú)Ct值，陽(yáng)性對(duì)照Ct值應(yīng)≤32，且有明顯擴(kuò)增曲線，同時(shí)滿足這兩點(diǎn)，實(shí)驗(yàn)成立；否則無(wú)效。

2.6 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

陽(yáng)性樣品Ct值應(yīng)≤35，有明顯指數(shù)增長(zhǎng)曲線；

陰性樣品應(yīng)無(wú)Ct值或者＞37，如在兩者之間且有明顯指數(shù)增長(zhǎng)曲線為陽(yáng)性，否則為陰性。

經(jīng)檢驗(yàn)，6份樣品全部呈現(xiàn)豬瘟陽(yáng)性。

我們將此結(jié)果反饋給養(yǎng)殖場(chǎng)戶后，疫情很快得到了控制。

3 討論

經(jīng)詢問(wèn)得知，該養(yǎng)殖場(chǎng)戶一直按時(shí)、足量的免疫豬瘟疫苗，且該疫苗為國(guó)內(nèi)某知名疫苗生產(chǎn)廠商生產(chǎn)的疫苗，發(fā)病前一個(gè)月剛進(jìn)行免疫。免疫后發(fā)病，即為免疫失敗。為此我們進(jìn)行了原因查找。

中國(guó)近年來(lái)常有免疫失敗的報(bào)道，疫苗免疫效果通常以防止臨床感染為標(biāo)準(zhǔn)，常有部分豬在免疫后，抗體水平不能達(dá)到防止亞臨床感染水平的標(biāo)準(zhǔn)，且這些豬在其存活期終生帶毒、散毒，為CSFV主要儲(chǔ)存宿主，造成了豬瘟在某些地區(qū)的不斷發(fā)。造成豬瘟免疫失敗的因素有很多方面，要想達(dá)到 100%的成功率并非易事。而豬群的持續(xù)感染、疫苗的數(shù)量和質(zhì)量不合格、混亂的免疫程序以及飼養(yǎng)管理不認(rèn)真等均可造成豬瘟的免疫失敗，加上豬瘟病毒的不斷變異和病毒的混合感染，使豬瘟不能被徹底消滅。我們只有把握好豬瘟疫苗的免疫接種每個(gè)細(xì)節(jié)，在生產(chǎn)實(shí)際中兼顧各個(gè)方面，扎實(shí)做好每一步工作，才能使疫苗的免疫接種發(fā)揮最大作用。

通過(guò)查閱資料，并總結(jié)分析可知，豬瘟的預(yù)防的關(guān)鍵在于：A、免疫接種 B、開(kāi)展免疫監(jiān)測(cè) C、及時(shí)淘汰隱性感染帶毒種豬。D、堅(jiān)持自繁自養(yǎng)，全進(jìn)全出的飼養(yǎng)管理制度。E、做好豬場(chǎng)、豬舍的衛(wèi)生工作，減少豬瘟病毒的侵入。而我認(rèn)為當(dāng)務(wù)之急是建立一套完整的豬瘟抗體監(jiān)測(cè)機(jī)制，高度重視免疫監(jiān)測(cè)。只有建立了健全的豬瘟抗體監(jiān)測(cè)機(jī)制，才能及時(shí)掌握豬群的整體免疫狀況，并且制定合理的豬瘟免疫程序，從而達(dá)到對(duì)豬瘟的流行有效的控制的目的，減少不必要的經(jīng)濟(jì)損失，促進(jìn)養(yǎng)豬業(yè)的健康快速發(fā)展。

從對(duì)該場(chǎng)戶采集的病料進(jìn)一步通過(guò)實(shí)驗(yàn)室手段檢測(cè)得到，該養(yǎng)殖場(chǎng)戶還感染了圓環(huán)病毒。圓環(huán)病毒為免疫抑制病毒，可造成動(dòng)物免疫力下降，造成動(dòng)物對(duì)各種病原體易感，該病有臨床癥狀比較多和極易繼發(fā)、并發(fā)感染其他傳染病兩大特點(diǎn)。

豬圓環(huán)病毒在全世界的養(yǎng)豬界都有流行，我國(guó)的豬圓環(huán)病毒病更為嚴(yán)重，在各地的血清學(xué)檢驗(yàn)陽(yáng)性率都超過(guò)了50%。豬對(duì)圓環(huán)病毒比較敏感，所以比較容易感染，沒(méi)有日齡的差別，都可以感染。妊娠的母豬可以通過(guò)胎盤傳染給仔豬。豬舍的環(huán)境情況如：溫度、濕度、通風(fēng)，管理水平，接種情況都影響著豬群對(duì)豬圓環(huán)病毒的敏感情況。該病癥主要是由豬圓環(huán)病毒2型引起的，而且能與藍(lán)耳病、豬瘟等病毒病混合感染，當(dāng)免疫系統(tǒng)受到刺激后，會(huì)使該病的臨床癥狀加重。病豬的精神狀態(tài)不好，沒(méi)有力氣，不好運(yùn)動(dòng)。病豬拉稀，貧血，虛弱消瘦。呼吸吃力且困難，有時(shí)出現(xiàn)咳嗽、氣喘。有時(shí)會(huì)出現(xiàn)黃疸。病豬的采食欲不強(qiáng)導(dǎo)致生長(zhǎng)受阻。外表皮膚常常可以看到整片的濕疹。希望這些現(xiàn)象可以引起其他養(yǎng)殖場(chǎng)戶的重視，出現(xiàn)這些情況可以考慮圓環(huán)病毒和其他動(dòng)物疫病合并感染。

根據(jù)以往的文獻(xiàn)資料，圓環(huán)病毒的感染往往伴隨著其他動(dòng)物疫病的發(fā)生，而廣大養(yǎng)殖場(chǎng)戶尤其是中小養(yǎng)殖場(chǎng)戶卻沒(méi)有引起足夠重視，在進(jìn)行疫病檢測(cè)中，往往只檢測(cè)幾種表面上的重大動(dòng)物疫病而忽視圓環(huán)的危害，往往是治標(biāo)不治本。

近年來(lái)市場(chǎng)上已經(jīng)有多種圓環(huán)病毒疫苗上市，希望大家能夠引起足夠重視，消除動(dòng)物疫病發(fā)生的根源。