結核感染T細胞斑點試驗在結核病診斷中的應用價值

張景艷 榮幸 王守芹

結核病多由結核菌入侵機體多種組織器官引發所致，嚴重影響患者生命健康[1]。據流行病學調查結果顯示，近年來我國因結核病致死的人數已超過13萬人次/年[2]。為了探索更加高效準確的結核病檢測路徑，本文就結核感染T細胞斑點試驗（T-SPOT試驗）在結核病診斷中的應用價值展開了研究，現整理如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2016年11月—2017年11月來我院就診的327例疑似結合病患者作為研究對象，患者男173例，女154例；年齡29～54歲，平均（46.07±3.29）歲。以臨床綜合診斷結果為金標準，A組為TST檢測結果，B組為T-SPOT檢測結果。

1.2 方法

全部患者均行TST和T-SPOT試驗檢測。（1）TST檢測：采用PPD（包含5單位結核菌素）0.1 ml對患者前臂尺側實施皮內檢測試驗，2 d后觀察結果，硬結直徑≥10 mm即為陽性[3]。（2）T-SPOT試驗檢測[2]：首先對患者行外周靜脈血液抽取5 ml作業，分離外周血單個核細胞（PBMC），在含有抗IFN－γ的4個微量板孔中依此加入不同種類的陽性對照物（植物血凝素、A抗原早期分泌性靶抗原6、陰性對照細胞培養液、B抗原濾液培養蛋白10） ，然后分別向各孔中添加濃度2×105的PBMC，置于CO2恒溫培養箱中保存20 h，溫度37℃。最后采用磷酸鹽緩沖溶液 （PBS）對其行洗脫處理，添加堿性磷酸酶標記過的抗干擾素抗體，于室溫條件下行2 h孵育處理，洗脫處理后以PBS溶液終止反應過程，進行斑點計數，測量孔點數＞陰性對照的2倍或是點數與陰性對照相比較＞5個點則為陽性[4]。其中A組僅對TST檢測結果進行分析，B組僅對T-SPOT檢測進行分析。

1.3 觀察指標

（1）以金標準為依據，對A組、B組得出的診斷結果進行分析。（2）比較兩組檢測方法的敏感性、特異性和準確性。

1.4 統計學方法

運用SPSS 20.0軟件處理實驗數據，計數資料用（%、n）表示，以χ2檢驗，P＜0.05代表差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組檢測結果和金標準診斷結果對比

由金標準診斷結果可知，327例疑似結合病患者共包括結核病115例，非結核病212例，以此為參照標準，A、B兩組檢測結果與臨床綜合診斷結果對比如下所示：A組真陽82例，假陰33例，假陽59例，真陰153例；B組真陽98例，假陰17例，假陽24例，真陰188例。

2.2 兩種不同檢測方法的敏感性、特異性和準確性分析

A組檢測方法的敏感性、特異性和準確性依次為71.30%（82/115）、72.17%（153/212） 和 71.87%（235/327）。B組檢測方法的敏感性、特異性和準確性分別為85.22%（98/115）、88.68%（188/212）和87.46%（286/327）。A、B組兩組診斷敏感性（χ2=6.54，P=0.01）、特異性（χ2=18.35，P=0.00）和準確性（χ2=24.55，P=0.00）差異有統計學意義。

3 討論

目前臨床多采用細菌學診斷方法對結核病進行臨床診斷，然而實踐證明此方法具有檢測耗時長、檢測過程相對復雜、早期檢出率較低等缺陷[5]。因此為了做到提早發現、及時治療，臨床醫學領域加大了對結核病檢測方法的研究力度，以便及早發現結核病例，改善預后恢復效果。隨著醫學技術的進步與發展，T-SPOT試驗檢測已成為臨床診斷肺結核的有效方式，并在臨床中得到了逐步應用與推廣。T-SPOT試驗主要通過運用結合分支桿菌抗原對PBMC發揮刺激作用，同時通過IFN－γ釋放的特異性抗原T淋巴細胞的具體反應情況，對患者進行結核感染狀態判斷，較少受到人體免疫狀態的客觀影響，具有較高檢測敏感性和特異性[6]。另有學者研究發現，與常規的TST檢測方法相比較，T-SPOT試驗檢測法在結核病例診斷中具有較高的診斷敏感性和準確性，其診斷準確性可達到90.86%[7]。臨床實踐中為了進一步提高診斷結果的準確性，還需結合影像學檢測、組織病理學、病原學檢查、對抗癆治療反應和臨床癥狀表現等途徑進行結核病例的輔助篩查，減少誤診、漏診情況[8]。本文研究發現，327例疑似結核病患者包括結核病115例，非結核病212例。其中B組檢測方法的診斷敏感性85.22%、特異性88.68%和準確性87.46%，均明顯優于A組的71.30%、72.17%和71.87%，組間數據對比差異具有統計學意義（P＜0.05），說明B組結核病有效檢出率更高，在陽性預測、陰性預測的準確度方面更具優勢。

綜上所述，采用結核感染T細胞斑點試驗檢測法對疑似結核病病例進行結核病檢查具有較高的診斷敏感性、特異性和準確性，能夠有效提高結核病陽性檢出率，改善結核病誤診、漏診情況，幫助醫師及早發現結核病例，促使患者提早就醫治療，有助于改善預后。

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