CD47在胃癌組織中的表達及意義

412000湖南省株洲市中心醫院普外一科

胃癌是最常見的惡性腫瘤之一，約90%胃癌患者就診時已是進展期，根治性手術后5年生存率僅為10%～49%[1]。隨著對腫瘤免疫治療的研究，腫瘤的發生發展與機體的免疫功能密切相關，腫瘤細胞能夠被巨噬細胞吞噬，但在腫瘤免疫中，腫瘤細胞可逃避機體的免疫監視，得以發生發展[2]。CD47是一種廣泛表達于細胞膜表面的蛋白質，使腫瘤細胞表達“別吃我”信號逃避免疫監視。本研究檢測CD47在胃癌中的表達及與臨床參數關系，以探討其在胃癌發生發展的中的意義。

資料與方法

2013年6月-2015年5月選擇因胃癌行胃癌根治術后的病理標本50例，同時選取癌旁正常組織(安全界外1 cm)病理標本作為對照。其中男28例，女22例；年齡45～81歲，平均(60.5±14.2)歲；其中胃竇癌36例，胃體癌14例，均為胃腺癌；其中高分化14例，中分化16例，低分化20例。根據美國癌癥聯合委員會公布的胃癌TNM分期，T1期3例，T2期12例，T3期19例，T4期16例。

檢測方法：在胃癌組織及癌旁組織石蠟標本上取材、切片，免疫組化法檢測切片中CD47蛋白的表達水平。CD47單克隆抗體是美國Abcam公司產品，配置CD47抗體濃度1∶300。按實驗說明操作，切片脫蠟至水，浸于0.01 mol/L枸櫞酸緩沖液中加熱煮沸修復，冷卻，滴入內源性過氧化物酶阻斷劑，水洗，置入磷酸鹽緩沖液浸泡，分別滴入CD47抗體，低溫下過夜，再滴酶標羊抗鼠/兔IgG聯合物，37℃溫箱中孵育，經顯色、復染、脫水、透明處理，封片、鏡檢。

判斷標準：由兩位高年資病理科醫師雙盲評分，在每張切片上隨機選取10個(×400)視野范圍下計數，據陽性細胞數、染色強度區分陽性等級。①陽性細胞數＞51%為3分，11%～50%為2分，1%～10%為1分，＜1%為0分；②染色強度：強陽性3分，中等陽性2分，弱陽性1分，陰性為0分。得分為①+②。3～6分為陽性，＜3分為陰性。

統計學方法：采用SPSS 17.0分析數據，計量資料采用(±s)表示，采用t檢驗；計數資料采用%表示，采用χ2檢驗。P＜0.05差異有統計學意義。

結 果

CD47在胃癌組織中陽性表達率達56.0%，癌旁組織中陽性表達率為28.0%，兩者差異有統計學意義(P＜0.01)。研究分析CD47與患者年齡、性別、腫瘤大小、淋巴結轉移、腫瘤分化程度、腫瘤浸潤深度(T分期)的關系，結果顯示CD47陽性表達與胃癌分化程度、淋巴結轉移、腫瘤浸潤深度相關。

討 論

免疫系統通過識別并清除腫瘤細胞，對抑制腫瘤的發生發展有重要作用。巨噬細胞能維持細胞穩態、防御病原體及參與免疫應答等[3]，其直接殺傷腫瘤細胞，或通過呈遞腫瘤相關抗原誘導機體免疫應答清除腫瘤細胞，在腫瘤免疫中發揮重要作用。隨著腫瘤免疫治療研究迅速進展，有望從根本上治愈腫瘤，胃癌的免疫治療是一個治療的熱點。CD47在胃癌細胞的凋亡和免疫逃逸中扮演重要角色，本研究通過探索CD47在胃癌組織表達情況，探討其與胃癌發生發展的關系。

CD47又稱整合素相關蛋白[4]，廣泛表達于細胞膜表面，是免疫球蛋白超家族的一員。CD47的配體為信號調節蛋白α鏈(SIRPα)，是一種跨膜蛋白，CD47與SIRPα的結合產生抑制抗性信號，下調巨噬細胞的吞噬作用，對免疫系統產生抑制作用，使腫瘤細胞逃避巨噬細胞的吞噬，表達“別吃我”信號。本研究檢測CD47顯示，胃癌組織中CD47表達明顯高于癌旁組織，說明胃癌細胞較胃正常細胞高表達CD47，通過下調巨噬細胞對胃癌細胞吞噬，產生免疫逃逸。CD47表達與胃癌組織分化程度、浸潤深度及淋巴結轉移相關，研究發現CD47表達陽性，胃癌組織分化程度低、浸潤程度深、淋巴結有轉移，病期晚，預后差，說明CD47陽性表達與胃癌惡性程度呈正相關[5]，促進了胃癌的發生和發展。

CD47在胃癌組織中高表達，促使胃癌細胞免疫逃避，導致腫瘤浸潤深、淋巴轉移等不良預后。CD47成為胃癌潛在治療靶點來消除胃癌細胞[6]，采用抗體或拮抗劑阻斷CD47-SIRPα信號通路，恢復免疫細胞功能，清除腫瘤，成為胃癌免疫治療的新策略。

綜上所述，CD47在胃癌組織中的表達與胃癌發生、生長相關，是有潛在價值的腫瘤相關標志物，可能為胃癌治療中使用針對性的免疫抑制劑提供潛在靶點。