靈芝多糖生物活性研究進展

才曉玲 何 偉 楊國琴

（1滇西科技師范學院，云南臨滄677000；2云南臨滄市民族中學，云南臨滄677000）

靈芝（Ganoderma lucidum）又稱靈芝草、神芝、芝草、仙草、瑞草，是多孔菌科植物赤芝或紫芝的干燥子實體。據本草綱目記載“靈芝性平，味苦，無毒，主胸中結，益心氣，補中，增智慧，不忘，久服輕身不老，延年神仙”。靈芝中含有多種活性物質，具有抗腫瘤、調節免疫力、抗氧化、降血脂和降血糖等多種藥理作用[1-2]。目前，關于靈芝的研究多集中在人工栽培、液體深層發酵液及有效成分提取等方面，對于靈芝生物活性的研究也逐漸深入。筆者對靈芝生物活性方面的研究進展進行總結，以期為進一步開發利用這一珍貴資源提供依據。

1 靈芝多糖生物活性

1.1 抗氧化

國內外一些研究表明靈芝具有抗氧化活性，其活性成分為靈芝多糖（GLP），能夠顯著抑制高糖誘導的腎小球系膜細胞增殖，對羥自由基具有明顯的清除作用，且能減少自由基對細胞器的損傷，抑制不同氧化劑激發的脂質過氧化作用，從而抑制細胞凋亡過程，延緩機體衰老［3-5］。張志軍等［6］報道靈芝多糖質量濃度為2.5 mg∕mL時對 DPPH（1，1-二苯基-2-三硝基苯肼）自由基的清除率達到57.6%，其清除能力與多糖的濃度存在一定的正相關；李響等[7]研究表明靈芝多糖能顯著增加表皮和真皮厚度，改善皮膚組織結構，并提高皮膚組織超氧化物歧化酶水平，證實了靈芝多糖具有較好的抗氧化能力與延緩皮膚衰老作用；XU J等[8]研究還發現羧甲基化的靈芝多糖有更高的抗氧化活性，這將為食品和藥品中抗氧化劑的研發指明了新的方向。MDA（丙二醛）是自由基引起的脂質過氧化的主要產物之一，經常被用作機體組織中氧化損傷標志物[9]。宿彥峰[10]研究表明，灌胃中、高劑量的GLP能顯著提高力竭運動后小鼠肝、肌肉中SOD（超氧化物歧化酶）、CAT（過氧化氫酶）、GSH-Px（谷胱甘肽過氧化物酶）活性，降低MDA活性，這表明GLP能上調機體組織抗氧化酶活性，清除過量自由基，降低脂質過氧化反應，對力竭運動誘導的氧化應激及氧化損傷具有保護作用。這一結果與JIA J等[11]報道靈芝多糖具有顯著提高的小鼠SOD、CAT、GSH-Px等抗氧化酶活性；王君巧等[12]報道結果相一致，即灌服黑靈芝多糖可使脾臟組織中的SOD、CAT、T-AOC（總抗氧化能力）的含量較模型對照組顯著提高，而MDA含量較模型對照組顯著下降，進一步證實了靈芝多糖具有抗氧化活性這一結論。有關靈芝多糖抗氧化作用機理，研究人員認為靈芝多糖發揮抗氧化作用有一套完整的抗氧化防御機制，包括對機體SOD、T-AOC、CAT等一系列抗氧化酶活性的影響，從而使機體的自由基保持著動態平衡[12-13]。

1.2 抗腫瘤

許多研究[14-17]表明靈芝多糖中β-D葡聚糖具有一定的抗腫瘤功效，其抗腫瘤機理可能是靠宿主的免疫介導發揮作用，通過激活并促進免疫細胞（淋巴細胞、巨噬細胞、單核細胞、樹突狀細胞、中性粒細胞）的增殖與分化、增加效應免疫細胞的數量、抑制或殺傷腫瘤細胞而發揮抗腫瘤作用。郭焱等[18]應用流式細胞術檢測中藥靈芝多糖對S180荷瘤小鼠T細胞亞群變化的影響，結果表明靈芝多糖使荷瘤小鼠的CD8+T淋巴細胞數量明顯提高，從而增強荷瘤小鼠T細胞免疫活性。也有研究人員認為靈芝多糖可能是通過抑制腫瘤細胞的活動、黏附作用及遷移反應、減緩腫瘤細胞的生長速度而發揮抗腫瘤作用［19-22］；有研究表明靈芝多糖可抑制荷瘤小鼠S-180腫瘤的生長，并增加荷瘤小鼠血液中白細胞和淋巴細胞的數量[17]；崔永偉[23]報道當靈芝多糖劑量為250 mg∕kg時，對喂食S180小鼠肉瘤細胞的抑瘤率為43.44%；NONAK Y等[24]給接種乳腺內瘤及S-180的小鼠飼喂含2.5%鹿角靈芝粉（AF）的飼料，發現服用后可顯著抑制腫瘤生長，且延長了存活期；李廣遠等[25]應用MTF比色法檢測靈芝多糖對人類白血病細胞株NB4細胞增長的抑制作用，結果表明靈芝多糖在體外對NB4細胞增殖具有抑制作用并可加速其凋亡，抑制率最高分別為33.5%及18.77%；李楊［26］研究了靈芝硒多糖SeGLP-2B-1誘導乳腺癌細胞MCF-7凋亡的機制，結果表明，SeGLP-2B-1作用MCF-7細胞24 h后即開始出現早期的凋亡，72 h后抑制作用達到三個時間點的峰值，抑制率高達80.53%，IC50僅為0.158。綜上所述，靈芝的抗腫瘤機制是一個復雜的過程，并不是單一成分引起的單一的簡單反應，而是一個由多種靈芝成分引起的綜合系統反應。一方面通過提高抑制腫瘤的細胞因子的合成和分泌發揮抗腫瘤作用；另一方面也通過減少抑制性細胞因子的水平而發揮抗腫瘤作用，但其具體的反應機制還有待深入研究。

1.3 免疫調節

現代藥理研究表明，靈芝中的多糖具有免疫調節作用，可通過提高巨噬細胞、樹突細胞和自然殺傷細胞的細胞活性來調節機體免疫功能，增強抗感染能力；研究人員[27]通過小鼠靈芝多糖灌胃，腹腔注射雞紅細胞懸液后，觀察得到巨噬細胞能顯著提高對雞紅細胞的吞噬率及吞噬指數；靈芝多糖還能刺激細胞因子（IL-1、IL-2、IL-3、IL-6）、TNF-α（腫瘤壞死因子）、IFN-γ（干擾素）等細胞因子的分泌，調節免疫細胞的功能[37]。YU Q等[28-29]研究發現黑靈芝多糖可以明顯提高免疫抑制小鼠體內TNF-α含量；耿衛樸等［30］發現靈芝多糖能下調Caspase-3蛋白表達并抑制T淋巴細胞凋亡，具有確切地促進人外周血T細胞免疫的作用；靈芝多糖還具有提高B16F10細胞激活淋巴細胞的活性能力［31］；MA C等[32]研究證實了靈芝孢子的多糖提取物能刺激脾單核細胞的增殖和細胞因子的分泌，實現調節免疫細胞活性。上述研究結果證實赤靈芝多糖可以通過誘導細胞因子的含量來調節小鼠的免疫功能。

胸腺和脾臟是動物機體的兩個最主要的免疫器官，是機體發揮防御功能的重要器官，而胸腺指數和脾臟指數能直觀反映動物機體的免疫功能[33]。有研究結果表明靈芝多糖可促進免疫抑制小鼠胸腺及脾臟等的組織分化及細胞增生，能夠促進免疫器官的發育，增加免疫器官的質量，進而提高免疫功能，這與WANG J等[34]研究發現靈芝多糖經硫酸化和羧甲基化后對小鼠的脾臟和胸腺指數均有提高作用，HUANG S Q等[35]研究發現經超聲微波協同萃取的靈芝多糖可以提高免疫抑制小鼠的脾臟和胸腺指數，ZHANG S等[36]研究發現黑靈芝多糖對CT26（小鼠結腸癌細胞）型腫瘤細胞小鼠的脾臟和胸腺指數均有提高得出的結果一致。

1.4 降血糖、降血脂

靈芝多糖有明顯的降血糖和降血脂作用。有研究[37-38]表明，在鏈脲佐菌素（STZ）誘導的糖尿病大鼠模型中，靈芝多糖能顯著降低STZ誘導的糖尿病鼠的空腹血糖、總膽固醇和甘油三酯，降低血清中的葡萄糖水平，并顯著提高大鼠血漿胰島素水平。黃智旋等［39］研究發現靈芝多糖對四氧嘧啶、去甲腎上腺素所致的高血糖有降血糖作用。XIAO C等［40］研究表明靈芝多糖能顯著降低Ⅱ型糖尿病模型小鼠空腹血糖水平，且呈劑量依賴性。王艷梅［41］研究表明靈芝多糖是以劑量性依賴的方式抑制高糖環境下腎小球系膜細胞的轉化生長因子（TGF-β1）、Col-IV（IV型膠原）過度表達而發揮降糖作用。研究還發現靈芝多糖和二甲雙胍聯合應用在改善Ⅱ型糖尿病大鼠模型心肌重構方面作用明顯優于單用，這可能與調節心肌膠原容積分數，改善心肌血流動力學及下調心肌MMP-2的表達有關[42]。有研究表明［43］糖尿病患者在用靈芝多糖治療3個療程后，血糖降低27.18%。

靈芝多糖還具有一定的降血脂作用，孫可[44]用靈芝多糖對高脂血癥大、小鼠模型進行干預，結果發現靈芝多糖可明顯降低大、小鼠模型TC（總膽固醇）、TG（甘油三酯）與LDL-C（低密度脂蛋白膽固醇）含量，升高HDL-C（高密度脂蛋白膽固醇）水平，與模型組比較差異顯著，說明靈芝多糖具有較好的降血脂作用。

上述研究均從一定量效關系說明靈芝多糖具有降血糖和降血脂的作用，但其具體的作用機制還有待于進一步研究。

1.5 保肝護肝

靈芝已經被廣泛應用于慢性肝病的輔助治療。血清ALT（谷丙轉氨酶）和AST（谷草轉氨酶）活力被認為是反映肝損傷程度的敏感指標[45]。周婕等[46]研究發現100 mg∕kg、200 mg∕kg靈芝多糖能顯著降低GaIN所致急性肝損傷小鼠血清ALT活性、AST活性及TBIL（總膽紅素）水平，提高血清ALB（血清白蛋白）含量，說明靈芝多糖可減輕GaIN所致小鼠急性肝損傷程度；在BCG誘導的小鼠肝炎模型中，靈芝多糖能抑制ALT和NO的生成，減少中央靜脈周圍肝小葉出血和組織壞死，減輕淋巴細胞的炎癥浸潤，能夠緩解小鼠肝臟傷。賈亞敏等[47]研究發現富硒靈芝多糖可顯著減少肝臟組織中的脂肪顆粒，并降低血清中AST、AIJT（丙氨酸轉氨酶）和TG含量，可緩解高脂飲食誘導的非酒精性脂肪肝大鼠癥狀。

綜上所述，靈芝多糖具有護肝活性，但其具體作用機制還有待于進一步研究。

1.6 其他活性

靈芝多糖除具有抗氧化、抗腫瘤、調節免疫、降血糖及降血脂等活性外，還具有抗輻射等功效。PILLAI T G等[48]通過小鼠的生存率、網狀細胞內微核的誘導、質粒pBR322 DNA的絲條斷裂和制止過氧化作用抑制等試驗證實靈芝多糖在體內外具有一定的防輻射作用；靈芝多糖還具有一定的抗疲勞作用，它可改善機體的能量代謝，提高能量利用率，減少機體的疲勞感［49］。此外，有研究表明[50]靈芝多糖還可使心肌缺血大鼠心肌梗死面積明顯縮小，降低血清CK（肌酸激酶）、Troponin（肌鈣蛋白）含量；靈芝多糖還具有一定的抗凝血和抗栓作用，可抑制血小板聚集和減弱部分凝血酶活性，是作用溫和的抗血小板聚集劑[51]，這也為抗血栓藥物的研發提供新的方向；靈芝多糖還可能通過升高GLAST（谷氨酸∕天門冬氨酸轉運體）、GLT1（谷氨酸轉運體）、EAAC1（氨基酸遞質轉運體）的表達來降低神經元興奮性，減輕或抑制癲癇發作[52]。

2 存在問題及展望

靈芝作為我國珍稀食藥用菌，已引起了世界各國的廣泛注意和高度重視。近年來，針對靈芝的研究主要集中于靈芝子實體、液體發酵菌絲中靈芝多糖成分提取，但靈芝中還有其他化學成分如三萜、多肽、氨基酸、生物堿及核苷類化合物等成分[53]，而這些成分是否也具有一定的生物活性，目前研究的較少，因此靈芝中其他活性成分的研究可能是今后研究的新方向。