黃尾鲴染色體核型分析

章海鑫 徐先棟 張燕萍 王生

(江西省水產科學研究所，江西南昌 330039)

黃尾鲴(XenocyprisdavidiBleeker)具有易捕撈、肉厚質實、味道鮮美和營養價值高等特點,是湖泊、池塘及水庫增養殖的理想魚類。目前，黃尾鲴的生物學特征[1-3]、食性[4]以及繁養殖技術[5-8]等均有大量的研究；完整的基礎研究和技術研究促使黃尾鲴養殖成為當前水產養殖品種結構調整中首選的優良品種之一[3]，但目前針對這一優良的養殖品種尚沒有統一的種質標準。

核型(karyotype) 是指生物染色體的數目、大小和形態特征的總和,是細胞遺傳學的研究基礎,對魚類核型進行研究，有助于了解生物染色體組的組成、鑒定近緣物種及構建物種間的系統進化關系[9]。因此,選擇對黃尾鲴進行核型研究,有助于補充黃尾鲴細胞遺傳學數據資料，制定種質標準，同時也為今后黃尾鲴的人工繁育和遺傳育種等工作提供參考資料。

1 材料與方法

1.1 實驗材料

實驗魚由萍鄉市水產科學研究所黃尾鲴良種場提供，單尾體質量在300～600 g。暫養于江西省水產科學研究所循環水養殖系統中，暫養一周后開始試驗。

1.2 實驗方法

1.2.1 染色體標本制備

參照王德祥和丁少雄[10，11]的方法改進染色體標本制備步驟：①選取3尾體格健壯、活力好的個體，按魚體重100g/mL抽取尾靜脈血后按魚體重100g/mg從胸鰭基部注射PHA后暫養；②暫養8～10h后，按魚體重100g/mg注射秋水仙素；③注射后15min 剪鰓放血,取頭腎置于生理鹽水中進行組織破碎,制得細胞懸液后靜置10min； ④ 500r/min 離心5min后收集細胞,加入 0.075 mol/L KCl溶液后37℃水浴低滲 30 min，500r/min 離心5min后加入新配制的卡諾氏固定液室溫固定 20 min,之后重復固定 2 次；⑤再次離心后取沉淀,加入適量新配制的卡諾氏固定液重懸細胞,用吸管吸取細胞懸液滴在預冷玻片上,過酒精燈火焰 3 次,自然晾干備用。

1.2.2 核型分析

用滴管吸取10%的 Giemsa 染色液平鋪在玻片上染色20min，然后使用蒸餾水緩慢沖洗干凈,自然干燥,室溫保存。選取來自不同個體的100個分散良好的中期分裂相計數,計數結果用于確定染色體總數。并對分散良好、著絲粒清晰、長度適中的染色體中期分裂相拍照,依據照片進行測量和統計。 按照相對大小編號,根據 Levan[12]的標準將染色體分成4 組,即①中部著絲粒染色體(metacentrics，M)；②亞中部著絲粒染色體(submetacentrics，SM);③亞端部著絲粒染色(subtelocentrics，ST);④端部著絲粒染色體(telocentrics，T) 。

2 結果

在顯微鏡下選取了100個黃尾鲴中期分裂相較好的視野進行觀察和計數，結果如表1所示，可見黃尾鲴中期分裂相染色體總數為 48條的有81個,占分裂相總數的81%,所以判斷黃尾鲴的二倍體染色體總數為 48。從良好中期分裂相中所得的各染色體的相對長度和臂比如表2所示。黃尾鲴細胞染色體很小,最長染色體相對長度為 4.16,最短者為1.3,長度比為3.2。按Levan[12]命名法可分成3組：M型(中部著絲粒染色體)9對；SM型(亞中部著絲粒染色體)13對；T型(端部著絲粒染色體)2對。核型公式為2n=48=18M+26SM+4T，NF=92，未發現有異形性染色體。黃尾鲴染色體的中期分裂相和核型圖譜如圖1和圖2所示。

表1 黃尾鲴染色體數目統計

表2 黃尾鲴染色體相對長度與臂比

圖1 黃尾鲴中期分裂相染色體

圖2 黃尾鲴染色體核型

3 討論

試驗中得到黃尾鲴染色體數2n=48,這與前人[13]所得結果一致。黃尾鲴屬于鯉科鲴亞科，從染色體數目看其與其他鲴亞科魚類染色體數目一致，均為2n=48。這表明其與其他許多鯉科魚一樣，染色體數目在進化上是保守的[13，14]。余先覺等[15]認為某一分類群大多數或絕大多數種類所具有的染色體二倍數，可作為該分類群最基本的核型特征。黃尾鲴與已知鲴亞科魚類如銀鲴(2n=48)、細鱗斜頜鲴(2n=48)、逆魚(2n=48)等的二倍體數一致。除染色體外，黃尾鲴的核型與其他鲴亞科魚類的核型也一致。細鱗斜頜鲴和逆魚的核型均為18M+26SM+4T，NF=92，而銀鲴核型為20M+26SM+2T，NF=94[16-19]。根據現代魚類演化的理論，染色體結構的重排可以引起 NF值的變化，在 2n值相同的分類群之間,臂數的變化是從進化上低位類群到高位類群的表現為逐漸升高的趨勢，即具有較多端部著絲粒染色體的類型是比較原始的,而出現較多中部和近中部著絲粒染色體的類型是比較進化的[15]。因而，從核型上看黃尾鲴與細鱗斜頜鲴和逆魚處于同一進化順序，銀鲴則進化程度更高。上述核型多態性也可能是由于魚類的不同地理種群，不同研究者所使用的方法不同,測量染色體的時相不一致以及測量和配組誤差所造成的。