戴文華,劉軍,張明輝,張曉峰,吳日峰
(山西省大同市動物衛生監督所,大同 037004)
瘦肉精屬β-激動劑類藥物。人食用含瘦肉精的豬肉后會出現頭暈、惡心、手腳顫抖、心跳加速甚至心臟驟停致昏迷死亡的現象,特別對心律失常、高血壓、青光眼、糖尿病和甲狀腺機能亢進等患者有極大的危害。“瘦肉精快速檢測卡”因其使用方便、檢測時間短、靈敏度高、不需要特殊儀器設備和結果判斷直觀等優點,被基層動物衛生監督隊伍和屠宰企業大量用于現場檢測,在瘦肉精專項整治中發揮了重要的作用。
1.1.1 種類繁雜
由于快速檢測卡被廣泛應用于基層隊伍衛生監管工作和屠宰企業的自檢當中,市場上不同生產廠家和不同品牌的檢測卡眾多,可謂魚目混珠。實際工作中常用的瘦肉精檢測卡主要為鹽酸克倫特羅、萊克多巴胺和沙丁胺醇三種。生產上監測卡有單卡和三聯卡,因此,在監測卡的選擇上,易造成很多困惑。
1.1.2 監測卡的評判標準不一
從目前市場出售的監測卡來看,有農業部備案的,有的廠家有1種或2種產品備案;也有沒有備案的。有農業部測試推薦,經農業部組織測試產品的準確率、假陽性率和檢測限值等指標。有的既未通過農業部備案,也未經農業部測試,評判標準不一。
1.1.3 檢測卡標示的靈敏度、有效期不一
如鹽酸克倫特羅檢測卡,標識檢測限值有1 ppb和3 ppb的;檢測卡的有效期有12個月和24個月,差異較大。沙丁胺醇檢測卡有5 ppb和3 ppb的。靈敏度、有效期標示不一,不同靈敏度不同有效期的檢測卡市場上均有銷售。
1.2.1 同一檢測卡對不同畜種存在差異
瘦肉精檢測卡主要針對生豬開發,一般應用于牛、羊的監測,往往出現跑帶慢、結果不準等問題。
1.2.2 受外界環境溫度影響大
瘦肉精快速監測一般在現場進行,在冬季溫度較低的環境下,反應速度慢、判定結果難度大[1]。
監測人員未認真閱讀檢測卡說明書,監測卡放置不平,一面高一面低,加樣后液體不能自由擴散,使反應結果不準。
加樣過多或過少,滴加樣品溶液時速度過快,溶液量過多,一般超過了5滴,使溶液從觀察窗的膜表面慢涌著流過,反應失敗;樣品中鹽離子濃度偏高或PH值偏酸偏堿,導致膠體金抗體受影響,不能順利反應。使用檢測卡對加樣量有著精確的要求,應嚴格按照說明書操作,樣本量太多或太少對結果有著重要的影響,樣本太多會增大沖擊力,導致樣本直接流到NC膜上或從檢測卡內部滲漏而出現假陽性。樣本量太少不足以完成整個檢測,導致膠體金滯留也會出現假陽性結果[2]。
樣品采集的尿樣混入雜物,未采取離心或澄清措施,雜物影響樣本的擴散,導致反應結果不準。宜靜置或離心后取上清液,再進行監測。
最好在10~30 ℃的室溫下操作,如受條件限制,應采取適當的保溫措施。待檢樣本在滴加到樣本孔中時的溫度應控制在4~30 ℃之內,對于冷凍的樣本應充分溶解混勻恢復至檢測溫度范圍,而剛從豬體內取出的尿樣,一般溫度高于35 ℃,應稍放置冷卻后再檢測。環境溫度主要是注意不能低于0 ℃,檢測卡的操作和保存均不能低于0 ℃,否則水份形成的冰晶會損壞抗體的活性,造成金標抗體失效而出現假陽性結果[3]。
測試卡保存不當,在高濕度情況下或保存在0 ℃以下,特別是在高寒地區,冬季將檢測卡放置于室外的車內,使試紙條上的抗體失效,無法進行免疫反應。
檢測卡中試紙條的各組份對干燥程度要求很高,尤其是NC膜,他們的干燥程度直接影響著試紙條整體的吸水性能,而吸水性能是影響結果的重要標志之一,如果檢測卡受潮,試紙條整體吸水性能下降,膠體金的涌動受到影響易停滯在NC膜上,從而造成假陽性率大大升高。所以在使用檢測卡時,打開包裝后應立即使用,防止受潮。
出現陽性反應時,應考慮飼喂的飼料、用藥等因素進行綜合分析。應采集同場仔畜或種畜常規、不加其它物質的畜尿進行對照,進行綜合判定。不能用自來水作對照。因為檢測卡抗原、抗體反應必須在電解質環境下進行,水中電解質濃度不夠或很少的情況下,抗原抗體反應不能進行。
出現沖板,T、S線均不出現反應的應判為試驗失敗,重新監測。對判為陽性樣品應采集尿液采取氣相液相色譜分析復檢,以氣相或液相分析結果為準[4]。
影響瘦肉精快速監測結果的因素一般有檢測卡的選擇、監測人員能力和環境影響等。
選擇檢測卡時,應考慮監測藥物類型是否經濟、快速及是否便于現場操作,能否滿足監督篩查的要求;同時還要考慮檢測卡的監測限值即靈敏度、生產廠家的品牌和實際使用效果等因素。切忌只考慮價格便宜,從而導致監測結果不準或無效。
監測人員能力是影響監測結果的主要因素之一,監測的準確性、規范性也影響監測結果,如操作的熟練程度,采樣、加樣、結果的判定等。應加強對監測人員的培訓,提高監測操作技能。
樣品采集對監測結果影響很大。在養殖環節進行監測時,特別是規模養殖場,一般由飼養人員進行采樣,采樣對象應為育肥畜,最好為育肥后期畜。如果采集仔畜或種畜尿液不能反映出欄動物的瘦肉精含量真實水平,監測人員應告知畜主,最好對采樣過程通過監控設備全程監督[5]。
第一,盡快出臺瘦肉精監測卡生產的國家標準和操作規范,統一監測卡的靈敏度標準和有效期。
第二,統一檢測卡的判定標準。如農業部備案工作已經數年未開展。
第三,加強瘦肉精檢測卡生產和銷售的監督管理,進一步規范檢測卡市場,杜絕魚目混珠的現象發生。