蔬果中有機磷農藥殘留快速測定法的意義和方法

鄧麗花

（甘肅省武山縣農產品質量安全監督檢測站，甘肅 武山 741300）

1 蔬果中有機磷農藥殘留快速測定的意義

農藥在我國蔬菜生產中發揮著極其重要的作用，而這些物質的不合理使用又會導致蔬菜及其制品中農藥殘留量超標，進而影響消費者食用安全和進出口貿易。有機磷農藥作為一類高效、廣譜的殺蟲劑正被廣泛地用于農業防害以及家庭、倉儲等的殺蟲，但大量使用后產生的環境危害也日益嚴重。農藥的急性中毒，特別是果蔬食品污染后引發的群體中毒事件屢有發生。對蔬菜中農藥的殘留量進行及時而準確的分析、檢測是控制蔬菜中農藥殘留量的關鍵環節之一。因此建立果蔬有機磷殘留檢測技術是很有必要的。因此，要規范各大蔬菜基地、農貿市場、超市蔬菜農殘檢測方法，統一了檢測標準，而且推進了農產品質量安全監管體系建設，確保了食用農產品的第一道安全屏障，防止了農殘超標蔬菜的生產和銷售，控制了殘留農藥通過食物鏈的傳遞和濃縮，減少了對人體的危害和急性中毒事件的發生。食用蔬菜的污染因子主要是使用了有機磷類和氨基甲酸酯類農藥，目前農藥殘留速測的方法主要有生物測定法、酶學法和化學法，而其中酶學法和化學法都具有快速、簡便、靈敏和成本低等特點。

2 蔬果中有機磷農藥殘留快速測定技術方法

2.1 酶試劑法的原理

在一定條件下，有機磷類農藥對膽堿酯酶正常功能有抑制作用，它會抑制人體中樞和周圍神經系統中乙酰膽堿酯酶的活性，造成神經傳導介質乙酰膽堿的積累，影響其正常傳導，使人致死。其抑制率與農藥的濃度呈正相關。正常情況下，酶催化神經傳導代謝產物（乙酰膽堿）水解，其水解產物與顯色劑反應，產生黃色物質，用分光光度計在412nm處測定吸光度隨時間的變化值，計算出抑制率，通過抑制率可以判斷出樣品中是否有高劑量有機磷類農藥的存在。

2.2 試劑的配制

一是提取液的配制。將一袋提取液粉劑倒入500ml的玻璃瓶內加入510ml蒸餾水搖勻溶解后備用。可在常溫下保存。二是顯色劑的配制。在小瓶內加入32ml提取液，搖勻后即可使用，避光冷藏保存。三是底物的配制。每瓶底物粉劑中加入3.1ml蒸餾水，搖勻后即可使用，配好的底物溶液需在0～4℃保存備用，可使用7天。四是乙酰膽堿酯酶的制備。每瓶酶液中加入3.1mL提取液，搖勻后即可使用。配好的酶液需在0～4℃保存備用，可使用7天。（乙酰膽堿酯酶、底物粉劑未配制時，必須放置在冰箱0℃以下冷凍室保存，有效期為一年。）

2.3 儀器使用

儀器為浙江托普云農科技有限公司生產的NY-16DY型農藥殘留速測儀。開機后點擊登錄進入檢測界面，點儀器預熱3min，再點空白對照后做對照測試，它有16個通道室，第一孔只能做對照測試，對照吸光度必須大于0.3。顯色時間19min，數據傳輸到“打印機”，自檢則檢測各通道的光能量。進行對照測試時，試樣室第1通道放置對照試樣，第2-16通道可放置樣品試樣，試樣放入試樣室后，合上試樣室蓋，勾選對應通道選框，儀器進行測試。

2.4 果蔬中農藥殘留的測試

2.4.1 對照液配制。用移液管提取2.5ml提取液至干凈試管中，用微量移液器提取0.1ml酶液和0.1ml顯色劑到試管內。混勻后放置15min（若室溫達不到25℃以上，建議放在37℃恒溫水中15min）時間到達時，馬上加入0.1ml底物混勻，立即倒入比色皿中放入儀器的比色池內，蓋好蓋板，執行對照制作程序。對照值在30以上為有效值。

2.4.2 樣品檢液提取和配置。取表面干凈的蔬菜或瓜果，用天平準確稱取2g，葉菜取葉片部分，瓜果取皮帶肉。蔥、蒜、蘿卜和一些葉綠素含量較高的蔬菜中，含有的植物次生物質對酶的活性產生影響，容易產生假陽性。必須進行處理，對于蔥，先去掉須根，再把其根部剪掉，用天平稱取重量，放入三角瓶中，吸取緩沖液的毫升數是其重量數的5倍，振蕩后過濾即為待測樣，蒜、蘿卜、葉綠素含量高的蔬菜，稱取整株的重量。其他樣品將葉片、瓜肉等剪成1cm見方大小置于小燒杯內，用移液器提取10ml提取液浸泡，在常溫下放置10分鐘，每3分鐘晃動一下燒杯，使蔬菜中的農藥能充分溶入液體內。若用振蕩器，震蕩2分鐘。

將燒杯中的提取液倒入試管內，略沉淀后用移液管或移液槍吸取2.5ml移入另一試管內，即為檢液。

在檢液管內加0.1ml酶液和0.1ml顯色劑混勻后放置15min（若室溫達不到25℃以上，建議放在37℃恒溫水浴中15min），當15min后馬上加入0.1ml底物混勻，馬上倒入比色皿中放入比色池，蓋好蓋板，執行樣品檢測程序。

2.5 測試結果的判斷

若被測樣品的酶抑制率超過50%，則表明被測蔬菜中含有高劑量的有機磷農藥，樣品為陽性結果。陽性結果的樣品需要重復檢驗2次以上。