聯合檢測血清胱抑素C及尿N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶在狼瘡性腎炎診斷中的應用

楊雪君

(南京大學醫(yī)學院附屬南京鼓樓醫(yī)院 醫(yī)學檢驗科，江蘇 南京210008)

系統性紅斑狼瘡(systemic lupus erythematosus,SLE)是尤以免疫性炎癥為突出表現的一種彌漫性結締組織病。是一種自身免疫性疾病。而狼瘡腎炎(lupus nephritis，LN)又是其最常見且最嚴重的臨床表現之一。臨床上50%-70 %的SLE患者在其病程發(fā)展中會出現腎臟受到損害，腎活檢顯示幾乎所有SLE均有腎臟的病理學改變。LN對SLE預后影響很大，腎功能衰竭是SLE的主要死亡原因之因之一[1]。然而，傳統腎實驗指標如尿素氮(BUN)和肌酐(CREA)只有在GFR功能減退至50%甚至更低時才會有明顯的上升。因此，LN的早期診斷將會對SLE的預后及治療有著極其重要的臨床意義。本文旨在分析血清胱抑素C(CysC)及尿NAG聯合檢測在狼瘡腎炎診斷中的意義。

1 資料與方法

1.1一般資料

選取2015年8月-2016年8月經我院收治住院的123例SLE患者作為實驗組，其中男性23例，女性100例。年齡18-68歲，平均48.6歲。入選對象均符合美國風濕學會(ACREA)2009年修訂的SLE分類診斷標準。均排除糖尿病、高血壓病、泌尿系統的感染、腎移植等其他原發(fā)性腎臟疾病。對照組選取本院體檢中心健康體檢者50例，其中男性23例，女性27例，年齡13-55歲，平均32.5歲。

1.2標本采集與處理

實驗組與對照組均于清晨空腹8 h后肘部靜脈采血3 ml置于普通生化促凝管內；同時收集晨尿10 ml,均以4 000 r/min離心5 min，取分離血清分別檢測胱抑素C、尿素氮以及肌酐的值，取尿液的上清測定尿NAG的含量，囑患者留取清晨第二次尿用于測定尿微量白蛋白，根據尿微量白蛋白的結果將實驗組分為尿微量白蛋白<20 mg/L的單純性SLE組、尿微量白蛋白為20-200 mg/L的早期LN組以及尿微量白蛋白>200 mg/L的LN組，所有項目均在2 h內完成檢測。

1.3器材與方法

實驗儀器均采用貝克曼庫爾特AU5400全自動生化分析儀,CysC采用的檢測方法為增強免疫比濁法，BUN采用的測定方法為酶活力分析法，CREA采用的測定方法為酶偶聯速率法，尿NAG采用的檢測方法為對硝基苯酚比色法，尿微量白蛋白為免疫比濁法。

1.4統計學方法

2 結果

表1 各組患者的的Cys-C、尿NAG、BUN和CREA的結果

注：*為與對照組比較，差異有統計學意義(P<0.05)；#為與單純SLE組比較，差異有統計學意義(P<0.05)，△為與早期LN比較，差異有統計學意義(P<0.05)。

2.2Cys-C和NAG對于早期LN和單純SLE的鑒別價值分析由上文分析可知Cys-C和NAG在早期LN與單純SLE間的差異有統計學意義，遂分析Cys-C和NAG對于鑒別早期LN與單純SLE的意義，以是否為早期LN為目標變量，對Cys-C和NAG進行ROC曲線分析，ROC曲線如圖1所示。對于Cys-C，曲線下面積(AUC)為0.836，95%CI為0.734-0.938，P<0.001，表示Cys-C可用于鑒別早期LN和單純SLE，有統計學意義。當Cys-C為1.325時，此時的約登指數最大，為0.555，此時Cys-C對于鑒別早期LN的靈敏度為68.57%，特異度為86.96%。對于NAG，曲線下面積(AUC)為0.866，95%CI為0.769-0.964，P<0.001，表示NAG可用于鑒別早期LN和單純SLE，有統計學意義。當NAG為17.650時，此時的約登指數最大，為0.612，此時NAG對于鑒別早期LN的靈敏度為74.29%，特異度為86.96%。不同指標的診斷結果匯總如表2所示。

表2 不同指標對鑒別早期LN和單純SLE的診斷結果匯總

圖1 不同指標對鑒別早期LN和單純SLE的ROC曲線

2.3Cys-C和NAG聯合診斷對于早期LN和單純SLE的鑒別情況根據Cys-C和NAG單指標對早期LN和單純SLE的鑒別情況，對Cys-C和NAG兩個指標的聯合診斷效果進行評價，分別從并聯和串聯兩種角度進行評價，并聯即Cys-C≥1.325和NAG≥17.650滿足任何一個就判定為早期LN，否則即為單純SLE；串聯即Cys-C≥1.325和NAG≥17.650同時滿足兩個判定為早期LN，否則即為單純SLE。整理并聯和串聯的結果如表3所示，結果顯示并聯診斷時，35名早期LN患者中有33名診斷正確，23名單純SLE患者中17名診斷正確，此時并聯診斷對早期LN診斷的靈敏度為94.29%，特異度為73.91%，約登指數為0.682；串聯診斷時，35名早期LN患者中有17名診斷正確，23名單純SLE患者中全部診斷正確，此時串聯診斷對早期LN診斷的靈敏度為48.57%，特異度為100.00%，約登指數為0.486。由結果可見并聯診斷提高了診斷的靈敏度，而特異度下降；串聯診斷提高的特異度，而靈敏度下降；結合Cys-C和NAG單指標的診斷情況，Cys-C和NAG并聯診斷時的約登指數最高，診斷效果最好。Cys-C和NAG聯合診斷對于早期LN和單純SLE的鑒別情況如表3所示。

表3 Cys-C和NAG聯合診斷對于早期LN和單純SLE的鑒別情況

3 討論

狼瘡性腎炎(lupus nephritis,LN)是系統性紅斑狼瘡(systemic lupuserythematosus,SLE)累及腎臟的常見且嚴重的并發(fā)癥之一[2],是SLE患者死亡的重要原因之一，因此,早期發(fā)現、早期診斷早期治療LN具有極其重要的臨床意義。腎組織病理檢查是診斷腎臟疾病的“金標準”。但由于需要進行腎穿刺，具有創(chuàng)傷性[3]，增加患者的精神痛苦、經濟負擔及治療風險，不易被患者接受。因此，采用無創(chuàng)性、簡單高效的方法來對LN進行診斷具有重要的臨床意義。

胱抑素C屬于半胱氨酸蛋白酶抑制劑超家族的一員，編碼胱抑素C的基因屬管家基因，CysC能自由通過腎小球濾過膜并在近曲小管幾乎完全被重吸收和降解，同時，腎小管也不分泌CysC，所以其在血漿或血清中的濃度就由腎小球濾過率決定，因此CysC自然也就成為反映腎小球濾過率的良好的內源性指標[4]。更有國內外的研究稱[5-7]，CysC反映GFR降低早于SCr，能更加及時、有效地反映腎功能的受損情況。而對輕度的腎功能損傷缺乏足夠的靈敏度是SCr的主要缺點[8]。隨著對狼瘡腎炎早期腎損傷研究的深入，宋志偉等[9]的研究也指出在LN早期微小腎損傷時CysC的水平已明顯升高。本研究也指出LN組及早期LN組患者血CysC水平與對照組比較差異有統計學意義(P<0.05)，且早期LN患者血CysC的水平與單純性SLE相比差異也具有統計學意義(P<0.05)。因此，若能聯合其他腎功能受損的標志對早期狼瘡腎炎進行診斷具有重要臨床意義。可彌補血清CysC單項檢測的不足。

N-乙酰-β-D氨基葡萄糖苷酶(NAG)是一種人體內廣泛存在的一種溶酶體水解酶，尤在腎組織中含量豐富，分子量約130000-140000道爾頓，正常情況下由于其分子量大而不能經腎小球濾過，故尿中的該酶主要來源于腎近曲小營上皮細胞。是故當上皮細胞發(fā)生變形、腫脹、壞死時，即可使尿液中的NAG含量升高，尿NAG是反映腎小管損害的敏感的指標[10]。這與本研究的結果一致。

SLE導致的狼瘡性腎炎不僅有腎小球的損傷也還會有腎小管的損傷，所以作為腎小球損害的靈敏指標血CysC和腎小管損害的靈敏指標尿NAG，在本研究測定中，單獨檢測這兩種指標時，結果在SLE導致的腎臟損害時均有明顯升高，且升高程度要早于且高于傳統指標尿素氮和肌酐。聯合檢測這兩項指標，要優(yōu)于血CysC和尿NAG的單獨檢測，且可以得到最優(yōu)的靈敏度(94.29%)和特異度(73.91%)。綜上所述，血清CysC、尿NAG的水平可作為狼瘡腎炎早期診斷的可靠指標，聯合檢測能大大提高檢測的靈敏度及特異度。

[1]王 驍,樓丹飛,姚重華,等.益氣利水破血解毒小復方對NZB/WF1狼瘡鼠腎臟水通道蛋白干預作用的研究[J].四川中醫(yī),2013(6):53.

[2]婁美玉,陳文莉.狼瘡性腎炎治療的研究進展[J].臨床腎臟病雜志,2016,16(3):132.

[3]李海英,左 燦,王艷蘭,等.血清胱抑素C及同型半胱氨酸和視黃醇結合蛋白聯合檢測在狼瘡性腎炎診斷中的意義[J].廣東醫(yī)學,2014(6):864.

[4]程創(chuàng)業(yè),張道友.胱抑素C的臨床應用研究進展[J].國際檢驗醫(yī)學雜志,2015(5):677.

[5]Zhang Z,Lu B,Sheng X,et al.Cystatin C in Prediction of Acute Kidney Injury:A Systemic Review and Meta-analysis[J].American Journal of Kidney Diseases the Official Journal of the National Kidney Foundation,2011,58(3):356.

[6]姜冬強.血清胱抑素C檢測用于診斷糖尿病早期腎損害的臨床意義分析[J].中國實用醫(yī)藥,2015(33):37.

[7]Silva M V,Moscoso S G,Nishida S K,et al.Are serum cystatin C levels influenced by steroid doses in lupus nephritis patients?[J].Jornal brasileiro de nefrologia:orgao oficial de Sociedades Brasileira e Latino-Americana de Nefrologia,2011,33(3):306.

[8]龍 聰,熊 軍,郭 輝,等.血清胱抑素C對系統性紅斑狼瘡患者早期腎損傷的評估作用[J].實用醫(yī)學雜志,2011,27(21):3966.

[9]宋志偉,王 丹,袁景芳,等.胱抑素C檢測在狼瘡性腎炎微小腎損傷早期診斷中的價值[J].國際檢驗醫(yī)學雜志,2013,34(15):1939.

[10]夏美榮.尿mAlb、尿α1-MG和尿NAG對系統性紅斑狼瘡患者腎損害診斷意義[J].中國民康醫(yī)學,2016,28(3):73.