急性期帶狀皰疹患者血S100β蛋白、NSE及病毒載量水平變化與病情嚴重程度的相關性研究

鄭曙光,梁愛芳,張艷麗,楊小靜,宋飛娟

(濮陽市人民醫院 皮膚科,河南 濮陽457000)

水痘-帶狀皰疹病毒(varicella zoster virus)初次感染人體引起水痘,再次感染后將體內的病毒再次激活引起帶狀皰疹(HZ),臨床主要表現為皮膚的皰疹病變,同時伴有明顯的神經痛。目前對帶狀病毒的治療主要采取足量、足療程的抗病毒及營養神經藥物,但部分患者即使皮損消退也會遺留不同程度的神經痛(PHN),影響患者的生活質量。目前,臨床研究認為帶狀皰疹神經痛主要是由于病毒侵犯神經引起,導致中樞和周圍神經系統發生一系列生理病理改變所致[1-3]。S100β蛋白主要分布在神經系統的雪旺氏細胞、星形膠質細胞中,在神經受損時可出現血中S100β蛋白升高[4-7]。神經元特異性烯醇化酶(NSE)是細胞內蛋白質,在神經內分泌細胞和神經元細胞內均有存在,在神經元細胞發生損傷時細胞質內NSE被釋放入腦脊液中可通過血腦屏障進入血液循環,引起血中NSE升高[8-10]。臨床研究顯示：帶狀病毒患者的唾液和血液中可檢測到帶狀病毒[11,12],但是病毒載量與病情嚴重程度是否存在相關性的臨床研究較少。本研究主要對急性期帶狀皰疹患者血S100β蛋白、NSE、病毒載量水平變化與病情嚴重程度的相關性進行研究,現報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2015年6月-2016年12月期間在我院診治的急性期帶狀皰疹患者80例為帶狀皰疹組,其中男38例,女42例,年齡21-73歲,平均(46.93±11.20)歲；病變部位：頭頸部者32例,其他部分者48例。納入標準：(1)符合帶狀皰疹診斷標準；(2)病程≤3 d；(3)在納入研究前未服用過抗病毒及糖皮質激素藥物。排除標準：(1)合并有非帶狀皰疹所致神經損傷性疾??；(2)合并其他器官嚴重功能障礙性疾病、惡性腫瘤和免疫系統疾?。?3)有精神疾病史；(4)長期服用糖皮質激素、免疫抑制劑、免疫增強劑等藥物者；(5)妊娠期及哺乳期婦女。選取同期門診體檢正常者80例為對照組,其中男35例,女45例,年齡27-65歲,平均(48.11±10.74)歲。兩組對象性別、年齡等方面比較差異無統計學意義(P>0.05)。本研究經醫院倫理委員會審核通過,研究對象知情同意。

1.2 方法

1.2.1血S100β蛋白及NSE、帶狀皰疹病毒DNA檢測方法 患者在治療前和治療2周后、對照組在體檢時采集外周靜脈血8 ml,將血液標本分為2份分別置于含有EDTA的無菌試管內(A管和B管),以3 000 r/min轉速離心處理5 min,分離血清及血漿。A管采用酶聯免疫吸附法檢測血S100β蛋白和NSE濃度。將實驗用人類外周血淋巴細胞分離液加入無菌試管內,在B管內加入PBS溶液,以1∶1比例進行稀釋,將稀釋液加入有淋巴細胞分離液的試管內,以2 000 r/min轉速離心20 min,吸取白膜層(外周血單個核細胞)置于另一個試管內,加PBS液,以1 200 r/min轉速離心10 min,重復2次后保留沉淀物。采用熒光定量PCR法檢測血淋巴細胞中帶狀皰疹病毒DNA載量。試劑盒購自北京誠林生物科技有限公司,帶狀病毒檢測試劑盒購自上海之江生物科技有限公司,人外周血淋巴細胞分離液購自天津市灝洋生物制品科技公司,PBS液購自上?？婆d商貿有限公司。

1.2.2病情嚴重程度的評估方法 在治療前和治療2周后,根據水皰數目、水皰簇數、水皰變化、紅斑面積、瘙癢疼痛及燒灼感等癥狀和體征進行病情嚴重程度評分[13，14],評分分為0-4分5個級別,總分<6分為輕度,6-12分為中度,>12分為重度。

1.3 統計學方法

采用SPSS 19.0軟件進行統計分析,計量資料比較采用t檢驗和秩和檢驗,相關性采用Pearson相關分析,P<0.05表示差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組血S100β蛋白、NSE水平、病毒DNA載量和病情嚴重程度評分比較

帶狀皰疹組患者治療前、治療2周后血S100β蛋白、NSE水平均明顯高于對照組(治療前t=37.74、51.05,治療后t=14.22、7.28,P<0.05),治療前血S100β蛋白、NSE水平、病毒DNA載量和病情嚴重程度評分均高于治療2周后(t=14.23、41.13,t=46.56、9.89,P<0.05),見表1。

表1 兩組血S100β蛋白、NSE水平、病毒DNA載量、病情嚴重程度評分比較

注：*與對照組比較,P<0.05；△表示與治療后比較,P<0.05。

2.2 不同病情嚴重程度評分帶狀皰疹患者血S100β蛋白、NSE水平、病毒DNA載量比較

治療前,病情嚴重程度評分分級輕度20例,中度36例,重度24例；治療2周后,輕度46例,中度22例,重度12例。治療前、治療2周后不同病情嚴重程度評分患者血S100β蛋白、NSE水平、病毒DNA載量比較差異有統計學意義(治療前Z=11.72、22.73、738.62,治療后Z=6.54、8.09、34.76,P<0.05),見表2和表3。

表2 治療前不同病情嚴重程度評分患者血S100β蛋白、NSE水平、病毒DNA載量比較

表3 治療后不同病情嚴重程度評分患者血S100β蛋白、NSE水平、病毒DNA載量比較

2.3 帶狀皰疹患者血S100β蛋白、NSE、病毒載量水平變化與病情嚴重程度的相關性分析

相關性分析結果顯示：帶狀皰疹患者血S100β蛋白、NSE、病毒載量水平變化與病情嚴重程度評分之間均呈正相關性(P<0.05),見表4。

表4帶狀皰疹患者血S100β蛋白、NSE、病毒載量水平變化與病情嚴重程度的相關性(r值表)

指標S100β蛋白NSE病毒DNA載量病情嚴重程度評分S100β蛋白-0.860.920.78NSE--0.630.59病毒DNA載量---0.70

3 討論

帶狀皰疹是潛伏在三叉神經、脊神經后根等位置的水痘-帶狀皰疹病毒被再次激活后引起的感染性皮膚病,免疫抑制劑、化療、激素等藥物的應用是引起該病的誘發因素,由于病毒可侵犯到神經,病毒有噬神經性,導致神經系統微環境發生炎癥浸潤等變化,因此,患者常常出現不同程度的神經損傷,而且神經損傷貫穿于疾病發展和康復的全過程,并可延續到后遺癥期,患者表現為皮損消退后(大約4周)神經痛可持續存在,引起患者的生活質量下降。目前,對神經損傷的檢查主要依靠臨床癥狀、肌電圖、腦電圖、神經活檢等[15,16],但各有優缺點,而且對神經損傷程度缺乏客觀的量化指標,目前臨床對神經損傷的評估更多的是采用S100β蛋白和NSE[16]。S100β蛋白是一種酸性鈣結合蛋白,屬于神經蛋白中的一種,在神經細胞中分布廣泛,神經受損后神經細胞內的S100β蛋白會被釋放出細胞外,刺激局部產生大量的炎癥因子而引起神經毒性反應。有報道顯示,血S100β蛋白水平越高往往提示患者神經損傷越嚴重[17],患者預后越差。NSE為細胞內蛋白質,可參與糖酵解過程,在神經細胞內特異性存在,在神經元細胞出現破壞時細胞質內的NSE會被釋放出細胞外,在腦脊液中NSE含量會升高,通過血腦屏障血中NSE也可出現相應的升高。有報道顯示,帶狀皰疹患者血中S100β蛋白和NSE表現為升高[18,19]。本研究中,帶狀皰疹患者治療前和治療2周時血S100β蛋白和NSE也表現為升高,而且治療前較治療后明顯升高,進一步證實了急性期帶狀皰疹患者存在不同程度的神經損傷,而且這種損傷在治療過程中恢復較緩慢。

水痘-帶狀皰疹病毒屬于人皰疹病毒3型,人類是水痘-帶狀皰疹病毒的唯一宿主,帶狀皰疹患者的皰疹液中含有大量的水痘-帶狀皰疹病毒,找到水痘-帶狀皰疹病毒是找到帶狀皰疹的金標準。采用傳統病毒分離方法在血液中較難找到水痘-帶狀皰疹病毒,實時熒光PCR技術對病毒感染檢測陽性率高,是目前臨床常用的血中病毒檢測方法,可同時進行定性和定量檢測。

本研究對帶狀皰疹患者血中病毒DNA載量進行檢測,以分析治療前后病毒載量的變化,結果顯示,病毒DNA載量在治療前明顯高于治療后,隨著治療后病情好轉病毒載量明顯下降,而且有研究顯示病毒DNA載量較高的患者后期發生神經后遺癥的幾率也明顯較高[20],提示病毒DNA載量較高的情況下可能對患者神經損傷更嚴重,因此,患者在急性期和后遺癥期均存在明顯的神經痛癥狀。目前對帶狀皰疹的臨床病情嚴重程度評估缺乏統一的方法,主要依據臨床癥狀、視覺模擬評分法等對疼痛程度進行評估,但是僅可反映神經疼痛程度,無法對患者的整體病情進行系統評估。有文獻采用病情嚴重程度評分對帶狀皰疹患者病情進行評分[20],該評分方法將水皰數目、水皰簇數、水皰變化、紅斑面積、瘙癢疼痛及燒灼感等癥狀和體征進行量化評分,以評估患者病情的嚴重程度,評分越高提示病情越嚴重。本研究中,帶狀皰疹患者治療前評分明顯高于治療后,而且治療前主要為中重度患者,治療后則表現為輕中度,可以看出病情明顯恢復。

帶狀皰疹患者雖然證實存在神經損傷,表現為血S100β蛋白升高,而且病毒DNA載量也有明顯升高,但是以上指標是否與病情嚴重程度相關,臨床尚缺乏相關的研究證據。本研究對以上指標間的相關性進行研究,從研究結果可以看出,患者無論治療前還是治療后均表現為病情嚴重程度與血S100β蛋白、NSE、病毒載量水平變化的一致性,病情較輕的患者血S100β蛋白、NSE、病毒載量水平相對較低,病情較重的患者血S100β蛋白、NSE、病毒載量水平也相應較高,而且相關性研究也顯示以上指標間呈正相關性,說明以上指標之間關系密切,可綜合應用于帶狀皰疹患者的病情評估,而且對于預測治療效果也有一定的價值。

[1]楊 梅,章紹清,吳艷霞,等.帶狀皰疹后遺神經痛發病相關因素及干預方法分析[J].現代預防醫學,2013,40(1):153.

[2]于生元,萬 有,萬 琪,等.帶狀皰疹后神經痛診療中國專家共識[J].中國疼痛醫學雜志,2016,22(3):161.

[3]李 娟,索羅丹,趙 丹,等.帶狀皰疹的流行病學研究進展[J].現代預防醫學,2014,41(5):781.

[4]Papa L,Silvestri S,Brophy G M,et al.GFAP out-performs S100β in detecting traumatic intracranial lesions on computed tomography in trauma patients with mild traumatic brain injury and those with extracranial lesions[J].Journal of neurotrauma,2014,31(22):1815.

[5]Ryb G E,Dischinger P C,Auman K M,et al.S-100 β does not predict outcome after mild traumatic brain injury[J].Brain injury,2014,28(11):1430.

[6]Gomez-Tourino I,Simon-Vazquez R,Alonso-Lorenzo J,et al.Characterization of the autoimmune response against the nerve tissue S100β in patients with type 1 diabetes[J].Clinical & Experimental Immunology,2015,180(2):207.

[7]Qin B,Panickar K S,Anderson R A.Cinnamon polyphenols regulate S100β,sirtuins,and neuroactive proteins in rat C6 gliomacells[J].Nutrition,2014,30(2):210.

[8]Rodríguez-Rodríguez A,Egea-Guerrero J J,Vilches-Arenas A,et al.Effect of freezing-thawing process on neuron specific enolase concentration in severe traumatic brain injury sera samples[J].Clinical chemistry and laboratory medicine,2014,52(4):e65.

[9]van Adrichem R C S,Kamp K,Vandamme T,et al.Serum neuron-specific enolase level is an independent predictor of overall survival in patients with gastroenteropancreatic neuroendocrine tumors[J].Annals of Oncology,2016,27(4):746.

[10]Wolf H,Frantal S,Pajenda G S,et al.Predictive value of neuromarkers supported by a set of clinical criteria in patients with mild traumatic brain injury:S100B protein and neuron-specific enolase on trial:clinical article[J].Journal of neurosurgery,2013,118(6):1298.

[11]李 艷,楊慧蘭.STAT3和Ⅰ型干擾素在水痘-帶狀皰疹病毒復制過程中作用機制的研究[J].臨床皮膚科雜志,2015,44(7):420.

[12]師 偉,劉建紅,梁紅萍.2013 年太原市迎澤區水痘-帶狀皰疹病毒基因型分析[J].實用醫技雜志,2015,22(4):352.

[13]張馨月,余 琎,廖勇梅,等.帶狀皰疹患者病情評分與血漿 S100β和 NSE 水平的相關性分析[J].中國皮膚性病學雜志,2016,30(12):1238.

[14]熊 燚,王 健,魏 笛,等.血清 S100β水平和小兒危重病例量表評分預測手足口病并發腦炎患兒預后的價值研究[J].中國全科醫學,2016,19(23):2780.

[15]杜玉敏,任玉娥,叢海靜,等.疼痛管理對帶狀皰疹后神經痛患者治療效果的影響[J].河北醫科大學學報,2016,37(3):293.

[16]杜玉敏.帶狀皰疹后神經痛的治療與護理進展[J].河北醫科大學學報,2016,37(4):493.

[17]李 穎.皮膚神經活檢——評估周圍神經損傷的新技術[J].中國實用內科雜志,2017,37(1):69.

[18]Grahn A,Hagberg L,Nilsson S,et al.Cerebrospinal fluid biomarkers in patients with varicella-zoster virus CNS infections[J].Journal of neurology,2013,260(7):1813.

[19]郭新生,易士華.納洛酮與阿昔洛韋聯合治療帶狀皰疹病毒性腦炎的療效觀察[J].中國醫院用藥評價與分析,2016,16(12):1646.

[20]叢 艷,李金萱,秦曉鳳．糖尿病周圍神經病變與血清MBP 及S100β相關性分析[J]．現代中西醫結合雜志,2013,22(17):1847.