慢性蕁麻疹患者血清IL-17 IL-23 TGF-β水平檢測分析*

何沅莉，單 葵，曹雨微，陳 偉（重慶醫科大學附屬第一醫院皮膚科，重慶400016）

慢性蕁麻疹（CU）是皮膚科常見的變態反應性疾病，因反復發作伴劇烈瘙癢，常嚴重影響患者正常工作和生活。其發病機制至今尚未完全闡明，可能與免疫功能異常相關。有研究表明，輔助性T細胞（Th17）與部分自身免疫疾病有關[1]。本研究擬通過檢測與Th17細胞相關的細胞因子[白細胞介素-17（IL-17）、IL-23、轉化生長因子 β（TGF-β）]水平，探討 Th17細胞在 CU 中的診斷作用，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 資料

1.1.1 一般資料 選取2015年7月至2016年11月重慶醫科大學附屬第一醫院皮膚科收治的72例CU患者作為觀察組，其中男35例，女37例；年齡19～57歲，平均（39.16±10.27）歲。另選取健康體檢者20例作為對照組，其中男 10例，女 10例；年齡 25～53歲，平均（38.43±9.87）歲。兩組研究對象性別、年齡等一般資料比較，差異均無統計學意義（P＞0.05），具有可比性。納入標準：（1）風團反復發作6周以上，且每周至少2次或2 d癥狀發作。（2）排除其他物理性蕁麻疹。（3）無嚴重系統性疾病，并在4周內未使用過糖皮質激素及其他免疫抑制劑，7 d內未使用過抗組胺藥物治療。

1.1.2 試劑與儀器 IL-17酶聯免疫吸附試驗（ELISA）試劑盒、IL-23 ELISA試劑盒、TGF-β ELISA試劑盒均選購自依科賽生物科技（大倉）有限公司，采用Spectra-Max plus384酶標檢測。

1.2 方法 采集研究對象肘靜脈約5 mL置于肝素鈉抗凝管中，留取標本30 min內分離血漿，1 500 r/min離心8 min，用移液槍將血清移至EP管中，將EP管編號，置于-20℃冰箱保存備用，按照試劑盒說明書，采用雙抗體夾心ELISA測定血清中IL-17、IL-23、TGF-β水平，嚴格按照試劑盒的操作標準進行。

1.3 統計學處理 應用SPSS20.0統計軟件進行數據分析，計量資料以表示，采用t檢驗；計數資料以構成比表示，采用χ2檢驗。相關分析變量滿足正態分布時采用Pearson直線相關分析。P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 兩組血清樣本中 IL-17、IL-23、TGF-β水平比較 觀察組患者血清 IL-17、IL-23、TGF-β水平均明顯高于對照組，差異均有統計學意義（P＜0.01）。見表1。

表1 兩組血清樣本中 IL-17、IL-23、TGF-β 水平比較（±s）

表1 兩組血清樣本中 IL-17、IL-23、TGF-β 水平比較（±s）

注：-表示無此項

組別 IL-17（pg/mL）觀察組對照組IL-23（pg/mL）23.85±19.76 9.66±2.49 5.605 0.000 n 72 20 tP--3.32±1.27 1.89±0.74 6.232 0.000 TGF-β（ng/mL）39.95±17.90 25.55±12.77 3.362 0.001

2.2 觀察組患者IL-17、IL-23、TGF-β三者間相關性分析 觀察組患者IL-17、IL-23、TGF-β三者間無明顯相關性（P＞0.05）。見表 2。

表2 觀察組患者IL-17、IL-23、TGF-β三者間相關性分析

3 討 論

CU主要表現為反復發作的風團和（或）血管性水腫，常伴明顯瘙癢，病程超過6周。CU可見于任何年齡，多發于20～40歲青年人，超過1/2的CU患者伴中度以上瘙癢，1/5患者可伴血管性水腫，嚴重影響患者的生活質量[2]。CU病因復雜，可能病因為急性與慢性感染，食物、藥物過敏及自身免疫異常等。有研究發現，CU患者血清中不僅存在甲狀腺自身抗體，同時存在抗高親和力血清免疫球蛋白E（IgE）受體自身抗體和功能性IgE抗體[3-4]，越來越多學者認為，CU為自身免疫性疾病。而KRYCZEK等[5]發現，Th1和Th17細胞可協同作用于人類自身免疫性疾病。本研究擬通過檢測與Th17細胞密切相關的IL-17、IL-23、TGF-β水平，探討Th17細胞在CU的診斷作用。

TGF-β是單核-巨噬細胞分泌的具有多種生物活動的多肽調節因子，在機體免疫防御中有重要作用。初始CD4+T細胞接受抗原刺激后，在血清中TGF-β單獨存在的條件下被誘導分化為Treg細胞，在TGF-β和IL-6共同存在的條件下被誘導分化為Th17細胞[6]。目前，國內外對TGF-β與CU的關系鮮有報道。TAVAKOL等[7]觀察到TGF-β基因的遺傳變異與CU的發病有關，而CU患者基因型傾向于高產TGF-β。本研究發現，CU患者血清中TGF-β水平明顯高于對照組，從側面證實了的 TAVAKOL 等[7]的研究結果。ALASANDAGUTTI等[8]、KASPERSKA-ZAJAC等[9]觀察到CU患者血清中IL-6及IL-6受體水平明顯升高。可推測TGF-β通過誘導初始CD4+T細胞分化為Th17細胞參與了CU的發生。

IL-23是巨噬細胞及樹突狀細胞分泌的細胞因子，是Th17細胞產生過程中的關鍵性細胞因子，對其存活及功能維持起至關重要作用，而對Treg細胞則具有抑制作用[10-12]。有研究顯示，一些自身免疫性疾病的發病與IL-23的升高有關，如銀屑病、皮肌炎、炎癥性腸病等[13-15]。IL-23主要通過維持Th17細胞功能及誘導IL-17的產生，從而促進炎性反應的發生[16-17]。IL-17由Th17細胞分泌，可以通過NF-кB通路刺激上皮細胞、內皮細胞等產生前列腺素E2、IL-6、IL-8等細胞因子和趨化因子，直接或間接引起變態反應。同時，IL-17可以與腫瘤壞死因子α、干擾素γ等產生協同作用以放大炎性反應，誘導自身免疫性疾病和慢性過敏性疾病的發生[18]。在健康人的血清中可以檢測到低水平的IL-17、IL-23，而在一些變態反應性疾病中卻顯著增加，如變應性鼻炎[19]、特應性皮炎[20]等，其外周血中Th17細胞IL-17水平均高于健康對照組，且與疾病的嚴重程度存在相關性。而ATWA等[21]也發現，CU患者血清中IL-17、IL-23水平高于對照組，且與疾病嚴重程度成正比，與本研究結果相符。

綜上所述，Th17 細胞通過 IL-17、IL-23、TGF-β 3 種細胞因子參與了CU的發病過程，動態監測CU患者用藥前后3種因子及Th17細胞的變化，也許將來可以此作為靶點為CU的治療提供新的方向或將其用作判斷CU的預后。本研究也存在一些缺陷，如未對觀察組進行病情程度分級并分析其是否與3種因子存在相關性，兩組人數差距大，大多數患者既往用藥不詳，不能徹底排除藥物對IL-17、IL-23、TGF-β的影響等，有待今后擴大樣本進一步深入研究。

[1]丁潔，游晶，劉懷鄂，等.IL-17、Foxp3+Treg和 IL-17+Foxp3+T細胞在自身免疫性疾病中的作用[J].現代免疫學，2016，36（6）：496-499.

[2]羅婕，宋志強，鐘華，等.535例慢性蕁麻疹臨床流行病學特征分析[J].第三軍醫大學學報，2011，33（22）：2421-2424.

[3]GREAVES MW.Chronic idiopathic urticariab[J].Curr Opin Allergy Clin Immunol，2003，3（5）：363-368.

[4]MIESCHER SM，HORN MP，PACHLOPNIK JM，et al.Natural anti-Fcepsilon RIalpha autoantibodies isolated from healthy donors and chronic idiopathic urticaria patients reveal a restricted repertoire and autoreactivity on human basophils[J].Hum Antibodies，2001，10（3/4）：119-126.

[5]KRYCZEK I，BRUCE AT，GUDJONSSON JE，et al.Induction of IL-17+T cell trafficking and development by IFN-gamma：mechanism and pathological relevance in psoriasis[J].J Immunol，2008，181（7）：4733-4741.

[6]BETTELLI E，CARRIER Y，GAO W，et al.Reciprocal developmental pathways for the Generation of pathogenic effector TH17 and regulatory T cells[J].Nature，2006，441（790）：235-238.

[7]TAVAKOL M，MOVAHEDI M，AMIRZARGAR AA，et al.Association of interleukin 10 and transforming growth factor β gene polymorphisms with chronic idiopathic urticaria[J].Acta Dermatovenerol Croat，2014，22（4）：239-245.

[8]ALASANDAGUTTI ML，PONNANA M，SIVANGALA R，et al.Role of IFN-γ and IL-6 cytokines and their association in determining susceptibility to chronic idiopathic urticaria[J].GenetTestMol Biomarkers，2014，18（12）：804-809.

[9]KASPERSKA-ZAJAC A，GRZANKA A，DAMASIEWICZ-BODZEK A.IL-6 transsignaling in patients with chronic spontaneous urticaria[J].PLoS One，2015，10（12）：e0145751.

[10]ZHOU L，LOPES JE，CHONG MM，et al.TGF-beta-induced Foxp3 inhibits T（H）17 cell differentiation by antagonizing RORgammat function[J].Nature，2008，453（7192）：236-240.

[11]ICHIYAMA K，YOSHIDA H，WAKABAYASHI Y，et al.Foxp3 inhibits RORgammat-mediated IL-17A mRNA transcription through direct interaction with RORgammat[J].J Biol Chem，2008，283（25）：17003-17008.

[12]IZCUE A，HUE S，BUONOCORE S，et al.Interleukin-23 restrains regulatory T cell activity to drive T cell-dependent colitis[J].Immunity，2008，28（4）：559-570.

[13]BEYER BM，INGRAM R，RAMANATHAN L，et al.Crystal structures ofthepro-inflammatorycytokineinterleukin-23anditscomplexwithahighaffinity neutralizing antibody[J].J Mol Biol，2008，382（4）：942-955.

[14]BRENTANO F，OSPELT C，STANCZYK J，et al.Abundant expression of the interleukin（IL）23 subunit p19，but low levels of bioactive IL23 in the rheumatoid synovium：differential expression and Toll-like receptor-（TLR）dependent regulation of the IL23 subunits，p19 and p40，in rheumatoid arthritis[J].Ann Rheum Dis，2009，68（1）：143-150.

[15]SHEN H，XIA L，LU J，et al.Interleukin-17 and interleukin-23 in patients with polymyositis and dermatomyositis[J].Scand J Rheumatol，2011，40（3）：217-220.

[16]LANGRISH CL，CHEN Y，BLUMENSCHEIN WM，et al.IL-23 drives a pathogenic T cell population that induces autoimmune inflammation[J].J Exp Med，2005，201（2）：233-240.

[17]IWAKURA Y，ISHIGAME H.The IL-23/IL-17 axis in inflammation[J].J Clin Invest，2006，116（5）：1218-1222.

[18]寧靜，白莉.慢性蕁麻疹患者血清中IL-17和IL-33的表達及意義[J/CD].中華臨床醫師雜志：電子版，2016，10（4）：525-528.

[19]李良波，譚君武，彭洪，等.變應性鼻炎患者血清IL-17和IL-23的表達及臨床意義[J].中國免疫學雜志，2015，31（2）：247-249.

[20]曾碧冰，陳明春，王魯梅，等.特應性皮炎患者外周血白介素-17和白介素-23 水平的檢測[J].中國熱帶醫學，2014，14（6）：751-752.

[21]ATWAMA，EMARAAS，YOUSSEFN，etal.SerumconcentrationofIL-17，IL-23 and TNF-α among patients with chronic spontaneous urticaria：association with disease activity and autologous serum skin test[J].J Eur Acad Dermatol Venereol，2014，28（4）：469-474.