三個規(guī)模化豬場偽狂犬病血清學調(diào)查與分析

卓鴻璘

福建省泉州市洛江區(qū)虹山鄉(xiāng)畜牧獸醫(yī)站 福建泉州 362000

豬偽狂犬病主要是引起種豬繁殖障礙和仔豬大量死亡，表現(xiàn)在公豬不育，母豬返情，妊娠母豬發(fā)生流產(chǎn)、產(chǎn)死胎和木乃伊胎，仔豬出現(xiàn)腹瀉、嘔吐和神經(jīng)癥狀，育肥豬出現(xiàn)呼吸道癥狀和生長緩慢，給養(yǎng)豬業(yè)帶來巨大經(jīng)濟損失。20世紀90年代以來，隨著豬偽狂犬病基因缺失疫苗的廣泛使用，該病在我國大部分地區(qū)得到有效控制。然而自從2011年后，我國部分地區(qū)疫苗免疫豬群出現(xiàn)豬偽狂犬病疫情，豬群中偽狂犬病病毒感染呈現(xiàn)逐年上升的趨勢，給豬偽狂犬病的防控帶來新的挑戰(zhàn)[1-3]。

本研究采用酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）方法，調(diào)查3個免疫豬偽狂犬病基因缺失疫苗的規(guī)模化生豬養(yǎng)殖場抗體水平和野毒感染情況，分析3個豬場及不同階段生豬野毒感染情況的差異，探討豬偽狂犬病的防疫措施，為豬偽狂犬病的綜合防治和凈化提供參考。

1 材料和方法

1.1 樣品來源 共采集3個免疫豬偽狂犬病基因缺失疫苗的規(guī)模化生豬養(yǎng)殖場血清樣本390份，其中種豬樣本 250 份（見表 1），豬場Ⅲ 4、6、8、12、16、20、24周齡商品豬樣本各20份。

1.2 主要儀器和試劑 主要儀器：酶標分析儀（北京普朗新技術(shù)有限公司，型號DNM-9602）；臺式離心機（上海安亭科學儀器廠制造，型號TGL-16G）。檢測試劑：豬偽狂犬病病毒gE抗體檢測試劑盒、豬偽狂犬病病毒gB抗體檢測試劑盒，均購自北京金諾百特科技有限公司。

表1 三個規(guī)模化生豬養(yǎng)殖場種豬樣本采集數(shù)量表

1.3 檢測方法 試驗嚴格按照北京金諾百特科技有限公司豬偽狂犬病病毒gE抗體檢測試劑盒和豬偽狂犬病病毒gB抗體檢測試劑盒說明書進行操作。

1.4 結(jié)果判定 豬偽狂犬病病毒gE抗體檢測結(jié)果判定標準：陰性對照OD值≥0.7，陽性對照OD值≤0.25時試驗判定有效；樣品SN值等于樣品OD值/陰性對照OD值，當樣品SN值＞0.6，判為陰性；當SN值≤0.6，判為陽性。

豬偽狂犬病病毒gB抗體檢測結(jié)果判定標準：陰性對照OD值≥0.7，陽性對照OD值≤0.4時試驗判定有效；樣品SN值等于樣品OD值/陰性對照OD值，當樣品SN值＞0.6，判為陰性；當SN值≤0.6，判為陽性。

2 結(jié)果與分析

2.1 三個規(guī)模化生豬養(yǎng)殖場種豬gE抗體檢測結(jié)果豬場Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ種豬的gE抗體陽性率分別為0%、46.0% 和83.2%（見表2）。3個豬場gE抗體陽性率差異較大，這與3個豬場的飼養(yǎng)管理水平及對疫病防控的重視程度有必然的聯(lián)系。豬場Ⅰ飼養(yǎng)管理比較好，重視疫病防疫和種豬疫病監(jiān)測，特別是新引進種豬及本場后備種豬疫病的檢測；豬場Ⅱ重視偽狂犬病疫苗免疫，種豬群存在一定比例的偽狂犬病野毒感染，可能與豬場中原來就存在野毒感染有關(guān)；豬場Ⅲ飼養(yǎng)管理比較差，豬舍通風不好、濕度大，并且不重視豬偽狂犬病疫苗免疫，母豬返情和產(chǎn)死胎的比例較高，仔豬死亡率也比較高，懷疑與豬偽狂犬病有一定的關(guān)系。豬場Ⅲ加強了豬偽狂犬病疫苗的免疫，種豬一年免疫6次，商品豬1日齡滴鼻，50、85和130日齡各免疫一次，后備種豬160和190日齡各免疫一次，但是豬場Ⅲ各個階段生豬gE抗體陽性率仍然比較高，這可能與豬群應激大、免疫力差及感染偽狂犬病病毒后終身帶毒有關(guān)。

豬場Ⅱ和豬場Ⅲ后備母豬gE抗體陽性率都比較高，這可能與對豬群中大豬的疫病防疫不重視、飼養(yǎng)條件與仔豬形成比較大的落差有一定的關(guān)系。后備母豬雖然有加強豬偽狂犬病疫苗的免疫，但是后備母豬來源于中豬，有可能在疫病防疫比較薄弱的時期，受到野毒感染。

表2 三個規(guī)模化生豬養(yǎng)殖場種豬gE抗體檢測結(jié)果

2.2 豬場Ⅲ商品豬gE抗體檢測結(jié)果 豬場Ⅲ商品豬 4、6、8、12、16、20、24 周齡的 gE 抗體陽性率分別為 60%、70%、75%、70%、100%、80%、100%。 仔豬在4周齡時gE抗體就高達60%，據(jù)文獻報道豬偽狂犬病不僅可通過垂直傳播，乳豬還可因吃感染母豬的乳汁而感染該病，也有報道哺乳仔豬的gE抗體陽性率高可能與母源gE抗體的存在有關(guān)[3]，筆者認為母源gE抗體水平應該隨著時間的推移而降低，直至消失，但是本試驗檢測結(jié)果gE抗體的陽性率隨著時間的推移而升高，所以，仔豬還是有被偽狂犬病病毒感染。本試驗中16周齡以上的商品豬gE抗體陽性率非常高，這部分商品豬常呈隱性感染，是豬偽狂犬病綜合防治比較容易忽視的環(huán)節(jié)，一定要多關(guān)注。

2.3 三個規(guī)模化生豬養(yǎng)殖場gB抗體檢測結(jié)果3個豬場種豬gB抗體水平合格率比較高，分別為100%、97.7%、98.9%（見表3）；豬場Ⅲ抽檢24周齡內(nèi)商品豬的gB抗體水平合格率都維持在80%以上（見表4）。謝海波等研究指出，可以有效預防豬偽狂犬病流行的免疫評價標準為免疫合格率80%以上[4]。3個規(guī)模場的免疫均達到標準，疫苗的效果很好，3個豬場偽狂犬病疫苗免疫比較成功。

表3 三個規(guī)模化生豬養(yǎng)殖場種豬gB抗體檢測結(jié)果

表4 豬場Ⅲ商品豬gB抗體檢測結(jié)果

3 討 論

3.1 豬群偽狂犬病凈化才是解決豬偽狂犬病的根本措施 豬偽狂犬病病毒具有高度隱性感染的特點，可引起持續(xù)感染，患豬和帶毒豬可通過唾液、尿液、鼻分泌物、乳汁及精液等持續(xù)向外排毒，妊娠母豬感染偽狂犬病病毒時還可通過垂直傳播侵入胎兒，感染的種豬及其所生仔豬長期帶毒[5-7]。疫苗免疫是當前防治豬偽狂犬病的重要手段，但是從有關(guān)報道和本試驗結(jié)果來看，現(xiàn)有使用的疫苗不能完全保護免疫豬抵抗偽狂犬病病毒流行株的攻擊[1,8]。因此，疫苗免疫和良好的飼養(yǎng)管理是控制豬偽狂犬病擴散的重要手段，但是不能從根本上解決問題，只有嚴格做好引種檢測、疫苗免疫、抗體檢測等生物安全措施下，制定科學的凈化計劃方案，使用病毒基因缺失疫苗配合血清學檢測，逐步淘汰野毒感染豬，建立和擴大健康豬群，才是解決豬偽狂犬病的根本措施。

3.2 合理選擇疫苗能更有效防控豬偽狂犬病 目前，養(yǎng)殖場使用的豬偽狂犬病疫苗主要有滅活疫苗、傳代弱毒疫苗和基因缺失疫苗。滅活疫苗安全性好，不存在隱性感染和毒力返強的問題；但是滅活疫苗的免疫效果相對比較差，免疫應激比較大，臨床上使用的比例不高[9]。傳代弱毒疫苗具有良好的免疫原性，但是存在一定的毒力，具有潛伏感染和散毒的風險，甚至因毒力返強導致疫病的流行；目前我國臨床上廣泛使用的弱毒疫苗是偽狂犬（Bartha-K61）凍干疫苗，它對經(jīng)典偽狂犬強毒具有良好的免疫保護效果，但是免疫豬不能完全抵抗我國2011年以來流行的強毒株的攻擊[1,9]。基因缺失疫苗大多數(shù)具有較強的免疫原性，安全性相對比較好，一般不會造成潛伏感染；使用偽狂犬病gE基因缺失疫苗，可通過檢測偽狂犬病gE抗體準確評價豬群野毒感染的情況。因此，基因缺失疫苗在臨床上的使用比例越來越高，但是基因缺失疫苗成本高，并且隨著基因缺失疫苗廣泛使用，仍然存在基因重組的風險。養(yǎng)殖場應該根據(jù)自身的情況和需求，綜合考慮疫苗的安全性、疫苗使用毒株的保護效果等因素選擇合適的疫苗。

[1]任衛(wèi)科,池晶晶,李秀麗,等.豬偽狂犬病疫苗研究及應用現(xiàn)狀[J].天津農(nóng)業(yè)科學,2017,23(8):37-41.

[2]李俊杰.偽狂犬病凈化技術(shù)及其難點解析 [J].廣東飼料,2017,26(6):48-50.

[3]黃曉慧,吳華健,華耀,等.安徽部分地區(qū)規(guī)模化豬偽狂犬病血清流行病學調(diào)查[J].動物醫(yī)學進展,2017,38(8):126-130.

[4]謝海波,何小華.豬偽狂犬病的流行情況和預防措施[J].中國獸醫(yī)雜志,2001,37(6):21-22.

[5]陳耀春.中國動物疫病志[M].北京:科學出版社,1993:81.

[6]龔才偉.豬偽狂犬病的簡介與凈化 [J].貴州畜牧獸醫(yī),2017,41(3):33-35.

[7]鄧華成,徐雄真.思南縣豬偽狂犬病血清學調(diào)查及防控對策[J].中國畜牧獸醫(yī)文摘,2017,33(6):57-58.

[8]Wang C H,Yuan J,Qin H Y,et al.A novel deleted pseudorabies virus(PRV)provides rapid and complete protection from lethal challenge with the variant emerging in bartha-K61-vaccinated swine population in China[J].Vaccine,2014,32:3379-3385.

[9]楊毅,李文剛,饒寶,等.豬偽狂犬病疫苗的研究進展[J].江西農(nóng)業(yè)學報,2010,22(3):154-157.