一種室內(nèi)快速鑒定棉花苗期黃萎病抗性的新方法
——無紡布育苗袋接種法

張國麗，李全勝，田又升，趙曾強(qiáng)，馬盼盼，于 航，謝宗銘

(新疆農(nóng)墾科學(xué)院 生物技術(shù)研究所/作物種質(zhì)創(chuàng)新與基因資源利用兵團(tuán)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,新疆石河子 832000)

棉花黃萎病是棉花生產(chǎn)上最重要的病害之一，素有棉花“癌癥”之稱[1]。該病是由大麗輪枝菌(VerticilliumdahliaKleb.)引起的一種土傳性維管束病害[2]，其病原菌存活力強(qiáng)，菌核在土壤中無寄主情況下可存活10多年之久[3]，病原菌群體遺傳多樣性豐富，易變異[4-5]，寄主范圍廣，可侵染400多種植物[6]，因而給該病害的防治及抗病育種工作帶來很大困難。新疆是中國最大產(chǎn)棉區(qū)，由于種子調(diào)運(yùn)及連作年限延長，使得棉花黃萎病愈演愈烈，以石河子為代表的北疆棉區(qū)，2008年發(fā)病率30%以上的病田面積比2001年增長857.8%，擴(kuò)展速度驚人[7]。該病已嚴(yán)重阻礙新疆棉花產(chǎn)業(yè)的健康、可持續(xù)發(fā)展。生產(chǎn)實(shí)踐表明，充分挖掘和利用植物本身的防御系統(tǒng)，培育和推廣抗病品種是當(dāng)前最為經(jīng)濟(jì)有效的措施。因此，早期快速準(zhǔn)確鑒定品種的抗性，對抗病育種工作具有重要意義。

目前，棉花黃萎病接種方法主要有3種：針刺接種[8]、菌液澆根接種[9]和傷根接種[10-12]。針刺接種因注射不易控制，且違背黃萎病菌從根部侵染的規(guī)律，因而不常用。菌液直接澆根法發(fā)病速度慢，而且發(fā)病不均勻。傷根接種是最常用的方法，該方法發(fā)病快，鑒定結(jié)果準(zhǔn)確。目前，報道的傷根接種法需要剪去或撕去營養(yǎng)缽底部，剪去或者撕去種有棉花營養(yǎng)缽底部非常不容易，且對基質(zhì)要求較高，操作謹(jǐn)慎，否則基質(zhì)容易散落。本研究介紹一種新的快速鑒定棉花苗期抗病性的方法——利用植物根系可伸出無紡布育苗袋特點(diǎn)，將棉花種植于育苗袋中，接種時將伸出育苗袋的根系造成創(chuàng)傷，通過蘸根而接種。無紡布育苗袋是市場上應(yīng)用非常廣泛的一種育苗袋，該育苗袋價格低廉，在環(huán)境中可降解，具有良好的融水性、融土性和透氣性，保肥保水，不窩根。利用無紡布育苗袋建立的棉花抗病性鑒定方法，簡便易操作，可快速鑒定棉花品種的抗性。

1 材料與方法

1.1 供試棉花品種

供試品種有：‘中棉所49號’‘中棉所51號’‘中棉所79號’‘中棉所80號’‘中棉所89號’‘中植棉2號’(抗病品種，中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所簡桂良先生惠贈)，‘新陸早13號’(感病品種)，‘新陸早33號’‘新陸早36號’‘新陸早47號’‘新陸早53號’，海島棉‘新海14號’‘新海18號’‘新海21號’‘新海25號’。

1.2 供試菌株

供試菌株為致病力較強(qiáng)的落葉型菌系592，由石河子大學(xué)植物病理教研室李國英教授惠贈。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 種子處理 挑選飽滿的棉花種子，用φ=30% 的84消毒液(有效成分為次氯酸鈉，有效氯含量5.5%～6.5%)浸種10 min，倒掉消毒液，用無菌水沖洗棉種數(shù)遍至消毒液無殘留，然后于無菌水中浸泡，黑暗條件下26 ℃ 過夜至種子露白。

1.3.2 棉苗種植方式 選擇感病品種‘新陸早13號’。將培養(yǎng)基質(zhì)(無菌土∶蛭石∶河沙體積比為4∶3 ∶1)裝入6 cm×8 cm的無紡布育苗袋中，裝至約4 cm高；然后放入育苗盒中，采用50 cm×36 cm×14 cm的塑料盒作為育苗盒，且塑料盒用隔板隔成6排，每排放5個育苗袋。每個處理3個重復(fù)，每個重復(fù)10個育苗袋。種植方式：(1)將露白種子種至育苗袋，毎袋4粒，再用培養(yǎng)基質(zhì)覆蓋1.5 cm厚左右；(2)種植方法同(1)，但將育苗袋放入育苗盒后，在育苗袋周圍縫隙中填入培養(yǎng)基質(zhì)使育苗袋下部1/3部分埋在培養(yǎng)基質(zhì)中。管理方法一致：從育苗袋縫隙中澆水，浸潤，之后于26 ℃、濕度40%～50%的人工氣候室培養(yǎng)，并每周澆1次Hoagland’s植物營養(yǎng)液，待出苗后，留2株健康一致的幼苗，繼續(xù)培養(yǎng)，長至2葉1心待用。

1.3.3 孢子懸浮液的配制 將試管保存的棉花黃萎病菌落葉型菌系592轉(zhuǎn)移至PDA平板上，然后于26 ℃ 霉菌培養(yǎng)箱中黑暗培養(yǎng)10 d，用滅菌打孔器在菌絲生長比較一致的地方打5個直徑為 4 mm 的菌餅，將菌餅放入裝有300 mL的Czapek’s培養(yǎng)基的三角瓶中，黑暗條件下26 ℃、220 r/min振蕩培養(yǎng)5 d，然后用4層無菌紗布過濾獲得孢子懸浮液，用血球計數(shù)板計數(shù)并用無菌水將孢子密度數(shù)調(diào)至1.0×107cfu/mL。

1.3.4 接種 在接種前1 d，棉苗在保證健康存活的條件下不要澆水。將育苗袋從育苗盒中拿出，然后在準(zhǔn)備好的孢子懸浮液中浸蘸1 s，育苗袋浸入孢子懸浮液中的部分為育苗袋內(nèi)培養(yǎng)基質(zhì)高度的1/3，然后放回育苗盒，接種時不斷攪拌孢子懸浮液，防止孢子沉到容器底部，保證懸浮液濃度均勻一致。接種完成后于26 ℃下繼續(xù)培養(yǎng)，并調(diào)查發(fā)病情況。

1.3.5 育苗袋蘸菌法與定量接種法的比較 選擇棉花感病品種‘新陸早13號’。棉花種植方式與管理同‘1.3.2’中的(2)，育苗袋周圍縫隙中填入培養(yǎng)基質(zhì)，每種方法3個重復(fù)，每個重復(fù)10個育苗袋。接種：將育苗袋浸入1.0×107cfu/mL 孢子懸浮液中浸蘸1 s，浸入深度為育苗袋內(nèi)培養(yǎng)基質(zhì)高度的1/3；二是定量接種，接種時將濃度為1.0×107cfu/mL 孢子懸浮液倒入直徑為12 cm 的花盆托盤中，每個托盤倒入10 mL，然后3個育苗袋放入1個托盤中，26 ℃培養(yǎng)24 h，從花盆托盤中取出放入育苗盒中繼續(xù)培養(yǎng)，并調(diào)查發(fā)病情況。

1.3.6 育苗袋接種與切根蘸菌法的比較 選擇棉花感病品種‘新陸早13號’。育苗袋接種法：種植和接種方法同‘1.3.5’中的無紡布育苗袋蘸菌法，共3個重復(fù)，每個重復(fù)10個育苗袋；切根蘸菌法參考文獻(xiàn)[12]：將棉花種子播到裝有培養(yǎng)基質(zhì)的營養(yǎng)缽(13 cm×12 cm)中，每缽12粒，深度1.5 cm，5個重復(fù)。待棉苗出土后，每缽留苗6株，當(dāng)棉花長至2片真葉時接種。接種時，將營養(yǎng)缽底部剪去2 cm后放入盛有10 mL孢子懸浮液的花盆托盤中，26 ℃培養(yǎng)24 h后正常管理，調(diào)查發(fā)病情況。

1.3.7 無紡布育苗袋接種方法的應(yīng)用 為了驗(yàn)證無紡布育苗袋接種方法的準(zhǔn)確性，利用該方法比較‘1.1’中16個抗性不同的棉花品種。每個品種3個重復(fù)，每個重復(fù)10個育苗袋，接種方法同‘1.3.5’中的蘸菌法。

1.3.8 病害調(diào)查和統(tǒng)計 棉花接種后每天觀察病害的發(fā)生情況，并按以下方法記載發(fā)病級別[13]：0級：無病植株；1級：0.1%～25%葉片發(fā)病的植株；2級：25%～50%葉片發(fā)病的植株；3級：0.1%～75%葉片發(fā)病的植株；4級：75%以上葉片發(fā)病的植株。病情指數(shù)=∑(各級病株數(shù)×相應(yīng)病級)/調(diào)查總株數(shù)×最高病級×100。并按顧本康等[14]方法劃分棉花品種對黃萎病的抗病反應(yīng)類型。

1.3.9 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析 利用Excel 2007及SPSS 17.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和方差分析，處理間的差異顯著性采用Duncan’s法進(jìn)行單因素多重比較。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同種植方式對接種的影響

通過比較2種不同的棉花種植方式發(fā)現(xiàn)，育苗袋周圍縫隙中填入培養(yǎng)基質(zhì)或者無培養(yǎng)基質(zhì)對棉花生長基本沒有影響(圖1-A，1-B)，出苗、長勢基本一致。但對伸出育苗袋部分的幼根影響很大(圖1-C，1-D)，填入培養(yǎng)基質(zhì)的棉花幼根很少有干枯現(xiàn)象，沒有填入培養(yǎng)基質(zhì)的棉花，伸出育苗袋的根部大多出現(xiàn)干枯現(xiàn)象，失去活力。接種結(jié)果顯示，2種接種方法均可使棉花感病品種‘新陸早13號’發(fā)病(圖2)，但發(fā)病時間與發(fā)病整齊度有差異。育苗袋縫隙中填入培養(yǎng)基質(zhì)的棉苗接種后最早的在第7天開始發(fā)病，第20～25天病情穩(wěn)定。沒有填入培養(yǎng)基質(zhì)的棉苗接種后第10天開始發(fā)病，第30天時病情才逐漸穩(wěn)定。如表1所示，在接種15 d時調(diào)查發(fā)現(xiàn)，2種接種方法的發(fā)病率和病情指數(shù)都存在顯著性差異；在接種20 d時，2種方法的發(fā)病率與病情指數(shù)仍存在顯著性差異；在接種30 d后調(diào)查發(fā)現(xiàn)，縫隙中無培養(yǎng)基質(zhì)棉苗的發(fā)病率和病情指數(shù)才與縫隙中填入培養(yǎng)基質(zhì)的棉苗的發(fā)病率與病情指數(shù)無顯著性差異，說明無培養(yǎng)基質(zhì)的棉苗伸出無紡布袋的根部干枯，對黃萎病菌的侵染影響很大，導(dǎo)致其接種后發(fā)病慢，發(fā)病高峰比有培養(yǎng)基質(zhì)的晚。但在各自病情穩(wěn)定后抗病反應(yīng)類型的劃分上沒有差異，都為感病。

A.育苗袋周圍縫隙中有培養(yǎng)基質(zhì) The gap around the bags filled with medium；B.縫隙中無培養(yǎng)基質(zhì) The gap around the bags no medium；C.縫隙中有培養(yǎng)基質(zhì)的棉花幼根 The cotton root with the gap filled with medium；D.縫隙中無培養(yǎng)基質(zhì)的棉花幼根 The cotton root with the gap no medium

圖1棉苗種植方式
Fig.1Differentcottonplantingpatterns

圖2 ‘新陸早13號’發(fā)病情況Fig.2 The symptoms of cotton cultivar ‘Xinluzao 13’

2.2 育苗袋蘸菌法與定量接種方法的比較

比較育苗袋蘸菌和定量接種的接種效果，第1種為將育苗袋在菌液中浸蘸1 s，第2種為定量接種。試驗(yàn)結(jié)果表明，蘸菌法在第7天開始發(fā)病，定量接種在第8天開始發(fā)病。在接種第15天時，2種方法在發(fā)病率和病情指數(shù)上不存在顯著性差異；在接種第20天時，兩種接種方法在發(fā)病率及病情指數(shù)上也不存在顯著性差異，但定量接種不如浸蘸接種發(fā)病均勻。病情穩(wěn)定后，病情指數(shù)和抗病反應(yīng)類型的劃分不存在差異，都為感病(表2)。

表1 2種不同種植方式結(jié)果比較Table 1 The comparison between the two planting ways

注：數(shù)據(jù)為“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”(n=5)。同列不同字母表示組間存在顯著性差異(P<0.05)。“*”表示隨著時間的延長，感病植株全部枯死，不適合調(diào)查統(tǒng)計。R.抗病，病情指數(shù)20.00以下；T.耐病，病情指數(shù)20.00～30.00；S.感病，病情指數(shù)30.00以上。下表同。

Note: Values is “average ± standard deviation”(n=5).Values with different letters in same column were significant difference(P<0.05).“*” it is not suitable for investigation with time prolonging,because that susceptible plants all died.R.Resistant,disease index below 20.00; T.Tolerant,disease index between 20.00-30.00;S.Susceptible,disease index above 30.00.The same below.

表2 無紡布育苗袋2種種植方式接種結(jié)果比較Table 2 The comparison between the two non-woven bags kinds of planting methods

2.3 無紡布育苗袋接種方法與切根蘸菌方法的比較

為了驗(yàn)證無紡布育苗袋接種方法的準(zhǔn)確性，將該方法與切根蘸菌法進(jìn)行比較。切根蘸菌法是目前應(yīng)用最為廣泛的一種接種方法，也是公認(rèn)最為準(zhǔn)確的方法。通過試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，無紡布育苗袋接種法與切根蘸菌法在接種第15天時發(fā)病率和病情指數(shù)不存在顯著性差異，接種第20天時的發(fā)病率和病情指數(shù)也不存顯著性差異(表3)。說明該方法與切根蘸菌法鑒定結(jié)果基本一致，病情穩(wěn)定后抗病反應(yīng)類型劃分上都為感病。但育苗袋接種發(fā)病更為均勻，切根蘸菌不易控制切根的厚度，可能導(dǎo)致發(fā)病差異大。

表3 無紡布育苗袋與切根蘸菌法接種結(jié)果比較Table 3 The comparison between non-woven breeding bags and rooting-dipping method

2.4 無紡布育苗袋接種方法的應(yīng)用

為了驗(yàn)證無紡布育苗袋方法的可行性，選擇16個不同抗性的棉花品種進(jìn)行抗病性鑒定試驗(yàn)。結(jié)果表明，該方法可以準(zhǔn)確區(qū)分苗期不同棉花品種的抗性，如圖3所示，感病品種‘新陸早13號’在接種20 d時，有的植株已經(jīng)開始脫落成光桿，而抗病品種‘中植棉2號’只有部分子葉變黃萎蔫。表4為利用育苗袋法鑒定的不同品種的抗性結(jié)果，從表中可以看出，試驗(yàn)所用的部分新陸早系列及部分中棉所系列都屬感病品種，但病情指數(shù)上存在顯著或極顯著性差異，例如‘中棉所89號’在第20天時病情指數(shù)為45.83±4.73，而‘新陸早13號’為84.32±0.63，存在極顯著性差異。說明不同品種在耐病性上有一定差異。海島棉系列除‘新海14’表現(xiàn)耐病外，其余品種均表現(xiàn)抗病，說明海島棉抗病性強(qiáng)。

3 討 論

棉花黃萎病有棉花上“癌癥”之說，選育抗病品種是從根本上控制棉花黃萎病的有效策略。但目前生產(chǎn)上仍沒有理想的品種，主要原因就是缺乏高抗的抗源材料。收集來源不同的品種，通過早期的抗病性鑒定，明確不同品種的抗性，篩選出高抗黃萎病的種質(zhì)資源，并運(yùn)用分子生物學(xué)技術(shù)，選育抗病或耐病品種。因此，室內(nèi)苗期快速鑒定是篩選高抗棉花品種的一個重要環(huán)節(jié)，適合大批量篩選抗病資源，比病圃鑒定速度快，不受環(huán)境及氣候條件影響。

圖3 無紡布育苗袋接種法在不同抗性品種上的應(yīng)用Fig.3 The application of non-woven breeding bags on different varieties

品種Variety接種后15d15daysafterinoculation發(fā)病率/%Incidence病情指數(shù)Diseaseindex接種后20d20daysafterinoculation發(fā)病率/%Incidence病情指數(shù)Diseaseindex抗病反應(yīng)類型Reactiontype新陸早13號 Xinluzao1379．65±0．61ab72．39±4．65ab91．49±3．05a84．32±0．63aS新陸早33號 Xinluzao3380．00±0．00ab68．56±3．22bc82．78±2．55b79．54±5．28aS新陸早36號 Xinluzao3686．67±2．89a77．50±5．73a90．00±5．00a83．75±1．25aS新陸早47號 Xinluzao4782．45±2．50ab75．42±3．15a82．78±2．55b79．54±5．28aS新陸早51號 Xinluzao5175．00±5．00bc65．28±4．97c80．00±5．00bc79．54±5．28aS新陸早53號 Xinluzao5376．67±2．89bc64．26±3．85c76．67±2．89bcd70．42±5．91bS中植棉2號 Zhongzhimian216．67±2．89gh6．25±1．25h23．33±2．89h8．56±1．54fR中棉所51號 Zhongmian5170．00±5．00cd54．58±2．60d70．00±5．00de64．58±5．05bS中棉所53號 Zhongmian5370．00±5．00cd54．58±2．60d80．00±5．00bcd70．00±6．25bS中棉所79號 Zhongmian7971．14±3．43cd52．96±3．14d73．33±2．89cd64．58±2．89bS中棉所80號 Zhongmian8064．47±4．24de44．14±4．36e65．00±5．00ef54．30±3．11cS中棉所89號 Zhongmian8959．66±7．59e36．67±3．61f61．33±6．35f45．83±4．73dS新海14號 Xinhai1443．33±5．77f21．25±2．50g41．67±2．89g23．75±2．50eT新海18號 Xinhai1815．00±5．00gh5．00±2．50h16．67±2．89i6．25±2．50fR新海21號 Xinhai2111．67±2．89g3．75±1．25h11．67±2．89i4．17±0．72fR新海25號 Xinhai2520．00±5．00g6．25±1．25h11．67±2．89i7．08±1．91fR

3.1 無紡布育苗袋接種法與其他方法的比較

目前，常見的接種方法有針刺接種、傷根接種和菌液澆根接種。其中針刺接種[8]一般不采用，因?yàn)樽⑸洳灰卓刂?，而且違背黃萎病菌從根部侵染的規(guī)律。傷根接種是目前最常用的方法，傷根接種發(fā)病快，鑒定結(jié)果準(zhǔn)確[10]。傷根接種法有：(1)紙缽撕底菌液蘸根法[11]，將棉花種植于紙缽中，接種時撕掉紙缽底部，然后放置于盛有病原菌的孢子懸浮液中進(jìn)行接種，接種10 d后開始發(fā)病，15 d左右達(dá)到發(fā)病高峰；塑料缽撕底切根法[12]與紙缽撕底法基本一致，接種時需先將塑料缽底部切去2 cm進(jìn)行傷根。(2)無底塑料缽菌液澆根法[9]，利用厚塑料膜制備6 cm×8 cm的無底無蓋圓桶，裝入無菌土，播種置于盆中培養(yǎng)。接種時將無底塑料缽從盆中取出，置于玻璃上輕輕旋轉(zhuǎn)兩圈進(jìn)行傷根，然后將病原菌孢子懸浮液緩慢澆于缽底進(jìn)行接種，20～25 d后調(diào)查發(fā)病情況。(3)苗盤移苗蘸根法[15]，首先水培植物苗至適當(dāng)大小時，切去1 cm水生根進(jìn)行傷根，然后在病原菌懸浮液中蘸根接種，再埋入塑料缽體中，接種10 d后開始發(fā)病。(4)培養(yǎng)基定量接種法[16]，首先培養(yǎng)無菌苗，接種時將無菌苗蘸根接種黃萎病菌，再轉(zhuǎn)移至 M S 培養(yǎng)基中繼續(xù)培養(yǎng)，可以實(shí)現(xiàn)無雜菌污染定量接種。另外，還有蛭石沙土無底紙缽定量蘸菌液法[17]，用報紙制作成6 cm×10 cm直筒，裝入蛭石和河沙(蛭石∶河沙=6∶4，體積比)，接種時放入盛有菌液的紙盤，鑒定周期為40 d左右。

以上傷根接種方法需要專門傷根步驟，切去塑料缽底部、剪去水生根或置于玻璃上旋轉(zhuǎn)進(jìn)行傷根，步驟繁瑣、費(fèi)時費(fèi)力。而且無底營養(yǎng)缽接種方法由于無底給種植管理帶來很大不便，剪去營養(yǎng)缽的底部時，易板結(jié)的土壤在比較干燥時容易控制，但切根時十分費(fèi)力，切去的厚度不均一，造成發(fā)病不均勻現(xiàn)象，板結(jié)土壤也不利于棉苗的生長。苗盤移苗蘸根法需要移栽過程，接種后需要經(jīng)歷緩苗期，緩苗期時棉苗抗病性降低，可能加重病情，而且移栽導(dǎo)致的葉片脫落給病情調(diào)查帶來很大干擾。伸出無底營養(yǎng)缽的棉花幼根易干枯，不利于病原菌侵染，且紙缽容易腐爛。培養(yǎng)基定量接種法[16]該方法適合實(shí)驗(yàn)室精量接種，適于分子研究試驗(yàn)，不適合棉花品種的批量篩選。

本研究利用無紡布育苗袋種植棉花，解決以上接種方法的缺點(diǎn)。首先，無紡布育苗袋是市場上應(yīng)用廣泛的一種育苗袋，該育苗袋價格低廉，在環(huán)境中可降解，具有良好的融水性、融土性和透氣性，保肥保水，不窩根。在種植棉花時，無紡布袋的縫隙中填入培養(yǎng)基質(zhì)，因而在接種前可以保持伸出育苗袋幼根的活力。接種時將育苗袋從育苗盒中拿出時，伸出育苗袋的根被扯斷或造成一定的傷口，然后接種，省去切根等繁瑣步驟。利用育苗袋接種，無需剪根，移苗等過程，不影響棉花正常生長，最大程度地減少統(tǒng)計誤差。接種后發(fā)病均勻，鑒定周期短，該方法也可應(yīng)用于所有類似棉花黃萎病菌等從根部侵染的病原菌的接種。另外，本研究中所用的培養(yǎng)基質(zhì)為無菌土∶蛭石∶河沙的體積比為4∶3∶1，該培養(yǎng)基質(zhì)松散、透氣。將育苗袋剪開，可將基質(zhì)輕松的抖落，用水沖去殘余的培養(yǎng)基質(zhì)，可獲得新鮮幼嫩棉花根部組織，適用于分子生物學(xué)研究。比水培棉花幼根更為新鮮，水培時間長容易褐化，還需經(jīng)常替換營養(yǎng)液。

3.2 育苗袋不同種植方式對接種結(jié)果的影響

通過比較不同種植方式對接種的影響發(fā)現(xiàn)，育苗袋縫隙中填入培養(yǎng)基質(zhì)的棉花從育苗盒中拿出時，其根部的幼嫩組織會造成不同程度的傷口，甚至被扯斷，因而加快病原菌侵染。而育苗袋縫隙中無培養(yǎng)基質(zhì)的棉苗發(fā)病較慢，說明幼嫩有傷口且有活力的根部組織對黃萎病菌的侵染具有重要的作用。因此，種植棉花時在縫隙中覆上適量的培養(yǎng)基質(zhì)，更有利于病原菌侵染，鑒定速度更快，整個過程只需要40～60 d。

3.3 育苗袋接種法的應(yīng)用

本研究利用育苗袋接種法對抗病性不同的16個棉花品種進(jìn)行抗病性鑒定。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，陸地棉抗病性較差，除‘中植棉2號’表現(xiàn)為抗病外，抗病或耐病材料較少。缺乏抗病種質(zhì)資源，是目前黃萎病抗病性育種進(jìn)展緩慢的重要原因。海島棉表現(xiàn)比較抗病，但和陸地棉雜交時后易出現(xiàn)分離現(xiàn)象，不能直接作為抗病種質(zhì)資源。因此，大量收集棉花種植資源，快速鑒定其抗性，篩選抗病種質(zhì)，并與現(xiàn)代分子生物學(xué)技術(shù)相結(jié)合，是加速抗病育種工作的一個重要環(huán)節(jié)及趨勢。本研究的品種抗病性鑒定結(jié)果病情指數(shù)稍重，可能與選取的落葉型黃萎病菌菌株592有關(guān)，該病原菌為強(qiáng)致病落葉型菌系。

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