王加勇，陸紫敏，方 琦，劉承重，李雪晨，徐 華

(同濟大學附屬同濟醫院輸血科，上海 200065)

輸血治療在臨床搶救危重患者的過程中發揮著不可替代的作用，而輸血前的血型鑒定及交叉配血試驗是保障臨床輸血安全的重要措施。正常情況下，人血清中含有少量冷抗體，通常沒有活性，不會與自身細胞產生反應[1]。但高效價的冷反應抗體會干擾血型鑒定和交叉配血試驗，給臨床診斷和治療帶來困難[2]?，F報道1例急診冷凝集致血型鑒定和交叉配血困難的處理。

1 資料與方法

1.1 一般資料 患者，女，41歲，因發現雙下肢瘀斑伴牙齦出血3 d，畏寒、發熱加重1 d，于2016年12月29日夜間到本院急診內科就診。既往有系統性紅斑狼瘡病史12年，急性重病容，瞼結膜蒼白，牙齦處可見活動性出血，雙下肢可見散在陳舊性瘀斑，兩肺呼吸音粗，兩肺底可聞及少許濕性啰音，心腹查體無其他特殊，急診血常規檢查情況見表1，行胸部CT檢查提示兩肺感染并少量胸腔積液。因患者血紅蛋白過低，夜班醫師申請紅細胞懸液2 U。

1.2 儀器與試劑 Diamed-ID定速離心機為瑞士達亞美公司生產，三用電熱恒溫水箱為常州翔天實驗儀器廠生產，2420型離心機為日本久保田生產；凝聚胺試劑為珠海貝索公司產品，ABO、RhD血型定型檢測卡、不規則抗體篩檢卡均為美國伯樂公司產品，抗A抗B血型定型試劑、RhD(IgM)血型定型試劑、人球蛋白抗體(抗IgG，C3d)檢測試劑、人ABO血型反定型用紅細胞試劑、不規則抗體檢測試劑(人紅細胞)均為上海血液生物有限責任公司產品，用于配制紅細胞懸液的生理鹽水為山東華魯制藥有限公司產品。

表1 患者急診血常規檢查結果

1.3 方法

1.3.1 冷抗體吸收試驗 將患者紅細胞用37 ℃生理鹽水洗滌3次，取1例洗滌紅細胞和1例患者血清，混勻置入4 ℃冰箱30 min，每隔10 min搖動1次，使其充分吸收。離心吸取出血清，再與1例洗滌紅細胞混勻置入4 ℃冰箱，重復上述步驟2次，取末次吸附后的血清待用。

1.3.2 ABO血型鑒定 正定型采用微柱凝膠法，反定型采用試管法；交叉配血試驗聯合采用鹽水法、凝聚胺法和微柱凝膠法。

1.3.3 抗體篩查試驗 試驗操作步驟嚴格按照《全國臨床檢驗操作規程》執行[3]。血型不規則抗體篩查試驗，前面3孔依次加入抗體篩選細胞Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ號細胞，自身對照孔加人患者經37 ℃加溫鹽水3次洗滌的紅細胞，37 ℃孵育15 min，離心觀察結果。直接球蛋白試驗陽性對照為IgG型抗D致敏的5% RhD陽性紅細胞生理鹽水懸液，陰性對照為健康人5%紅細胞生理鹽水懸液。

2 結 果

2.1 患者血型鑒定結果 在室溫下鑒定，患者血型正定型是AB型、反定型是O型，RhD陽性，正反定型檢測結果不一致，自身對照為陽性。采用37 ℃加溫鹽水3次洗滌的紅細胞和37 ℃水浴10 min后的血清做血型鑒定，正定型是AB型、反定型是O型，RhD陽性，正反定型檢測結果仍然不一致，自身對照為弱陽性。采用37 ℃加溫鹽水3次洗滌的紅細胞和4 ℃冷抗體吸收后血清再次做血型鑒定，患者血型為是AB型、RhD陽性，正反定型一致，自身對照為陰性。

2.2 患者血型不規則抗體篩選試驗結果 患者血型不規則抗體篩選試驗陰性，直接球蛋白試驗陽性，冷凝集素效價為512。

2.3 交叉配血試驗結果 采用37 ℃加溫鹽水3次洗滌的紅細胞和4 ℃冷抗體吸收后血清，與AB型RhD陽性同型紅細胞進行交叉配血試驗，主側、次側和自身對照在鹽水、凝聚胺和人球蛋白抗體3種介質中無聚集，無溶血現象，聯合交叉配血結果相合。

3 討 論

冷凝集是由冷抗體(冷凝集素)引起的紅細胞低溫環境下凝集現象。冷抗體在低溫(0～4 ℃)時作用最強，紅細胞凝集顯著，但此種凝集反應可逆。隨溫度的升高，復合物逐漸解離，凝塊消失。部分健康人或嬰兒可存在低滴度的冷抗體，其效價多低于1∶16，一般情況下沒有活性。當患者發生某些疾病，如支原體感染、自身免疫性疾病、傳染性單核細胞增多癥、原發性冷凝集素綜合征等時，會出現較高效價的冷抗體，其能與自身紅細胞反應，干擾血型鑒定和交叉配血試驗，給輸血帶來困難[4-5]。

此例患者在血型鑒定過程中，出現正反定型不一致，在排除人為操作和試劑因素后，發現反定型時Al紅細胞(Alc)、B紅細胞(Bc)、O紅細胞(Oc)和自身對照均出現凝集現象，患者血型不規則抗體篩選試驗陰性，直接球蛋白試驗陽性，結合患者異常血常規結果經溫育稀釋后被SYSMEX XN9000血細胞分析儀糾正情況，提示患者存在冷抗體。采用37 ℃加溫鹽水3次洗滌的紅細胞及37 ℃水浴血清后，反定型Alc、Bc、Oc和自身對照凝集減弱但并未完全消失，交叉配血試驗主側和自身對照在鹽水和凝聚胺介質中聚集減弱，考慮患者存在高效價冷抗體。患者血清稀釋后，與標準紅細胞在室溫時測得患者冷凝集素效價為512。高效價冷抗體沒有對微柱凝膠法產生影響，是因為微柱凝膠法在交叉配血和血型不規則抗體篩查時都需在37 ℃孵育器內孵育15 min，使冷凝集素暫時失去活性?；颊呒t細胞經37 ℃加溫鹽水3次洗滌，交叉配血次側沒有受到影響[1]。采用冷抗體吸收后的血清鑒定血型，Alc、Bc、Oc和自身對照均凝集消失，聯合交叉配血結果相合。

高效價的冷凝集患者，臨床必須輸血時需輸注同型洗滌紅細胞[6]。該患者是夜間急診搶救用血，實際工作中，可發給臨床2單位復溫至接近人體正常溫度的去白紅細胞懸液，并囑臨床調高室內溫度至20～30 ℃，緩慢輸注，密切觀察，保證輸血安全。

[1]陳德智,申衛和,沈道全.1例冷凝集造成ABO血型鑒定及配血困難的處理[J].中國醫藥導報,2012,9(1):118-119.

[2]李英,夏偉紅.高效價自身冷抗體致血型鑒定和交叉配血困難的有效處理[J].臨床研究,2016,24(2):192-192.

[3]尚紅,王毓三,申子瑜.全國臨床檢驗操作規程[M].4版.北京:人民衛生出版社,2014:127-129.

[4]唐友云,桂滿元.冷凝集素對血常規的影響及不同處理方法的分析[J].國際檢驗醫學雜志,2014,35(17):2401-2403.

[5]胡曉玲,汪新明,鄧淑芬,等.脾亢患者冷凝集素干擾致交叉配血不合的處理1例[J].西南國防醫藥,2015,25(12):1380-1381.