Rh抗原分型檢測對反復輸血患者的臨床意義

陽志勇 陳芝喜

(南華大學附屬第一醫(yī)院輸血科，衡陽 421001)

Rh血型系統(tǒng)在臨床上的重要性僅次于ABO血型系統(tǒng)，該系統(tǒng)非常復雜，所包含的抗原數目最多，共有54個抗原，但臨床最主要、最常見的僅有5個抗原D、C、c、E、e，其中免疫原性最強的是D抗原，其次是c和E抗原[1]。由于D抗原的重要性，我們對于D抗原陰性的患者或者孕產婦，都給予了足夠重視，因此近年來由于D抗原陰性導致的非同型輸血已經很罕見了。但是筆者在工作中發(fā)現，很多血液系統(tǒng)疾病的患者，由于反復多次輸血，不規(guī)則抗體篩查陽性，配血不合的現象越來越多，經過抗體鑒定后發(fā)現絕大部分患者是產生了Rh系統(tǒng)的同種抗體，其中以抗E最多見。在對免疫性紅細胞同種抗體相對頻率的研究中，發(fā)現我國臨床上免疫性抗E比抗D更常見，這主要是與D、E等抗原分布有關[2]。為了盡可能避免需要多次輸血患者產生同種抗體，在臨床上可以采取Rh系統(tǒng)主要抗原同型輸血，因此，該類患者首次輸血前進行Rh抗原分型檢測就尤其具有重要的意義。

1 材料與方法

1.1材料

1.1.1研究對象 2016年7月～2017年3月本院門診、住院患者共19 845人次中檢測出不規(guī)則抗體篩查陽性的患者共128例，其中男性38例，女性90例，年齡分布在2～86歲。

1.1.2試劑與儀器 Rh血型抗原檢測試劑(單克隆抗體，上海血液生物醫(yī)藥有限公司，批號20163002，20163103，20163302，20163201)、抗人球蛋白檢測卡(長春博迅生物技術有限責任公司，批號20160503，20161208，20170210)、抗體篩選細胞(3人份，上海血液生物醫(yī)藥有限公司，批號20160618，20160820，20161128，20170102)、紅細胞血型抗體鑒定細胞(10人份，上海血液生物醫(yī)藥有限公司，批號20160718，20160927，20161201)，以上試劑均在效期內使用。FYQ型免疫微柱孵育器、TD-3A型血型血清學離心機(長春博研醫(yī)學生物儀器公司)；KA-2200久保田離心機(日本)。

1.2方法

1.2.1不規(guī)則抗體的篩查 用鹽水介質法和抗人球蛋白檢測卡法這兩種方法篩查患者血清中不規(guī)則抗體(任意1種方法有反應性就判定患者抗體篩查陽性)，檢測出128例不規(guī)則抗體篩查陽性患者。

1.2.2紅細胞Rh血型的抗原分型和不規(guī)則抗體特異性鑒定 分別檢測這128例標本Rh抗原分型和紅細胞單特異性抗體鑒定，并對Rh系統(tǒng)的意外抗體分布情況進行統(tǒng)計分析。

1.3統(tǒng)計學處理 數據采用GraphPad5.0軟件進行統(tǒng)計分析處理，計數資料用百分率(%)表示，采用Fisher精確檢驗，P<0.05表示差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1128例不規(guī)則抗體篩查陽性患者的抗體特異性鑒定發(fā)現，Rh系統(tǒng)中抗E和抗c檢出率達到60%以上，尤其以抗E更為多見，占總檢出例數的56.25%，Rh系統(tǒng)的意外抗體(60.16%)與MNSs系統(tǒng)(10.94%)、Lewis系統(tǒng)(11.72%)、P系統(tǒng)(3.13%)比較，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。各種特異性抗體檢出情況見表1。

2.2128例不規(guī)則抗體篩查陽性患者Rh抗原分型檢測結果見表2，其中占絕大多數的表型是DCCee。

2.3128例抗體篩查陽性患者產生的不規(guī)則抗體屬于Rh系統(tǒng)的所屬病區(qū)分布情況見表3，從此表可見需要反復輸血的科室如血液內科、消化內科、ICU的患者占多數。

表1128例患者中各種特異性抗體的占比

Tab.1Proportionofvariousspecificantibodiesin128patients

SpecificantibodynProportion(%)RhAnti?E7256 25Anti?c53 91MNSs?system1)Anti?M107 81Anti?Mur43 13Lewis?system1)Anti?Lea1511 72P?system1)Anti?P143 13Others1814 05Total128100

Note：Other antibodies include autoantibodies and those fail to identify specific ones.Compared with Rh system,1)P<0.05.

表2128例不規(guī)則抗體篩查陽性患者Rh抗原分型檢測結果

Tab.2TestresultsofRhantigentypingin128patientswithirregularantibodyscreening

Antigentypingn(%)Anti?E(n)Anti?c(n)DCCee74(57 82)645DCcee10(7 81)60DccEE5(3 91)00DccEe2(1 56)00DCcEe34(26 56)00DCcEE1(0 78)00dCcee1(0 78)10dccee1(0 78)10Total128(100)725

表3128例不規(guī)則抗體篩查陽性患者所屬病區(qū)的分布情況

Tab.3Distributionofpatientsin128patientswithirregularantibodyscreening

Departmentn(positive)ninRhsystem(%)Hematology3526(74 29)Digestive1611(68 75)ICU54(80 0)Obstetric106(60 0)Gynecology72(28 57)Gastrointestinal117(63 64)Spine85(62 5)Hepatobiliary106(60 0)Infection103(30 0)Neurosurgery74(57 14)Orthopaedic42(50 0)Urology51(20 0)Total12877(60 16)

3 討論

Rh系統(tǒng)的血型抗體最初是從一名引起嚴重新生兒溶血病和發(fā)生溶血性輸血反應的產婦血液中發(fā)現的。由于其重要的臨床意義，人們對RhD抗原抗體反應給予了極大的關注，因此在日常工作中，抗D抗體已經很少見了。但是Rh系統(tǒng)其他幾個抗體則經常出現在我們的視野中，這主要是由于對其他幾個抗原的關注不夠，Rh系統(tǒng)非完全同型輸血普遍存在，當受者與供者間抗原存在差異時，可能會導致相應抗體的產生。為了了解其在安全輸血以及有效輸血中的作用，我們從19 845例門診和住院患者中選取了128例抗篩陽性的患者，通過微柱凝膠法進行單特異性抗體鑒定，發(fā)現Rh系統(tǒng)的不規(guī)則抗體一共有77例，占60.16%其中尤以抗E為主(72例/77例)，而其他多個系統(tǒng)的不規(guī)則抗體共51例。由此可見，抗篩陽性患者所占的比率達到0.64%，與各地文獻報道基本一致。而一直以來我們談及色變的抗-D其實在日常工作中極為罕見，反倒是抗-E日漸成為引起溶血性輸血反應的主要因素。

對這128例不規(guī)則抗體篩查陽性的患者進行Rh抗原分型的結果來看，表型分布為DCCee(74例，57.82%)>DCcEe(34例，26.56%)>DCcee(10例，7.81%)>DccEE(5例，3.91%)>DccEe(2例，1.56%)>DCcEE(1例，0.78%)、dCcee(1例，0.78%)、dccee(1例，0.78%)，C、c、E、e四種抗原的檢出率分別為93.75%(120例)、42.19%(54例)、32.81%(42例)、95.31%(122例)。在檢出的8種表型中，以DCCee表型最多占57.82%，其次是DCcEe表型占26.56%；四種抗原在人群的分布以E抗原陽性率最少僅32.81%，其次是c抗原陽性率僅42.19%，這與國內報道的檢出情況一致[3-5]。根據我國《臨床輸血技術規(guī)范》要求，患者輸血前要常規(guī)檢測Rh(D)抗原，并對其陰性的患者采用自身輸血、同型輸血以及相容性輸血，但是對于E抗原和c抗原并未要求常規(guī)檢測，而且E、c抗原頻率遠低于其他三個抗原，使得E、c抗原陰性的患者產生同種免疫的可能性大大增加，因此，在不規(guī)則抗體鑒定中，抗-E抗體的檢出率才會占據了所有檢出特異性抗體的一半以上。

128例抗篩陽性的患者中，檢出了77例Rh系統(tǒng)的同種抗體，我們發(fā)現，這些患者常見于ICU、血液內科和消化內科，這些病區(qū)的患者大都是血液系統(tǒng)疾病、消化道大出血以及危重大出血患者，臨床治療上對血液的需求很大，需要反復多次輸血，因此接受外來抗原的機會比一般患者要大得多，從而導致抗原刺激產生意外抗體的機會更大。一旦產生了同種抗體，在后續(xù)的輸血治療上，難度將會加大，一方面是更難找到相合的血液，另一方面是發(fā)生各種遲發(fā)性或急性溶血反應的幾率增加。同種抗體一旦產生，就不會消失，只會隨著時間的改變效價逐漸降低，但是一旦再次接觸相應的抗原，就會引起“回憶性反應”，抗體效價急劇上升，造成嚴重的溶血反應[6]。如果我國采供血機構對所有獻血者檢測RhD、C、c、E、e等抗原，并堅持采用Rh系統(tǒng)五個抗原同型輸血，或者對預計需要反復輸血的病人采用Rh系統(tǒng)五個抗原同型輸血，那么患者產生Rh系統(tǒng)的同種抗體的幾率就會顯著降低。Rh系統(tǒng)不規(guī)則抗體的產生避免了，絕大多數的患者就不會出現抗體篩查陽性的現象，這將會極大地提高輸血療效和輸血安全。

[1] 胡麗華.臨床輸血學檢驗[M].第3版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2012：23-25.

Hu LH，Clinical Transfusion Test[M].3 rd.Beijing:People′s Medical Publishing House,2012：23-25.

[2] 于天華，遇紅梅，梁海英，等.5 050名患者Rh分型及不規(guī)則抗體鑒定結果分析[J].中國輸血雜志，2012,25(8)：756-758.

Yu TH，Yu HM，Liang HY，etal.Analysis of Rh typing and irregular antibody identification in 5 050 patients[J].Chin J Blood Transf，2012,25(8)：756-758.

[3] 劉 毅，吳敏慧，鄭 凌，等.Rh血型C、c、E、e抗原在南京地區(qū)部分人群分布頻率[J].中國輸血雜志，2009,22(10)：830-831.

Liu Y，Wu MH，Zheng L，etal.The distribute frequency of Rh blood group C,c,E and e antigen in some population in nanjing[J].Chin J Blood Transf，2009,22(10)：830-831.

[4] 魏 莉，杜振軍，牟曦光，等.聊城市Rh血型表型庫的建立[J].中國輸血雜志，2012，,25(7)：685-686.

Wei L，Du ZJ，Mou XG，etal.The establishment of liaocheng Rh blood type phenotype library[J].Chin J Blood Transf，2012，,25(7)：685-686.

[5] 石翠英，喬 芳.河北漢族人群Rh表型血清學分析[J].臨床血液學雜志，2010,23(2)：71-72.

Shi CY，Qiao F.Analysis of Rh phenotypic serology in han nationality of Hebei province[J].J Clin Hematol,2010,23(2)：71-72.

[6] 沈 健，施欣蔚，陳秉宇，等.臨床常規(guī)Rh表型檢測及配合性輸血必要性和療效探討[J].中國衛(wèi)生檢驗雜志，2016,26(4)：1146-1148.

Shen J，Shi XW，Chen BY，etal.The necessity and the therapeutic effect discussion to the clinical routine Rh phenotype detection and the combination[J].Chin J Health Inspection，2016,26(4)：1146-1148.