益生菌對(duì)肥胖兒童和青少年非酒精脂肪肝的影響

魏 玲，婁 健

(云南省第二人民醫(yī)院營(yíng)養(yǎng)科，昆明 650021)

非酒精性脂肪肝(NAFLD)是肥胖青少年最常見的慢性肝臟疾病，其以肝代謝綜合征為特征，嚴(yán)重者發(fā)展為非酒精性脂肪肝炎、肝纖維化[1-2]。過(guò)去幾十年，非酒精性脂肪肝兒童患病率隨著營(yíng)養(yǎng)過(guò)剩和肥胖癥發(fā)病率的增加而大幅上升。研究發(fā)現(xiàn)，普通兒童的非酒精性脂肪肝患病率為3%～10%，而肥胖兒童的患病率為70%～80%[3-4]，目前認(rèn)為遺傳、表觀遺傳和環(huán)境因素主導(dǎo)其發(fā)病機(jī)制[5]。研究還表明，腸-肝軸利于兒童非酒精性脂肪肝腸道微生物群[6]。因此，針對(duì)腸-肝軸使用益生菌，可能是治療非酒精性脂肪肝的另一適當(dāng)方法。本研究旨在評(píng)價(jià)益生菌對(duì)肥胖兒童和青少年非酒精性脂肪肝的影響。

1 資料和方法

1.1 一般資料

回顧性分析68例肥胖非酒精性脂肪肝患者的三盲試驗(yàn)。男性35例、女性33例，平均年齡12.7±2.0歲(10～18歲)。納入標(biāo)準(zhǔn)：年齡10～18歲，超聲確診為脂肪肝。排除標(biāo)準(zhǔn)：威爾遜疾病、自身免疫性肝炎、病毒性肝炎(B和C)、艾滋病、α-11抗胰蛋白酶缺乏癥、血色沉著病和其他代謝疾病、飲酒史。4例患者因肝炎排除，實(shí)際有效研究樣本數(shù)64例。本研究獲得患者知情同意書及醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 研究方法

1.2.1分組及治療 計(jì)算機(jī)生成隨機(jī)數(shù)，將所有符合條件的研究對(duì)象，隨機(jī)分配到益生菌組(n=32例)和安慰劑組(n=32例)。益生菌組：每日2瓶益生菌制劑(以植物乳桿菌、嗜熱鏈球菌為主的多菌屬?gòu)?fù)合乳酸菌，規(guī)格60g，昆明寶成生物科技有限公司，執(zhí)行企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，Q/KBC0001S)，連續(xù)服用3療程。安慰劑組：每日2瓶安慰劑制劑(普通菌種)，連續(xù)服用3療程。益生菌制劑和安慰劑制劑呈相同的形狀、大小和顏色。

治療期間同時(shí)干預(yù)生活習(xí)慣，包括日常活動(dòng)、快走、改善飲食習(xí)慣，增加水果和蔬菜攝入量；少食快餐、高脂肪、高糖飲食。每月檢查體重、身高、服藥依從性。研究開始和結(jié)束均進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室測(cè)量、超聲檢查。

1.2.2人體測(cè)量數(shù)據(jù) 使用標(biāo)準(zhǔn)儀器測(cè)量體重(輕衣)、身高(裸足)、腰圍(cm)及BMI(kg/m2)。

1.2.3實(shí)驗(yàn)室測(cè)量 禁食12h，空腹采集靜脈血樣。自動(dòng)分析儀(Hitachi、東京、日本)測(cè)定血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(AST)。

1.2.4超聲檢查 超聲檢查脂肪肝(3.5～5 MHz，西門子，Sonoline G50系列、型號(hào)7474922)。輕度(等級(jí)Ⅰ)：肝臟形態(tài)大小正常，邊緣清晰，表面光帶清晰，實(shí)質(zhì)回聲成“細(xì)點(diǎn)”狀，前場(chǎng)增強(qiáng)，遠(yuǎn)場(chǎng)衰減不明顯，肝內(nèi)管道顯示清晰，或血管偏細(xì)；中度(等級(jí)Ⅱ)：邊緣清晰略鈍，肝實(shí)質(zhì)回聲細(xì)密增強(qiáng)，后緣輪廓隱約可見，肝內(nèi)血管網(wǎng)絡(luò)少見；重度(等級(jí)Ⅲ)：肝臟增大，形態(tài)飽滿，邊緣明顯變鈍，前場(chǎng)呈“云霧”狀，后緣輪廓不清，膽囊壁回聲與肝實(shí)質(zhì)回聲融合不清，部分似膽囊炎。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

SPSS 20.0軟件用于數(shù)據(jù)分析，配對(duì)t檢驗(yàn)，Wilcoxon符號(hào)秩檢驗(yàn)數(shù)據(jù)正態(tài)分布，Mann-Whitney U 檢驗(yàn)組間差異，P<0.05認(rèn)為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果與分析

2.1 兩組患者基線特征

研究前，2組的年齡、性別、人體測(cè)量值、生化測(cè)量值和影像學(xué)檢查相似，無(wú)顯著差異(表1)。

表1 非酒精性脂肪肝患者基線人口統(tǒng)計(jì)學(xué)和人體測(cè)量特征

注：HDL=高密度脂蛋白，LDL=低密度脂蛋白

2.2 研究前后各組內(nèi)變化比較

組內(nèi)比較顯示，益生菌組ALT、AST、腰圍均值顯著下降。安慰劑組ALT、腰圍無(wú)顯著變化。各組研究前后的體重、BMI，BMIZ分值無(wú)顯著變化(表2、表3)。益生菌組，治療前14例轉(zhuǎn)氨酶異常，治療后5例轉(zhuǎn)氨酶異常，轉(zhuǎn)陰9例(P=0.004)。安慰劑組，研究前后各項(xiàng)指標(biāo)無(wú)顯著變化，統(tǒng)計(jì)學(xué)分析無(wú)差異(P>0.05)。

表2 益生菌組研究前后組內(nèi)變化比較

注：HDL=高密度脂蛋白、LDL=低密度脂蛋白

表3 安慰劑組研究前后組內(nèi)變化比較

注：HDL=高密度脂蛋白、LDL=低密度脂蛋白

2.3 研究后組間變化比較

研究結(jié)束后，生化檢查發(fā)現(xiàn)益生菌組各項(xiàng)轉(zhuǎn)氨酶顯著低于安慰劑組，正常肝超聲比例更高，Ⅲ級(jí)脂肪肝比例明顯低于安慰劑組。研究前，益生菌組膽固醇水平顯著高于安慰劑組，研究后，膽固醇水平逆轉(zhuǎn)(表4)。

表4 兩組研究后變化比較

注：HDL=高密度脂蛋白、LDL=低密度脂蛋白

3 討論

研究表明，腸道微生物群通過(guò)腸-肝軸對(duì)非酒精性脂肪肝產(chǎn)生作用[7]。同時(shí)，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證明[8]，益生菌能夠改善非酒精性脂肪肝，但人類臨床研究數(shù)據(jù)，尤其是兒科數(shù)據(jù)稀缺。已有2個(gè)臨床試驗(yàn)研究了不同菌株的益生菌對(duì)非酒精性脂肪肝青少年的療效。在一項(xiàng)雙盲臨床試驗(yàn)中，Vajro等[9]采用乳桿菌菌株GG治療20例非酒精性脂肪肝肥胖兒童，發(fā)現(xiàn)8w后，該菌株治愈80%脂肪肝患兒，血清ALT水平顯著降低。他們認(rèn)為益生菌可以作為適當(dāng)?shù)闹委煿ぞ哂糜谥委焹和蔷凭灾靖巍Ｔ诹硪豁?xiàng)安慰劑對(duì)比研究中，Alisi[10]比較了VSL#3 和安慰劑治療44例非酒精性脂肪肝肥胖兒童，VSL#3包含8種益生菌菌株。保加利亞乳桿菌顯著改善脂肪肝和BMI。本試驗(yàn)采用益生菌介入治療非酒精性脂肪肝，并證實(shí)了療效，研究結(jié)果與其他研究相似。

研究報(bào)道，益生菌可有效改善脂肪肝功能，減輕病癥[11]。盡管本研究觀察到2組超聲分級(jí)均有改善，但益生菌組肝超聲結(jié)果優(yōu)于安慰劑組。此外，一些臨床試驗(yàn)已經(jīng)證明，益生菌可能會(huì)降低轉(zhuǎn)氨酶水平[12]。本研究中，益生菌組的AST和ALT血清濃度均降低且與超聲檢查結(jié)果平行，與前人研究結(jié)果相似。但是益生菌對(duì)BMI及腰圍的影響，仍存爭(zhēng)議[13-14]。本研究中，益生菌對(duì)腰圍有顯著影響，但不影響體重和BMI。此外，益生菌還降低了膽固醇、低密度脂蛋白、甘油三酯，然而高密度脂蛋白并未升高，可能與治療時(shí)間短暫有關(guān)。

本隨機(jī)對(duì)照試驗(yàn)結(jié)果表明，益生菌可改善某些變量，特別是轉(zhuǎn)氨酶和肝超聲。本研究仍存在不足之處。首先研究樣本少，其次研究時(shí)間和隨訪時(shí)間短，未建立炎癥因子評(píng)估體系。由于樣本量不夠大，無(wú)法評(píng)估性別差異對(duì)益生菌的影響。此外，本研究中使用的多菌屬?gòu)?fù)合益生菌為多種益生菌菌株的混合物。為獲得更精確的結(jié)果，建議今后的研究側(cè)重評(píng)價(jià)單一益生菌劑療效，并進(jìn)行交叉試驗(yàn)來(lái)評(píng)估腸道微生物群變化。考慮到侵入性損傷，本項(xiàng)研究未進(jìn)行肝臟組織活檢。研究對(duì)象的主要問題只是超重，而無(wú)其他嚴(yán)重的肝臟問題，因此僅限于超聲檢查和生化檢查。◇

[1]董姝，劉平，孫明瑜.非酒精性脂肪肝的治療研究進(jìn)展[J]. 遼寧中醫(yī)雜志，2013，40(3)：599-602.

[2]王宇，鄭錦鋒.非酒精性脂肪肝營(yíng)養(yǎng)干預(yù)的研究進(jìn)展[J]. 醫(yī)學(xué)研究生學(xué)報(bào)，2014，27(1)：99-101.

[3]Schwimmer J B，Deutsch R，Kahen T，et al.Prevalence of fatty liver in children and adolescents[J]. Pediatrics，2006，118(4)：1388-1393.

[4]Bellentani S，Scaglioni F，Marino M，et al.Epidemiology of non-alcoholic fatty liver disease[J]. Digestive Diseases，2010，28(1)：155-161.

[5]Nobili V，Alkhouri N，Alisi A，et al.Nonalcoholic fatty liver disease：a challenge for pediatricians[J]. Jama Pediatrics，2015，169(2)：170-176.

[6]Park J S，Seo J H，Youn H S.Gut microbiota and clinical disease：obesity and nonalcoholic fatty liver disease[J]. Pediatric Gastroenterology，Hepatology & Nutrition，2013，16(1)：22-27.

[7]戴鑫，呂宗舜.腸道屏障功能在非酒精性脂肪性肝病發(fā)病機(jī)制中的作用[J]. 世界華人消化雜志，2012，20(8)：656-661.

[8]Kelishadi R，F(xiàn)arajian S，Mirlohi M.Probiotics as a novel treatment for non-alcoholic fatty liver disease；a systematic review on the current evidences[J]. Hepatitis Monthly，2013，13(4)：1-8.

[9]Vajro P，Mandato C，Licenziati MR，et al.Effects of Lactobacillus rhamnosus strain GG in pediatric obesity-related liver disease[J]. Journal of Pediatric Gastroenterology and Nutrition，2011，52(6)：740-743.

[10]Alisi A，Bedogni G，Baviera G，et al.Randomised clinical trial：the beneficial effects of VSL# 3 in obese children with non-alcoholic steatohepatitis[J]. Alimentary Pharmacology & Therapeutics，2014，39(11)：1276-1285.

[11]Malaguarnera M，Vacante M，Antic T，et al.Bifidobacterium longum with fructo-oligosaccharides in patients with non alcoholic steatohepatitis[J]. Digestive Diseases and Sciences，2012，57(2)：545-553.

[12]Eslamparast T，Poustchi H，Zamani F，et al.Synbiotic supplementation in nonalcoholic fatty liver disease：a randomized，double-blind，placebo-controlled pilot study[J]. The American Journal of Clinical Nutrition，2014，99(3)：535-542.

[13]Aller R，De Luis DA，Izaola O，et al.Effect of a probiotic on liver aminotransferases in nonalcoholic fatty liver disease patients：a double blind randomized clinical trial[J]. Eur Rev Med Pharmacol Sci，2011，15(9)：1090-5.

[14]Wong VW，Won GL，Chim AM，et al.Treatment of nonalcoholic steatohepatitis with probiotics.proof-of-concept study[J]. Ann Hepatol，2013，12(2)：256-62.