滋膵飲對2型糖尿病大鼠胰島病理結(jié)構(gòu)的影響

許冬霞

（河南省洛陽市第一中醫(yī)院藥學(xué)部，河南 洛陽 471000）

糖尿病已成為影響我國居民健康的主要代謝性疾病，近年調(diào)查資料表明，單純口服西藥大多不能有效控制糖血糖［1］。滋膵飲方出《醫(yī)學(xué)衷中參西錄》，主要治療消渴癥。現(xiàn)代研究表明滋膵飲對2型糖尿病具有較好的治療作用［2］，但其基礎(chǔ)研究文獻(xiàn)報道較少。本研究通過建立2型糖尿病大鼠模型探討滋膵飲對2型糖尿病的治療作用機(jī)制。

1 材料與方法

實驗材料。鏈脲佐菌素（STZ，Sigma公司）；滋膵飲（主要成分黃芪、生地、山藥、山茱萸、豬胰子由洛陽市第一中醫(yī)院中藥房提供）；鹽酸二甲雙胍片（深圳市中聯(lián)制藥有限公司）；葡萄糖檢測試劑盒（北京普利萊基因技術(shù)有限責(zé)任公司）；TC、TG、HDL-C測定試劑盒（均購自上海信裕生物科技有限公司），Ins ELISA試劑盒（江蘇科特生物科技有限公司）。

藥物制備。黃芪、生地、山藥、山萸肉用5倍量水浸泡1h后，煎煮3次，每次0.5h，合并煎液，將豬胰子干燥磨成粉末加入煎液，濃縮為大鼠灌胃濃度，分別為0.52g/mL，1.04g/mL，2.08g/mL（以原生藥計），二甲雙胍配制為0.28g/mL。

動物分組及處理。180～220g雄性SD大鼠100只（購自河南省實驗動物中心），隨機(jī)分出10只大鼠喂養(yǎng)正常飼料做為正常對照組，剩余90只為造模組喂養(yǎng)高糖高脂飼料（由河南省動物實驗中心提供，含豬油20%、蔗糖20%）。4周后，造模組大鼠禁食12h，一次性腹腔注射STZ 35mg/kg，正常對照組給予同等劑量的緩沖液注射［3］。注射STZ72h后，檢測空腹血糖和葡萄糖耐量（OGTT），成模標(biāo)準(zhǔn)為空腹血糖大于等于7.8mmol/L且灌服2g/kg葡萄糖溶液2h后血糖大于等于11.1mmol/L。選取成模大鼠進(jìn)行實驗。將造模成功的大鼠按血糖均衡原則，分為5組，分別為模型組、二甲雙胍組、滋膵飲低中高3個劑量組。正常對照組、模型組給予蒸餾水5mL/（kg·d），二甲雙胍組給予二甲雙胍200mg/（kg·d），滋膵飲低劑量組、滋膵飲中劑量組、滋膵飲高劑量組分別給予滋膵飲以原生藥計10.3g/（kg·d）、20.6g/（kg·d）、41.2g/（kg·d），連續(xù)給藥8周。

生化指標(biāo)檢測。采用葡萄糖氧化酶法檢測大鼠OGTT值，Ins值用ELISA法檢測，血清TC、TG、HDL-C采用全自動生化分析儀檢測。均嚴(yán)格按說明書操作，LDL-C由計算得到。

胰腺的組織病理學(xué)觀察。取胰腺組織進(jìn)行常規(guī)的HE染色處理，采用光學(xué)顯微鏡觀察胰島細(xì)胞的病理變化。

用SPSS18.0軟件進(jìn)行單因素方差分析（One-Way ANOVA）處理。

2 實驗結(jié)果

滋膵飲對糖尿病大鼠OGTT的影響見表1。給藥8周后，滋膵飲低劑量組在120min時血糖值與模型組比較降低22.8%，兩組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；滋膵飲中劑量組在30min、120min時血糖值與模型組相比分別降低27.2%、26.9%，組間比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；滋膵飲高劑量組在0min、30min、60min、120min時血糖值與模型組相比分別降低29.1%、32.3%、32.5%、36.7%，組間比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。

表1 滋膵飲對糖尿病大鼠OGTT的影響 （±s）

表1 滋膵飲對糖尿病大鼠OGTT的影響 （±s）

注：與正常組比較，*P＜0.05，**P＜0.01；與模型組比較，△P＜0.05，△△P＜0.01。

正常組 3.20±0.22 4.12±0.43 5.24±0.46 4.38±0.24模型組 11.68±1.76** 15.31±2.73** 17.62±2.44** 16.15±1.56**二甲雙胍組 7.96±2.12**△△ 10.34±1.92**△△ 12.12±2.57**△△ 10.19±2.13**△△滋膵飲低劑量組 10.59±2.39** 12.80±3.54** 14.63±2.53** 12.46±2.60**△滋膵飲中劑量組 9.12±2.18** 11.15±1.43**△ 14.95±2.94** 11.81±3.65**△滋膵飲高劑量組 8.29±1.58**△△ 10.36±1.83**△△ 11.90±1.08**△△ 10.23±1.11**△△

滋膵飲對糖尿病大鼠血清胰島素和血脂及脂蛋白的影響見表2。給藥8周后，滋膵飲低、中、高劑量組大鼠TC與模型組比較分別降低25.4%、31.3%、25.4%，組間比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；滋膵飲各組大鼠TG、LDL-C與模型組相比分別降低37.5%、38.9%、40.6%,35.6%、45.8%、48.3%，組間比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；滋膵飲高劑量組Ins與模型組比升高31.3%，組間比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01）；滋膵飲中、高劑量組HDL-C與模型組比較，分別升高30.8%、32.7%，組間比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05，P＜0.01）。

表2 滋膵飲對糖尿病大鼠Ins、TC、TG、HDL-C、LDL-C的影響 （±s）

表2 滋膵飲對糖尿病大鼠Ins、TC、TG、HDL-C、LDL-C的影響 （±s）

注：與正常組比較，*P＜0.05、**P＜0.01；與模型組比較，△P＜0.05、△△P＜0.01。

組別 Ins（μIU/mL） TC（mmol/L） TG（mmol/L） HDL-C（mmol/L） LDL-c（mmol/L）正常組 24.25±4.89△△ 1.82±0.32 1.28±0.23 0.77±0.10 0.82±0.08模型組 16.12±2.97** 2.36±0.99* 3.57±0.85** 0.52±0.12** 1.18±0.62*二甲雙胍組 20.02±3.62△△ 1.85±0.53△ 2.27±0.72*△△ 0.62±0.10△ 0.72±0.26△△滋膵飲低劑量組 18.93±2.38* 1.76±0.46△ 2.23±0.63*△△ 0.56±0.11** 0.76±0.24△△滋膵飲中劑量組 19.91±3.90* 1.62±0.38△ 2.18±0.65*△△ 0.68±0.17△ 0.64±0.16△△滋膵飲高劑量組 21.16±3.62△△ 1.76±0.43△ 2.12±0.72*△△ 0.69±0.10△△ 0.61±0.26△△

滋膵飲對糖尿病大鼠胰腺組織的影響見圖1。如圖所示正常組大鼠胰島細(xì)胞形態(tài)正常，大小均勻，胰島數(shù)量及島內(nèi)細(xì)胞數(shù)均較多，胞漿充實飽滿；模型組大鼠胰島明顯萎縮，形狀雜亂，邊界模糊，細(xì)胞數(shù)相對減少，胞漿疏松，有的存在空泡；滋膵飲各劑量組大鼠胰島尚小，個別細(xì)胞空泡化，但是形狀已基本規(guī)則，胰島與外分泌部界限比較清晰，胰島細(xì)胞數(shù)目比模型組增多。

圖1 滋膵飲對糖尿病大鼠胰腺組織病理學(xué)改變的影響（HE染色，×400）

3 討 論

糖尿病屬中醫(yī)“消渴”范疇，由飲食不節(jié)、勞累過度所誘發(fā)，主要病機(jī)為氣陰兩虧、燥熱內(nèi)盛［4］。滋膵飲方中山藥補(bǔ)脾肺腎之陰以治消渴，黃芪助脾氣上升、散精達(dá)肺，生地助腎中之陰上潮以潤肺，山茱萸封固腎關(guān)，豬胰子以臟補(bǔ)臟，且能潤肺升水以止渴［5］。

本研究模擬人體糖尿病發(fā)展歷程，建立2型糖尿病大鼠模型［6］，再給予不同劑量的滋膵飲對其進(jìn)行治療，觀察滋膵飲對2型糖尿病引起的糖耐量減低、脂代謝紊亂和胰島病理結(jié)構(gòu)的改善作用。本研究結(jié)果顯示，滋膵飲高劑量組對糖耐量具有較好的控制作用。滋膵飲能顯著升高Ins，降低TC、TG、LDL-C，升高HDL-C，說明滋膵飲確實發(fā)揮了中藥傳統(tǒng)方劑的獨(dú)特優(yōu)勢既能調(diào)節(jié)糖脂代謝紊亂，又可促進(jìn)胰島素分泌。

胰島素分泌不足往往是由胰島β細(xì)胞受損引起［7］，胰腺組織形態(tài)結(jié)果顯示，模型組大鼠其胰島明顯萎縮，形態(tài)結(jié)構(gòu)發(fā)生病理性改變。治療后，滋膵飲組胰島病理結(jié)構(gòu)得到一定恢復(fù)，胰島細(xì)胞形態(tài)更規(guī)則，邊緣更清晰，且隨著劑量升高，胰島形態(tài)更規(guī)則，邊緣更清晰，說明滋膵飲能發(fā)揮修復(fù)胰島組織，增強(qiáng)胰島β細(xì)胞功能的作用。

滋膵飲能促進(jìn)胰島素分泌，改善2型糖尿病大鼠糖耐量，調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝，保護(hù)胰島，其作用機(jī)制與促進(jìn)胰島素分泌、修復(fù)受損的胰島細(xì)胞有關(guān)。

［1］紀(jì)立農(nóng)，陸菊明，郭曉蕙，等.中國2型糖尿病藥物治療現(xiàn)狀與血糖控制的調(diào)查研究［J］.中華糖尿病雜志，2012，4（7）：397-401.

［2］黃美珍.滋膵飲加味治療Ⅱ型糖尿病46例療效觀察［J］.四川中醫(yī)，2002，20（7）：51.

［3］丁云錄，成光宇，朱光澤，等.消渴脂平膠囊治療2型糖尿病高脂血癥實驗研究［J］.長春中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報，2016，32（4）：692-694.

［4］中華中醫(yī)藥學(xué)會糖尿病分會.糖尿病前期中醫(yī)診療標(biāo)準(zhǔn)［J］.世界中西醫(yī)結(jié)合雜志，2011，6（5）：446-449.

［5］王國慶，安金龍，俞仲賢，等.加減滋膵飲聯(lián)合厄貝沙坦治療Ⅲ期糖尿病腎病的臨床觀察［J］.內(nèi)蒙古中醫(yī)藥，2014，33（29）：25-26.

［6］孫曉芳，趙長勇，陳暉，等.高糖高脂飲食加鏈尿佐菌素建立實驗性大鼠2型糖尿病模型［J］.南京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報（自然科學(xué)版），2009，29（6）：797-800，806.

［7］馮覺平，陳繼貴，袁響林，等.氟尿嘧啶對大鼠血糖代謝及胰腺病理結(jié)構(gòu)的影響［J］.中華胃腸外科雜志，2010，13（12）：935-938.