安徽省2016～2017年禽流感免疫抗體定點監測

王軍 周迎春 何長生 王倩 沈艷 王維 （安徽省動物疫病預防與控制中心 230091）

禽流感是由正黏病毒科、流感病毒屬、A型流感病毒引起的禽類烈性傳染病[1]。1978年意大利就有發生禽流感的報道，當時叫真性雞瘟[2]，根據禽流感病毒對易感禽致病性將其分為3類：高致病性—高毒力—主要包括H5和H7；低致病性—中低毒力—H9或其他型；無致病性—無毒力—各種亞型 （從H1～H15）。該病主要侵害禽類呼吸系統、消化系統及神經系統等，產生從無癥狀或溫和癥狀到高度致死性的感染。在世界范圍內，家禽中流行的主要有H5、H6、H7、H9等亞型。H5和H7亞型的某些毒株可以造成禽類很高的發病率和死亡率，被稱為高致病性禽流感病毒，嚴重威脅養禽業的發展[3]，并對公共健康構成重大危害，已引起全球普遍關注。H9亞型禽流感引發家禽的致死率相對較低，但其造成的經濟損失并不亞于高致病性禽流感，而且具有重大的公共衛生學意義[4]。疫苗免疫接種是當前預防和控制禽流感發生的最重要手段，為掌握安徽省禽流感免疫效果，2016～2017年在全省選取5個縣 （市、區）設置固定監測點，開展禽流感免疫抗體定點監測與分析工作。

1 材料與方法

1.1 監測點的選擇

綜合考慮安徽省家禽養殖情況、流通模式及地理環境等特征，以養殖、屠宰、交易為3個主要監測環節，在宣州區、青陽縣、太湖縣3個縣 （區）各選擇4個不同規模的家禽養殖場作為養殖環節的禽流感定點監測點；將寧國市某家禽屠宰場設為家禽屠宰環節的禽流感定點監測點；將長豐縣某畜禽交易市場設為家禽交易環節的禽流感定點監測點。

1.2 樣品采集

將規模禽場、家禽屠宰場及交易市場按照存欄量不同，采用分層隨機抽樣的原理，使用Win Episcope 2.0流行病學分析軟件中估計流行率 （Estimate Percentage）的抽樣方法（預期流行率設為5%，可接受絕對誤差為5%，置信水平為95%）確定監測數量和采樣比例。大型養禽場 （家禽＞100000）每次采集血清樣品100份，中型養禽場 （10000≤家禽≤100000）每次采集血清樣品50份，小型養禽場 （家禽＜10000）每次采集血清樣品35份。家禽屠宰場及家禽交易市場每次采集血清樣品50份。雞翅靜脈采血，每份約2ml，自然凝固析出血清，離心分離后備用。

1.3 實驗器材

單道、8道、12道移液器若干，90°96孔V型微量反應板若干，100ml、500ml量筒，微量振蕩器。

1.4 檢測試劑

禽流感病毒H5亞型血凝抑制試驗抗原 （批號：2016004；2016012）、禽流感病毒H5亞型陽性血清 （批號：2015007；2016003）、禽流感病毒H9亞型血凝抑制試驗抗原 （批號：2015003；2017001）、禽流感病毒H9亞型陽性血清 （批號：2015003；2016003），均由哈爾濱維科生物技術開發公司生產。

1.5 檢測方法與判定標準

1.5.1 方法

參照2016及2017年國家動物疫病監測與流行病學調查計劃指定的方法[5,6]，依據GB/T 18936-2003進行。采用血凝（HA）與血凝抑制試驗 （HI），檢測禽流感免疫抗體。

1.5.2 判定

HI抗體效價≥24判定為合格。存欄禽群免疫抗體合格率≥70%判定為合格。

2 結果

2016～2017年共檢測血清樣品1543份，H5及H9亞型禽流感免疫抗體平均合格率分別為91.83%和90.99%。結果見表1。

由表1可以看出，無論是2016年還是2017年，H5及H9亞型禽流感免疫抗體平均合格率均超過農業部規定的70%的標準，這表明安徽省近兩年禽流感免疫效果總體較好。

對于H5亞型禽流感免疫抗體，所檢測的1543份血清樣品中：養殖場禽血清1344份，合格1257份，免疫抗體合格率93.53%；屠宰場禽血清100份，合格88份，免疫抗體合格率88%；交易市場禽血清99份，合格72份，免疫抗體合格率72.73%。結果見表2。

對于H9亞型禽流感免疫抗體，所檢測的1543份血清樣品中：養殖場禽血清1344份，合格1248份，免疫抗體合格率92.86%；屠宰場禽血清100份，合格84份，免疫抗體合格率84%；交易市場禽血清99份，合格72份，免疫抗體合格率72.73%。結果見表3。

由表2、表3知，交易市場禽的禽流感免疫抗體合格率相對較低，其中2016年交易市場禽的H5亞型禽流感免疫抗體合格率僅為69.39%，略低于農業部規定的標準。

3 討論

3.1 規模養禽場免疫效果較好

根據監測結果，規模養禽場的禽流感免疫抗體合格率最高，表明免疫效果較好，這與養殖戶飼養管理水平較高、重視免疫接種有關。每個養禽場都有各自的免疫程序，平時加強飼養管理、注重強化免疫、定期進行免疫監測，取得了較好免疫效果。

3.2 加大對家禽交易市場的監測力度

交易市場的家禽免疫抗體合格率相對較低，預示有禽流感發生的風險。鑒于當前的活禽交易市場同時存在多個經營檔口，場地狹小，運輸車輛與人員流動頻繁等特點，禽類交易市場已成為禽流感病毒發生重組擴散的高風險區域。市場內多種禽類長期密集接觸，同時處在高濕高熱的環境，再加上消毒不及時、不徹底等，為禽流感病毒在動物之間傳播創造了有利條件，活禽交易市場已成為我國禽流感病毒的重要集散地和疫病傳播環節[7,8]。應加大對家禽交易市場的監測力度，增加監測頻次，加強檢疫工作，定期開展流行病學調查，以控制禽流感的發生和傳播風險。

3.3 繼續做好免疫抗體定點監測工作

抗體監測是檢驗免疫效果，掌握疫情動態最直接、最有效的方法，不僅可以及時了解免疫后的免疫效果、指導制定和調整免疫程序，而且可以提示疫病發生的風險[9]。禽流感疫苗免疫是我國防治禽流感采取的主要措施之一，已在全國范圍內推行。做好禽流感免疫抗體監測工作，可以及時掌握禽群免疫狀態，有效分析評估免疫效果，為禽流感疫情預警預報提供技術支撐。繼續做好定點監測工作，通過定時、定點、長期、持續的監測，做到早發現、早報告、早處理、早控制，可有效防止禽流感疫情的發生。

表1 2016～2017年H5及H9亞型禽流感免疫抗體檢測結果

表2 不同禽別H5亞型禽流感免疫抗體合格率

表3 不同禽別H9亞型禽流感免疫抗體合格率

[1]殷震,劉景華.動物病毒學[M].第二版,北京：北京科技出版社,1997.

[2]趙君和.2016年禽流感的流行特點及防控策略[J].中國畜牧獸醫文摘,2016,32(1):2-3.

[3]王軍,陳曦,周迎春,等.安徽省2014～2015年禽流感免疫抗體集中監測分析[J].中國動物檢疫,2016,33(6):15-17.

[4]蔡擴軍,成進.H9亞型禽流感的危害與防控[J].獸醫導刊,2016(5):22-24.

[5]農業部.關于印發《2016年國家動物疫病監測與流行病學調查計劃》的通知[Z].農醫發〔2016〕11 號,北京：農業部，2016-03-30.

[6]農業部.關于印發《2017年國家動物疫病監測與流行病學調查計劃》的通知[Z].農醫發〔2017〕7 號,北京：農業部，2017-03-14.

[7]賈偉新,廖明.從活禽交易的干預效果看我國禽流感的流行與防控[J].中國家禽,2015,37(22):1-3.

[8]曹藍,陳藝韻,魯恩潔,等.廣州市2015年禽類市場禽流感流行病學監測[J].中國動物檢疫,2016,33(8):8-12.

[9]王新慧,黃軍軍.當前免疫抗體監測工作存在的問題及建議[J].畜禽業,2016(11):35-36.