血漿抗凝血酶Ⅲ和血清IL-6與降鈣素原對判斷克羅恩病活動性的臨床價值

印中鵬，宋令雄，王蘇夢，汪俊軍，王 鋒

0 引 言

克羅恩病是由于環境、遺傳、感染等多種因素共同作用引發免疫功能紊亂后產生的一種慢性肉芽炎癥性疾病，可發生于胃腸道的任意部位?；颊吣c道炎癥反復發作，甚至出現腸道潰瘍和全身癥狀，嚴重影響患者的健康和日常工作和生活，降低患者的生存質量。目前，克羅恩病輔助診斷以及病情動態監測常用的實驗室指標主要包括白細胞計數(WBC)、C反應蛋白、血沉等傳統炎癥標志物，但其特異性和敏感性均不高[1]。血清白介素-6(IL-6)、降鈣素原(PCT)是臨床炎癥反應性疾病診斷的重要指標，相對于傳統的炎癥指標，IL-6和PCT的敏感性和特異性更高。已有研究表明，炎癥性腸道疾病患者外周血IL-6和PCT水平均明顯升高[2]，這提示IL-6和PCT可能用于其疾病活動性的預測[3]。血漿抗凝血酶Ⅲ(AT-Ⅲ)是體內主要的抗凝物質，新近研究發現AT-Ⅲ還具有明顯的抗炎作用，有望成為炎癥性疾病病情監測的新指標[4-5]。有研究表明AT-Ⅲ水平在炎癥性腸病中降低，在活動期時降低更明顯[6]。因此，同時檢測克羅恩病患者體內相關凝血因子和炎癥因子的水平變化，將有助于臨床該類疾病的早期診斷，為疾病的活動性評估提供新的途徑與方法。本文通過檢測克羅恩病患者血漿AT-Ⅲ活性和血清IL-6、PCT水平及相關性，探討其在克羅恩病診斷和活動性評估中的臨床價值。

1 資料與方法

1.1研究對象回顧性分析2015年2月至2016年10月本院普通外科住院的克羅恩病患者62例，納入標準：患者均經臨床病理學和內鏡檢查，參照《2010年世界胃腸病學組織關于炎癥性腸病診斷和治療的實踐指南》[7]。排除標準：臨床資料不全、合并其他感染性疾病或全身感染、合并免疫功能障礙、糖尿病、嚴重心臟疾病或肝臟疾病患者。采用克羅恩病活動指數(Crohn’s disease activity index，CDAI)評價患者的疾病活動性，分值越高，疾病活動性越強，其中CDAI<150分為緩解期，150分≤CDAI≤450分為活動期，CDAI>450分為極嚴重[8-9]?？肆_恩病患者中男41例，女21例，年齡(49.7±15.3)歲，根據CDAI分為兩個亞組：活動組(32例)和緩解組(30例)。對照組為同期來本院體檢者30例，其中男19例，女11例，年齡(46.3±16.1)歲，均為無心肝腎疾病及感染性疾病的健康人?？肆_恩病患者與健康對照組患者的年齡和性別差異無統計學意義(P>0.05)。

1.2試劑和儀器克羅恩病患者入院后采集血樣樣本，血液樣本分別采用分離膠管和枸櫞酸鈉抗凝管采集，血清樣本3000 r/min分離后保存于-70℃。

1.3方法血漿AT-Ⅲ通過凝血分析儀檢測(CS5100 希森美康公司，日本)；血清IL-6和PCT均采用電化學發光法檢測(Roche e601羅氏公司，德國) ；高敏C反應蛋白(hs-CRP)采用免疫比濁法測定(Delta特種蛋白分析儀 希亞克公司，意大利)。

2 結 果

2.1克羅恩病患者與健康對照者血漿AT-Ⅲ和血清PCT、IL-6以及hs-CRP的比較克羅恩病患者血漿AT-Ⅲ活性顯著下降(P<0.001)；血清IL-6水平顯著升高(P<0.001)；血清PCT水平顯著下降(P<0.01)； hs-CRP水平也有明顯降低(P<0.001)。見表1。

表1克羅恩病患者與健康對照組血漿AT-Ⅲ和血清IL-6、PCT、hs-CRP水平的比較

指標對照組(n=30)克羅恩病組(n=62)t值P值AT?Ⅲ(%)84．5±13．270．1±15．12-4．36<0．001IL?6(ng/L)1．2(0．5，3．1)73．55(26．6，113)5．36<0．001PCT(μg/L)0．03(0．02，0．06)0．64(0．15，3．37)3．67<0．01hs?CRP(mg/L)1．7(0．5，3．1)41．29(26．6，113)4．28<0 001

2.2克羅恩病患者活動組和緩解組血漿AT-Ⅲ和血清IL-6、PCT水平的比較與克羅恩病患者緩解組相比，活動組血漿AT-Ⅲ活性顯著下降(P<0.001)，血清IL-6水平顯著升高(P<0.001)，同時，活動組的血清PCT水平(P=0.011)以及hs-CRP水平(P<0.01)也顯著升高。見表2。

表2克羅恩病患者活動組和緩解組血漿AT-Ⅲ和血清IL-6、PCT水平的比較

指標活動組(n=32)緩解組(n=30)t值P值AT?Ⅲ(%)59．45±13．2476．24±15．53-4．67<0．001IL?6(ng/L)65．23(53．3，155．38)29．66(20．5，59．35)4．35<0．001PCT(μg/L)8．4(2．6，19．2)0．29(0．13，1．20)3．230．011hs?CRP(mg/L)49．23(33．3，131．58)13．11(7．15，45．15)2．58<0．01

2.3克羅恩病患者血漿AT-Ⅲ活性與血清PCT、IL-6水平的相關性分析Spearman相關性分析結果顯示，活動組AT-Ⅲ活性與IL-6、PCT、hs-CRP均呈顯著負相關(P<0.05)；緩解組AT-Ⅲ活性則與IL-6、PCT呈顯著負相關(P<0.05)。見表3。

表3不同炎癥反應期克羅恩病患者血漿AT-Ⅲ活性與血清IL-6水平的相關性分析

項目IL?6PCThs?CRPr值P值r值P值r值P值活動組AT?Ⅲ-0．3890．002-0．3170．009-0．2690．035緩解組AT?Ⅲ-0．3080．004-0．2790．021-0．1480．599

3 討 論

克羅恩病屬于慢性非特異性肉芽腫性疾病，原因不明，被認為是遺傳、環境、感染等多種因素引發的腸道免疫功能低下和炎癥病變?？肆_恩病患者常可表現出腹痛、腹瀉、腸梗阻等局部癥狀，也可出現發熱、貧血、營養不良等全身癥狀，隨著疾病發展，患者可出現管腔狹窄、穿孔等嚴重并發癥，以及多臟器的損害，嚴重影響患者的健康狀況，降低生存質量。因此，提高克羅恩病的診治水平十分重要[7-9]。目前克羅恩病的治療方法多樣，但尚無有效的根治方法，患者常病情反復。因此，早期明確克羅恩病病情并及時采取相應的干預措施對改善其療效具有重要意義[10]。

AT-Ⅲ由肝細胞產生，是體內主要的抗凝物質，反映機體抗凝系統功能。近年研究表明，AT-Ⅲ也與炎癥反應相關，具有抗凝和抗炎的雙重作用；臨床研究證實，嚴重炎癥性疾病患者在早期就可出現AT-Ⅲ的活性下降[11]?；顒悠诳肆_恩病患者血漿AT-Ⅲ活性會顯著低于緩解期患者或者正常人血漿AT-Ⅲ活性。這可能與炎癥反應時期，補體激活，凝血因子消耗，同時炎癥反應激活內、外源性凝血途徑，由此產生的凝血酶使AT-Ⅲ出現消耗性的下降[12]，此外中性粒細胞增多，其活化后所釋放的彈性酶亦可使AT-Ⅲ發生降解。炎癥反應期，克羅恩患者血液常呈現高凝狀態[13]，腸道微血栓形成，進而引起腸黏膜壞死，促進潰瘍形成。由于炎癥反應的存在，克羅恩病患者的炎癥-凝血平衡被打破，炎癥物質導致凝血物質及凝血過程異常，凝血級聯反應進而促進了炎癥過程，并形成惡性循壞。

IL-6由T淋巴細胞和巨噬細胞產生，兼備促炎與抗炎兩種生物學功能。一方面，IL-6 對機體多種細胞都具有較為普遍的促炎性作用，在急性炎癥反應期能夠直接參與到炎癥損傷過程中[14]。IL-6能誘導中性粒細胞分泌和增殖，促使內皮細胞通透性增加，炎性細胞透過血管浸潤至腸道黏膜，加重克羅恩病病情。另一方面，IL-6 參與機體免疫反應，誘導特異性抗體的產生，如IL-6 可以刺激漿細胞產生抗體，參與免疫應答，抑制炎癥反應，這些機制與炎癥性腸病的發生密切相關[15]。有研究證實[16]，IL-6可漸進性加重結腸炎癥，使克羅恩病患者并發瘺管、狹窄、穿孔等嚴重并發癥，且克羅恩病活動期IL-6水平明顯高于健康人群。有文獻報道[17]，克羅恩病患者病理活檢標本中的IL-6 水平高于疾病對照組及正常對照組，與內鏡下炎癥分級呈正相關，這提示隨著疾病活動性增加，IL-6 表達水平也逐漸上調，高水平的IL-6 與病情重、預后差有關，IL-6可能是一種重要的評估克羅恩病病情嚴重程度的細胞因子。

PCT主要由甲狀腺C細胞分泌產生，當機體發生嚴重感染以及膿毒癥和多器官功能衰竭時它在血漿中的水平升高。即使機體未發生細菌感染，炎癥反應時期一些腸道釋放細胞因子也可誘導PCT水平升高[18]?？肆_恩病患者活動期易出現管腔狹窄、穿孔、多臟器的損害等并發癥，更加容易發生感染，所以活動期無論是炎癥反應，還是疾病并發感染均可使血清PCT有顯著升高[19-21]。

本研究發現，克羅恩病患者的血漿AT-Ⅲ水平顯著降低，IL-6和PCT水平顯著升高。進一步研究發現，活動組患者 AT-Ⅲ水平更低，而IL-6和PCT水平則更高。AT-Ⅲ、IL-6和PCT均是敏感和特異的炎癥指標，并且在以往的研究中被證實可以在凝血和炎癥兩個系統反應克羅恩病的嚴重程度，因此AT-Ⅲ、IL-6和PCT聯合評估克羅恩病患者的病情有著重要的指導意義。相關性分析顯示，在克羅恩病活動組和緩解組中，AT-Ⅲ與IL-6、PCT存在顯著負相關，并且在活動組中負相關性更高，表明隨著病情嚴重程度的進展，炎癥和凝血異常的相關性更加明顯，進一步證明，凝血功能異常與炎癥反應互相依賴，互相強化，形成惡性循環。綜上所述，三者對克羅恩病的診斷以及病情嚴重程度的評估方面有著重要的意義。

目前評估克羅恩病病情最常用的方法則是通過內鏡和組織學檢查，以及一些影像學檢查，而炎癥是小腸克羅恩病患者出現癥狀和體征的基礎。本研究發現，聯合監測克羅恩病患者AT-Ⅲ、IL-6、PCT水平將同時評估其凝血與炎癥兩個系統，將有助于患者的早期輔助診斷以及病情活動性的評估，并且可以在治療過程中及時監測治療效果，為其早期干預提供指導，盡量減少并發癥，提高患者預后。但是本研究僅通過CDAI評分將克羅恩病患者分為活動組與緩解組進行患者血液AT-Ⅲ、IL-6、PCT水平與疾病活動性分析，而這些血液指標與患者內鏡以及組織學檢查結果的相關性有待進一步研究，以期指導臨床精準評估患者病情。

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