王愛琴1張棟2
(1,山東省畜牧協會250022;2,山東省動物疫病預防與控制中心250022)
鴨瘟又稱鴨病毒性腸炎,是由鴨瘟病毒引起的雁形目鴨科(鴨、鵝、雁)的急性、熱性、敗血性、高度致死性傳染病,主要特征是損傷血管、引起消化道黏膜出血壞死、淋巴器官和實質性臟器出現退行性病變。病鴨臨床表現為體溫升高、雙腿麻痹并排出綠色稀糞及部分鴨頭頸腫大[1]。該病是一種廣泛嗜全身性感染的傳染病,流行廣泛,傳播迅速,發病率和死亡率高,是危害養鴨業最重要的疾病之一,給養鴨業造成巨大的經濟損失[2-3]。
2017年7月,某一養鴨場從外地引進115日齡青年鴨3000只(鴨瘟疫苗已按免疫程序進行免疫),引進后5d內零星傷亡,期間給予抗應激藥物治療,5d后群體發病,發病率約為20%,死亡數量逐漸增加,一周內死亡120多只,應用多種抗生素和中藥治療效果不明顯。
病鴨開始精神不振,頭頸低垂,羽毛蓬亂,翅膀下垂,很快食欲下降,兩腳麻痹無力,不愿走動,叫聲嘶啞,繼而咳嗽,呼吸困難,排白綠色稀糞,后期食欲廢絕,精神萎靡,2~3d后死亡。個別鴨頭部腫大,流淚。
口腔黏膜潰瘍,食道黏膜條斑狀出血,氣管環出血、潰瘍,心肌表面及心冠脂肪有出血點,肌胃潰瘍,肺臟瘀血,直腸泄殖腔出血。其他臟器無明顯病變。
4.1.1 試劑
A型流感病毒通用型熒光RT-PCR檢測試劑盒和新城疫病毒熒光RT-PCR檢測試劑盒購自凱杰生物工程有限公司、鴨瘟病毒熒光PCR檢測試劑盒購自北京生科尚儀科技有限公司、病毒DNA/RNA柱式提取試劑盒均購自北京森康生物技術開發有限公司。
4.1.2 檢測方法
無菌采集病死鴨的氣管、肺臟、病變腸道。將臟器剪碎后,研磨并勻漿,反復凍融4次,4℃,8000r/min離心5min,取上清液分別用DNA/RNA柱式提取試劑盒提取核酸,置于-20℃保存備用。A型流感病毒、新城疫病毒的反轉錄、擴增,鴨瘟病毒的擴增均按試劑盒說明進行操作。

圖1 A型流感病毒、新城疫病毒熒光RT-PCR

圖2 鴨瘟病毒熒光PCR
4.2.1 A型流感病毒、新城疫病毒RT-PCR檢測結果分析
A型流感病毒、新城疫病毒陽性對照Ct值分別為16.437、20.417,均呈S型特異性曲線,陰性對照Ct值均為0,樣品Ct值均為0,如圖1所示,A型流感病毒、新城疫病毒檢測結果均呈陰性,表明樣品未感染上述2種病毒。
4.2.2 鴨瘟病毒PCR檢測結果分析
如圖2所示,鴨瘟病毒陽性對照Ct值為15.57,呈S型特異性曲線,陰性對照Ct值為0,樣品(B、C)Ct值分別為13.91、18.60,這表明該樣品感染了鴨瘟病毒。
4.2.3 結果
根據臨床癥狀、剖檢變化及結合實驗室病毒RT-PCR/PCR檢測結果,可明確該鴨場的發病原因是感染鴨瘟病毒。
該場此次疾病的發生懷疑是由引入帶毒青年鴨導致的,因此在引種過程中要嚴格把好檢疫關。引進后要進行進場檢疫,隔離1~2周后證明無病才能飼養。
一旦發生病情應立即隔離病鴨,同時封鎖、消毒病鴨活動的區域,對所有鴨進行緊急免疫接種。病死鴨要及時妥善處理,做好無害化處理工作。
改善鴨的生長環境,注意通風換氣,保持鴨舍溫度、濕度。飼喂全價營養飼料,同時在飼料中添加中草藥制劑及鴨生長所需的微量元素,以提高鴨免疫力。做好鴨舍環境衛生,每日清掃消毒,定期對器具及周圍環境進行消毒,減少傳染源。
做好飼養管理、環境衛生工作外,還需做好鴨瘟的基礎免疫工作。一般需進行2次免疫接種,分別在7日齡左右、20~25日齡[4]。對發病鴨群,注射抗鴨瘟高免血清對該病治療有積極作用;同時可添加黃芪多糖、VC、電解多維、恩諾沙星等藥物以提高機體免疫力,并防治繼發感染。
[1]張坤,刁有祥,程彥麗,等.鴨瘟病毒強毒株感染SPF鴨后動態病理組織學變J].中國獸醫學報,2013,33(1):9-15.
[2]殷震,劉景華.動物病毒學,2版[M].北京:科學出版社,1997.
[3]程安春,汪銘書,劉菲,等.PCR在鴨瘟臨床診斷和免疫及致病機理研究中的初步應用[J].病毒學報,2004,20(4):364-370.
[4]陳金龍.鴨瘟的診斷與防治措施[J].現代農業科技,2016(11):308.