凹葉厚樸葉的化學(xué)成分研究

張 超，吳錦玉，黃澤豪，吳建國(guó)，吳錦忠，吳巖斌

（福建中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，福建 福州 350122）

中藥厚樸來源于木蘭科植物厚樸（Magnolia officinalis Rehd.et Wils.）和凹葉厚樸（Magnolia officinalis Rehd.et Wils.var.biloba Rehd.et Wils.）的干燥干皮、枝皮及根皮，具有燥濕消痰、下氣除滿的功效［1］。厚樸和凹葉厚樸是多年生落葉喬木，其生長(zhǎng)周期長(zhǎng)，一般要生長(zhǎng)15 a才能剝皮供藥用，其采集方式主要是砍樹剝皮，長(zhǎng)期以來，其資源受到嚴(yán)重的破壞［2］。因此，充分開發(fā)利用厚樸葉資源，可以挖掘厚樸潛在的醫(yī)藥價(jià)值。近年來化學(xué)和藥理研究表明：厚樸葉含有木脂素、黃酮、揮發(fā)油、多糖等化學(xué)成分，具有抗菌、抗氧化、止咳、抗抑郁、舒張血管等藥理作用［3-11］。但目前關(guān)于凹葉厚樸葉的研究報(bào)道較少，本課題組前期從凹葉厚樸葉中分離得到了黃酮類和木脂素類等17個(gè)化學(xué)成分［12-13］，通過對(duì)凹葉厚樸葉進(jìn)一步的研究分析，又從中分離得到7個(gè)化合物，并對(duì)其進(jìn)行了結(jié)構(gòu)鑒定。

1 儀器與試藥

Bruker DRX-400／AV-500型超導(dǎo)核磁共振波譜儀（美國(guó)Bruker公司）；色譜柱硅膠和薄層硅膠GF254（煙臺(tái)江友硅膠開發(fā)有限公司）；Sephadex LH-20（瑞典Pharmacia公司）；反相ODS填料（德國(guó)Merck公司）；其他試劑均為分析純。凹葉厚樸葉于2011年10月采自福建省光澤縣，經(jīng)福建中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院楊成梓教授鑒定為凹葉厚樸（Magnolia officinalis Rehd.et Wils.var.biloba Rehd.et Wils.）的干燥葉。

2 方法與結(jié)果

2.1 提取分離 取干燥凹葉厚樸葉10 kg，用10倍量75%乙醇回流提取2次，每次3 h，合并提取液并減壓濃縮，最后加蒸餾水得到混懸液；依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，濃縮得到不同部位萃取浸膏，其中乙酸乙酯部位浸膏 221 g，正丁醇部位浸膏 399 g。乙酸乙酯部位浸膏經(jīng)硅膠柱（200～300目）色譜，以石油醚-醋酸乙酯（100∶0→0∶100）梯度洗脫，再經(jīng)反相ODS及Sephadex LH-20反復(fù)柱色譜得到化合物 1（22 mg）、化合物 2（32 mg）、化合物3（19 mg）、化合物 4（27 mg）、化合物 5（36 mg）、化合物 6（32 mg）、化合物 7（46 mg）。

2.2 結(jié)構(gòu)鑒定

2.2.1 化合物1 淡黃色羽毛狀晶體（甲醇），1H NMR（500 MHz，MeOD） δ：7.85（1H，d，J＝9.5 Hz，H-4），7.10 （1H，s，H-5），6.76 （1H，s，H-8），6.20（1H，d，J＝9 Hz，H-3），3.90（3H，s，H-11）；13CNMR（125MHz，MeOD） δ：164.3（C-2），112.9（C-3），146.4 （C-4），110.2 （C-5），147.4 （C-6），153.2 （C-7），104.2 （C-8），151.74 （C-9），112.8 （C-10），57.1（C-11）。 以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致［14］，故鑒定化合物1為莨菪亭。

2.2.2 化合物2 黃色針狀結(jié)晶（甲醇），1H NMR（500 MHz，MeOD） δ：7.72（1H，d，J＝2.0 Hz，H-2'），7.62（1H，dd，J＝2.0，8.5 Hz，H-6'），6.87（1H，d，J＝8.5 Hz，H-5'），6.38（1H，d，J＝2.0 Hz，H-8），6.17（1H，d，J＝2.0 Hz，H-6）；13C-NMR（125MHz，MeOD）δ：158.5（C-5），137.5（C-3），177.6（C-4），149.1（C-2），99.5（C-6），165.8（C-7），94.7（C-8），162.8（C-9），104.8（C-10），124.5（C-1'），116.2（C-2'），146.5（C-3'），148.3（C-4'），116.5（C-5'），121.9（C-6'）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致［15］，故鑒定化合物2為槲皮素。

2.2.3 化合物3 無色針狀晶體（甲醇），1H NMR（400 MHz，MeOD） δ：7.52（1H，d，J＝15.9 Hz，H-7），7.02（1H，d，J＝2.1 Hz，H-2），6.93（1H，dd，J＝2.0，8.2 Hz，H-6），6.76（1H，d，J＝8.2 Hz，H-5），6.24（1H，d，J＝15.9 Hz，H-8）；4.20（2H，q，J＝7.1 Hz，OCH2CH3），1.30（3H，t，J＝7.1 Hz，OCH2CH3），13CNMR（100MHz，MeOD） δ：128.0（C-1），115.4（C-2），147.1 （C-3），147.0 （C-4），116.7 （C-5），123.1 （C-6），149.8（C-7），115.5（C-8），169.6（C-9），61.6（C-1'），14.9（C-2'）。 以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致［16］，故鑒定化合物3為咖啡酸乙酯。

2.2.4 化合物4 無色晶體（甲醇），1H NMR（400 MHz，MeOD）δ：7.54（2 H，m，H-2，6），6.83（1 H，d，J＝8.7 Hz，H-5），3.88（3H，s，3-OCH3），13C-NMR（100 MHz，MeOD）δ：125.5（C-1），116.1（C-2），148.96（C-3），152.9（C-4），114.1（C-5），123.4（C-6），170.3（C-7），56.6（3-OCH3）。 以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致［17］，故鑒定化合物4為香草酸。

2.2.5 化合物5 白色針晶（甲醇），1H NMR（400 MHz，MeOD） δ：8.06（1H，dd，J＝6.2，1.6 Hz，H-4），7.93 （1H，s，H-2），7.42（1H，dd，J＝6.3，1.4 Hz，H-7），7.17（2H，m，H-5，H-6）；13C-NMR（100 MHz，MeOD） δ：133.6（C-2），109.1（C-3），122.3（C-4），122.6 （C-5），123.8 （C-6），113.1 （C-7），138.5 （C-8），127.8（C-9），169.5（C-10）。 以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致［18］，故鑒定化合物 5為 1H-indole-3-carboxylic acid。

2.2.6 化合物6 黃色晶體（甲醇），1H NMR（400 MHz，MeOD） δ：7.96（1H，d，J＝5.9 Hz，H-2），6.32（1H，d，J＝2.1 Hz，H-8），6.19（1H，d，J＝2.1 Hz，H-6），6.18（1H，d，J＝6.0 Hz，H-3），13C-NMR（100 MHz，MeOD）δ：183.6（C-4），166.4（C-7），163.7（C-5），160.2（C-9），158.3（C-2），111.9（C-3），106.8（C-10），100.6（C-6），95.4（C-8）。 以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致［19］，故鑒定化合物 6 為 5，7-dihydroxychromone。

2.2.7 化合物7 白色片狀結(jié)晶（氯仿），1H NMR（400 MHz，CDCl3） δ：2.35（2H，t，J＝7.4 Hz，CH2-2），1.63（2H，m，CH2-3），1.26～1.30（26 H，brs，CH2×13），0.88（3H，t，J＝6.7 Hz，CH3-17）。 以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致［20］，故鑒定化合物7為正十七酸。

3 討論

本課題所分離鑒定的7個(gè)化合物均為首次從凹葉 厚 樸 葉 中 分 離 得 到 ，其 中 莨 菪 亭［21］、槲 皮 素［22－23］等具有抗癌、抗炎等藥理活性。我省厚樸種植面積約10萬畝，其中光澤縣約有5萬畝。厚樸葉為厚樸植物的每年落葉，其資源十分豐富，研究凹葉厚樸葉的化學(xué)成分，為其資源綜合開發(fā)利用提供依據(jù)。