PON2與LT在兒童睡眠呼吸暫停綜合征中的變化分析

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(1.西安市兒童醫院呼吸二科,陜西 西安 710004;2西安交通大學醫學院第二附屬醫院普通外科，陜西 西安 710004)

兒童睡眠呼吸暫停綜合征(obstructive sleep apnea syndrome，OSAS)是睡眠中發生的氣道阻塞或呼吸抑制，是睡眠疾病中發病率最高的一種[1]。OSAS對機體的危害主要是睡眠中發生的低氧血癥和睡眠結構的破壞，極易造成心腦血管并發癥，甚至誘發猝死，嚴重威脅兒童生長發育和身心健康[2]。睡眠呼吸暫停誘發的間歇性低氧通過相關細胞因子促發應激反應和炎癥反應對機體產生損傷[3]。對氧磷酶2(serum paraoxonase 2，PON2)和白三烯(leukotriene，LT)[4]是目前呼吸系統炎性疾病的研究節點之一。本研究從細胞因子層面入手，探索兒童OSAS間歇性低氧反應因子參與呼吸功能損傷的分子生物學機制。

1資料與方法

1.1研究對象

選擇2015年2月至2016年6月于西安市兒童醫院初診且未經治療，并依照美國睡眠學會(American Academy of Sleep Medicine，AASM)診斷標準[5]確診為OSAS患兒(OSAS組)，及同期正常體檢的兒童(對照組)，排除合并其他感染性疾病，排除合并生理解剖畸形。本研究經本院倫理委員會批準并患兒家長知情同意。

1.2研究方法

1.2.1睡眠的監測

根據AASM Ⅰ級標準進行多導睡眠儀檢查(ploysomnography，PSG)，記錄腦電、眼電、頦肌電、心電、呼吸氣流、呼吸運動、動脈血樣飽和度、睡眠體位、腿動情況。多導睡眠儀采用Standard PSG configuration(E Series，Compumedics Limited，Australia)，由專業醫師全程監視。根據北京兒童醫院睡眠中心推薦的兒童OSAS診斷標準，呼吸暫停為呼吸停止≥5秒或2個呼吸周期、呼吸暫停低通氣指數(apnea hypopnea index，AHI)≥1次/小時；低通氣指口鼻氣流振幅較基線(氣流停止或下降之前至少2分鐘或3個呼吸周期的平均呼吸幅度)下降50%或持續2個呼吸周期以上，伴血氧飽和度降低3%以上或覺醒；AHI≥5次/小時可診斷為兒童OSAS，根據AHI發生情況對OSAS進行分級[6]：AHI為5～15是輕度，AHI為16～30是中度，AHI>30為重度。

1.2.2對氧磷酶2和白三烯的測定

檢測前24小時取患兒空腹靜脈血2mL，低溫離心，去除細胞成分后即刻-20℃快速冰凍保存留樣；多導睡眠監測后，睡眠、基礎代謝狀態下，采用相同的方法采樣、保存，避免反復凍融。酶聯免疫吸附試驗定量分析PON2和LT的表達水平。

1.3統計學方法

2結果

2.1一般情況

依據臨床診斷、癥狀緩解情況將研究對象分為正常對照組、OSAS(睡眠狀態)組、OSAS(清醒狀態)組，其中OSAS(睡眠狀態)組根據AHI分為輕度組和中重度組。

睡眠呼吸暫停綜合征患兒32例，男18例，女14例，平均年齡為8.35±2.12歲；輕度組患兒17例(男女比例為9:8)，平均年齡為8.14±1.89歲，中重度組患兒15例(男女比例為8:7)，平均年齡為7.41±2.01歲。同期正常對照體檢兒童18例(男女比例為5:4)，平均年齡為8.13±1.79歲。

2.2各組PON2和LT血清水平表達情況

OSAS(睡眠狀態)組中的輕度組和中重度組分別與正常對照比較，PON2和LT的表達水平差異均有統計學意義(t值分別為1.56、1.60；1.41、1.58，均P<0.05)；OSAS(睡眠狀態)組整體與OSAS(清醒狀態)組比較，PON2和LT的表達水平差異均無統計學意義(t值分別為1.79、1.81，均P>0.05)。OSAS(清醒狀態)與正常對照組相比，PON2和LT表達水平比較差異均有統計學意義(t值分別為1.45、1.60，均P<0.05)，見表1。

表1 各組PON2、LT血清表達水平Table 1 Serum expression levels of PON2 and LT in each

注：^表示正常對照組與OSAS(清醒狀態)組的比較；*表示正常對照組與OSAS(睡眠狀態)組中輕度組及中重度組的比較；△表示OSAS(睡眠狀態)組整體與OSAS(清醒狀態)組的比較。

2.3 PON2、LT與AHI分級的相關性

與正常對照組相比，OSAS(睡眠狀態)組PON2和LT的F值分別為2.39、2.31，均P>0.05；與OSAS(清醒狀態)組相比，OSAS(睡眠狀態)組PON2和LT的F值分別3.12、3.14，均P>0.05，不能認為各對比組間所比較的均值相同。根據SNK-q法進行組內兩兩差異性檢驗分析，與正常對照組比較，OSAS(睡眠狀態)各組間存在差異，而OSAS(清醒狀態)組與OSAS(睡眠狀態)整體組間不存在差異。Spearman相關性分析顯示PON2、LT與AHI分級均呈正相關(r值分別為0.78和0.66，均P<0.05)

3討論

從生物進化學角度觀察，睡眠是一種高度保守的、具有明顯生物節律性特征的生命基本活動。雖然不同個體間存在一定的差異，但睡眠的節律共同特征非常明顯。有研究表明，OSAS不僅僅是睡眠節律紊亂、睡眠效率降低，更是多種細胞及細胞因子節律性變化，并共同參與的間歇性低氧狀態下的非特異炎癥反應[8]。本實驗觀察到PON2、LT在OSAS患兒和正常對照兒童中存在差異，且PON2、LT在OSAS患兒輕度組、中重度組也存在差異。OSAS病理生理學效應機理為上氣道結構性/功能性改變，產生氣道高反應梗阻，降低呼吸效率，引發氣道低氧反應及相關并發癥。氣道上皮的炎性損傷-修復平衡的失調導致氣道重塑，促進了疾病的進展，惡化了臨床表現。

炎性細胞活躍及由炎性細胞分泌的炎性調節因子和相關的細胞因子在氣道重塑中起著決定性的作用，其相關信號通路的表達異常和相關介質表達量的變化在氣道重塑尤為突出[9]。諸多細胞及細胞因子在進展期和緩解期呈現明顯的差異性表達，此即應為間歇性低氧炎性反應引發細胞損傷及功能障礙的分子生物學基礎。血清中炎癥因子水平升高可作為炎癥細胞反應的直接反映[10]；生理性生物節律的破壞與病理性炎性因子釋放、激活互為因果，形成惡性循環，導致氣道結構功能障礙引發器質性病變[11]。因此認為間歇性低氧炎癥因子介導的氣道損傷、重塑與功能障礙是兒童OSAS的診療重心，PON2、LT等炎癥因子對于該疾病的診斷、分級有著重要的指示作用。

OSAS會嚴重影響呼吸功能，使患兒氣道發生病理性改變、順應性降低，阻力增加[12]。氣道炎癥損傷和損傷后再修復是其重要的兩個病理學過程[13]。間斷性低氧血癥誘發氣道炎性反應，最終因其加重從而導致呼吸功能障礙，表現為氣道結構改變，氣道動力學遲滯，自身調節能力喪失，其病理過程涉及氧化應激反應和細胞炎性反應失衡，氣道結構失衡，導致病情惡化，手術治療效果不佳。

氧磷酶(PON)[14]和LT[15]作為兒童OSAS的關鍵分子[16]，與兒童OSAS的臨床診斷分級存在明顯的相關性，其介導的相關通路對于兒童OSAS進展及預后有著重要的意義，逆轉間歇性低氧所致的氣道炎性反應、重塑及功能損害對于治療OSAS有著深遠的意義。

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[專業責任編輯：侯 偉]