余燕琪,邊慶華
快速病理診斷中,冷凍切片發(fā)揮著十分重要的作用,冷凍切片的質(zhì)量能夠直接影響到診斷的快速性和準確性。但是干擾冷凍切片質(zhì)量的因素較多,其中一項最重要的因素就是冷凍切片的固定液選擇,其對冷凍切片的HE染色質(zhì)量有著十分重要的影響[1]。因此為了選擇出最佳的固定液,本次研究針對52例冷凍組織病理切片分別采用了4種不同的固定液進行固定,并對所有切片進行HE染色,查看其染色效果。
1.1臨床資料選擇本院2016年臨床科室術(shù)中送檢的52例新鮮組織參與研究,其中共有36例惡性病變組織,16例良性病變組織,組織來源主要包括甲狀腺、乳腺和肺。
1.2方法將新鮮的組織制成切片,切片制作使用的儀器為德國Leica CM1950恒冷切片機。隨后準備好實驗需要使用的4種固定液,分別是丙酮、95%乙醇、AAF液和改良AAF液。其中AAF液是由15 m1 40%甲醛、80 m1 95%乙醇和5 m1冰醋酸構(gòu)成,改良AAF液則是由15 m1福爾馬林、40 m1 95%乙醇、42 m1苦味酸飽和95%乙醇液、3 m1冰醋酸、0.2 m1 Triton構(gòu)成。
使用OCT冷凍包埋劑將新鮮的組織塊進行包埋,隨后放入冷凍切片機,確保組被冷凍至合適的硬度,隨后進行組織切片處理,切片厚度為4μm,每個標本需要進行4次切片,以形成4張切片,隨后將切片放入4種不同的固定液中,并對切片進行HE染色,染色完成后將切片放置顯微鏡下進行觀察。
采用丙酮固定液進行固定的切片,在顯微鏡下表現(xiàn)出不清晰的組織結(jié)構(gòu),細胞核存在明顯的收縮現(xiàn)象,細胞核和細胞質(zhì)的染色效果較差,著色不鮮艷;……