晚期肺鱗癌FOXM1表達水平與臨床病理特征及吉西他濱化療療效的相關性

張琰 王強 單莉（通訊作者）

（新疆醫科大學第三臨床醫學院肺內科一病區 新疆 烏魯木齊830011）

非小細胞肺癌（non-smallcelllung cancer，NSCLC）是世界范圍內病死率最高的惡性腫瘤。近年來，NSCLC的發病率呈增長趨勢，手術是最有效的治療手段[1]。NSCLC的主要病理類型包括肺腺癌和肺鱗癌，其中肺鱗癌約占20%～30%,NSCLC在疾病早期較難被發現，而進展期的NSCLC患者5年的生存率小于15%[2]。不同于肺腺癌在各個分子靶向藥物中取得的突破性進展，晚期肺鱗癌的治療效果遠遠不如腺癌[3]。以吉西他濱、紫杉類藥物為主的化療方案是目前治療肺鱗癌的主要方案，但化療效果存在個體差異。FOXM1作為FOX轉錄因子家族中的重要成員之一，在哺乳動物器官的發育、細胞的分化和增殖中發揮著極為重要的作用[4]，FOXM1具有刺激細胞增殖的作用，故其對于惡性腫瘤的形成及惡化中具有非常重要的意義。本研究探討晚期肺鱗癌FOXM1表達水平與臨床病理特征及吉西他濱化療療效的相關性

1.資料與方法

1.1 一般資料

收集新疆醫科大學附屬腫瘤醫院2012年—2014年經組織病理證實為肺鱗癌患者105例進入本研究，均行表皮生長因子受體基因檢測證實為野生型。組織學分型、分級采用2004年世界衛生組織公布肺惡性上皮性腫瘤組織分類，TNM分期采用國際肺癌研究學會（IASLC）2009年第7版分期。105例患者中男64例，女41例；年齡35～72歲，中位年齡54歲；病理類型均為鱗癌；分期為IIIB～IV期，IIIB期46例，IV期59例；淋巴結轉移64例，無淋巴結轉移41例；病理分級高中分化55例，低分化50例；有吸煙史64例，無吸煙史41例。

1.2 治療方法及療效評價

病人均采用吉西他濱1000mg/m2，第1天和第8天靜點，卡鉑注射液按照AUC=5計算，于第1天靜點。每21天為1周期，每2周期復查CT進行療效評價，療效評價按照實體瘤療效評價標準（RECIST）1.1版進行。分為完全緩解（CR）、部分緩解（PR）、疾病穩定（SD）及疾病進展（PD）。客觀有效率（ORR）是指CR和PR患者占所有患者的比率。無進展生存時間(PFS)是指腫瘤患者從接受化療開始到觀察到疾病進展或者發生因為任何原因死亡的這段時間。

1.3 免疫組化染色

選取石蠟標本進行4um連續切片，然后行免疫組化染色，步驟參考試劑盒說明書。用已知的陽性切片作為陽性對照，PBS代替一抗作為陰性對照。FOXM1蛋白的陽性表達主要表現為細胞核內呈現棕黃色或棕褐色顆粒，同時細胞胞漿內也可呈現少量棕黃色顆粒，因此以細胞核或細胞漿內出現棕黃色顆粒為陽性細胞的判斷標準。

1.4 FOXM1表達檢測結果的判斷標準

每例標本選擇5個高倍視野，根據細胞質染色的程度和陽性染色細胞百分比進行綜合評分。細胞質染色程度評分標準：不著色為0分，淡黃色為1分，黃色為2分，棕褐色為3分。陽性染色細胞百分比評分標準：陽性細胞小于1%為0分，1%～10%為1分，11%～50%為2分，＞50%為3分。染色程度評分與陽性染色細胞百分比評分的乘積大于或等于4分為FOXM1陽性表達，0～3分為FOXM1陰性表達。

1.5 統計學處理

采用SPSS19.0統計軟件進行數據處理及統計學分析，計數資料以例數或百分率表示，組間比較采用χ2檢驗，無進展生存期（PFS）的比較采用Kaplan-Meier法。以P＜0.05為差異有統計學意義。

2.結果

2.1 免疫組化結果

FOXM1蛋白定位于細胞質或細胞核，呈棕黃色或棕褐色顆粒。在105例患者中，陽性表達47例，陰性表達58例，陽性表達率44.8%（47/105）。詳見圖1和圖2。

2.2 FOXM1蛋白的表達與晚期肺鱗癌患者臨床病理特征的關系：FOXM1蛋白的表達與晚期肺鱗癌患者的年齡、性別、分期及吸煙史無關（P＞0.05）；FOXM1蛋白的表達與晚期肺鱗癌患者腫瘤分化程度、淋巴結轉移狀態有關（P＜0.05）。詳見表1。

2.3 FOXM1蛋白的表達與吉西他濱方案化療療效的關系

所有患者一線均選用吉西他濱聯合卡鉑方案，FOXM1蛋白表達陽性患者有效率低于FOXM1蛋白表達陰性的患者見表2；FOXM1蛋白表達陽性患者PFS短于FOXM1表達陰性患者（P＜0.05）見圖3。

圖1 免疫組化檢測肺鱗癌組織中FOXM1的陽性表達

圖2 免疫組化檢測肺鱗癌組織中FOXM1的陰性表達

表1 FOXM1蛋白的表達與晚期肺鱗癌患者臨床病理特征的關系

表2 FOXM1蛋白的表達與晚期肺鱗癌患者一線化療療效的關系

圖3 FOXM1蛋白表達與患者PFS的關系

3.討論

肺癌為全球范圍內病死率最高的惡性腫瘤，迄今為止，肺癌患者的總體5年生存率依然處于較低水平，僅為15%左右，造成這種情況是由于大部分患者在確診時已為晚期病例，采用放化療等治療手段效果不理想之故[5，6]。FOXM1作為FOX轉錄因子家族的主要成員之一，在細胞周期特異性基因的控制、細胞增殖與分化以及器官的發育等一系列生理進程中擔當著重要的地位。最近幾年的研究顯示，FOXM1具有刺激細胞增殖的作用，所以其針對惡性腫瘤的產生和進展具有非常重大的意義。大量研究結果顯示，在多種實體惡性腫瘤組織中均發現了FOXM1呈高表達這一情況。由于FOXM1參與了對多種腫瘤生長的調控，目前關于FOXM1表達的差異與晚期肺鱗癌吉西他濱化療的療效的關系鮮有報道。本部分研究中我們主要應用免疫組化的方法檢測晚期肺鱗癌患者中FOXM1表達情況，研究其與晚期肺鱗癌患者臨床病理參數及使用吉西他濱方案化療療效的關系，為評估晚期肺鱗癌患者預后以及吉西他濱方案化療的療效提供新的理論依據。

本研究中，FOXM1蛋白定位于細胞質或細胞核，呈棕黃色或棕褐色顆粒。在105例患者中，陽性表達47例，陰性表達58例，陽性表達率44.8%（47/105）。

FOXM1蛋白的表達與晚期肺鱗癌患者的年齡、性別、分期及吸煙史無關；FOXM1蛋白的表達與晚期肺鱗癌患者腫瘤分化程度、淋巴結轉移狀態有關。FOXM1蛋白表達陽性患者化療有效率25.5%，低于FOXM1蛋白表達陰性的患者的有效率44.8%；FOXM1蛋白表達陽性患者PFS為2.8個月，短于FOXM1表達陰性患者4.1個月。

FOXM1作為一種增殖因子，大量研究結果表明，FOXM1與惡性腫瘤發生的調控進程相關，FOXM1在NSCLC組織中往往表現為過度活化，與NSCLC的產生以及惡性化過程直接有關，同時還能影響患者預后，故其對于惡性腫瘤的形成及惡化中具有非常重要的意義。有學者選用免疫組化方法對80例NSCLC組織以及癌旁相應正常組織中FOXM1蛋白的表達進行檢查，觀察到的結論為結論顯示FOXM1在中低分化的鱗癌中的表達呈陽性[7]。類似的結論在本研究中同樣得到了證實。最近幾十年來，醫學工作者們對于年齡、性別、臨床分期、病理類型、血清癌胚抗原（carcino-embryonicantigen，CEA）水平、一般狀況評分、初始治療反應、化療方案、放療劑量、原發腫瘤大小、血清乳酸脫氫酶含量等臨床病理參數與非小細胞肺癌化療的療效是否存在相關性進行了大量的探索，旨在尋找出某些規律，從而為非小細胞肺癌的化療能夠供新的分子標志物，從而開辟新的治療方向。

FOXM1表達程度的異常升高對惡性腫瘤的發生具有促成作用，同時還可以使諸多的惡性腫瘤的臨床期別增高、浸潤及轉移的范圍擴大、淋巴轉移可能性大、從而使得療效和預后均削弱。因而可得出此結論，對FOXM1在惡性腫瘤組織中表達的檢驗，可以為腫瘤的診斷、醫治與預后提供重要的根據。

FOXM1在對惡性腫瘤生長的調控過程中發揮了重要作用，且目前已有大量研究證實其與NSCLC患者的預后之間存在密切聯系，但迄今為止有關FOXM1表達的差異與晚期肺鱗癌患者使用吉西他濱方案化療療效之間關系的研究依然較少。在腫瘤的增殖進程中細胞信號通路傳導和其余生物學路徑均可成為NSCLC預防和治療的新靶點，有一部分研究著力于以FOXM1為靶點探究NSCLC醫治的新策略。我們希望隨著臨床研究的深入發展及探索，以期望能夠為晚期肺鱗癌的臨床治療指明新的方向。

綜上所述，本研究FOXM1作為科研對象檢測其在晚期肺鱗癌患者癌組織中的表達，剖析其與該部分人群患者病理參數、化療療效的相關性。結論顯示FOXM1在大部分患者組織中表現為高表達狀態，與晚期肺鱗癌患者的腫瘤分化程度、淋巴結轉移狀態有關，同時還與吉西他濱化療的療效相關，因此FOXM1有希望作為NSCLC化學治療的靶標。但FOXMl是如何發揮促進轉移、影響預后作用的仍需要進一步的深入研究。

【參考文獻】

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