草莓組培脫毒技術(shù)的分析與應(yīng)用研究

莊瑩

福建由于受季風(fēng)環(huán)流和地形的影響，地處亞熱帶海洋性季風(fēng)氣候，熱量豐富，而且全年雨水量充沛，日照時間長，是草莓種植的理想?yún)^(qū)域。因此，福建的草莓種植范圍廣、種類多。但由于受到病毒的影響，果農(nóng)生產(chǎn)中的草莓有可能出現(xiàn)滯銷的情況。為解決這一問題，本文將通過詳細(xì)的介紹草莓的組培脫毒技術(shù)，并對草莓的育苗過程進(jìn)行分析，以促進(jìn)果農(nóng)快速繁殖并培育出大量的優(yōu)質(zhì)草莓品種，滿足市場的需求，增加收益。

1 草莓組培脫毒技術(shù)的具體操作過程

1.1 材料準(zhǔn)備與實驗過程

1.1.1 組織培養(yǎng)基的準(zhǔn)備

草莓是多年生草本植物，可利用其匍匐莖分株繁殖，所以采用草莓莖芽作為培養(yǎng)材料。用于草莓組培脫毒技術(shù)的材料選擇福建的主要栽培品種的法蘭地等作為供試材料，并在初夏時節(jié)的晴天午后選出生長茂盛、匍匐莖粗實，且經(jīng)檢驗沒有病蟲害侵蝕的長勢良好的草莓株苗作為外植體，保留6厘米左右的長度，置于塑料袋中冷藏后備用。

用草莓莖培養(yǎng)株苗進(jìn)行誘導(dǎo)分化的基本的組織培養(yǎng)基為MS，并在此基礎(chǔ)上加入6-BA0.5mg/l、NAA0.2mg/l、蔗糖30g/l、瓊脂粉6.5g/l，PH值保持在5.8～6.0之間，讓草莓莖在滅菌后有一個適宜的生長環(huán)境。

1.1.2 外植體材料的消毒處理

草莓株苗選好后，為防止日后的病毒感染，要對葉苗進(jìn)行嚴(yán)格的清洗，先用流動的自來水反復(fù)清洗莖芽，瀝干水分，進(jìn)行消毒滅菌。首先要將匍匐莖頂部的大葉子去掉，在濃度為75%的酒精中浸泡30秒后，再放入5～10%次氯酸鈉溶液中15～30秒，做消毒處理，最后用無菌水（裝幾瓶清水置于高壓鍋內(nèi)在120℃、100 132.5pa的溫度條件下進(jìn)行滅菌15分鐘左右，可生成無菌水）進(jìn)行反復(fù)沖洗5次以上即可。

1.1.3 草莓幼苗的誘導(dǎo)、分化及繁殖

運(yùn)用專業(yè)的雙筒解剖鏡先將被消毒過的草莓株苗的葉子從外面一層一層的進(jìn)行剝掉，直至露出全部的頂部半圓組織為止。然后截取大小長度約為0.5毫米左右的莖尖嫁接到0.5mg/lBA的MS培養(yǎng)基上進(jìn)行幼苗的誘導(dǎo)和分化。接種后，一定要保證光照條件，調(diào)節(jié)好光照強(qiáng)度，保證光照時間長達(dá)14小時。并且培育環(huán)境的溫度不宜超過26℃。待綠芽長出后，再將誘導(dǎo)出的新的草莓苗進(jìn)行轉(zhuǎn)瓶，調(diào)整培養(yǎng)基的濃度，再一次的分化與誘導(dǎo)。二次誘導(dǎo)的過程中，芽團(tuán)要分化的更細(xì)致一點，株苗一組不宜超過5～6株，誘導(dǎo)周期為30天，后轉(zhuǎn)入增殖培養(yǎng)。

1.1.4 擴(kuò)大繁殖規(guī)模

經(jīng)反復(fù)多次的誘導(dǎo)、分化及繁殖，在每一次進(jìn)行轉(zhuǎn)苗的過程中，應(yīng)及時觀察幼苗的葉子是否有損傷并進(jìn)行去除，保證繁殖的幼苗無病毒感染。并在每一個階段都做好及時的清查工作，防止幼苗發(fā)生病變，更好的保證規(guī)模的擴(kuò)大和幼苗繁殖的茂盛。

1.1.5 生根后進(jìn)行移植栽培

將經(jīng)過多次增殖培養(yǎng)后的草莓幼苗進(jìn)行仔細(xì)的挑選，將那些出苗優(yōu)良，長勢健壯，長度高于3厘米的幼苗放于生根培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，待到兩個星期后根系形成后，再移入專門的草莓種植基地進(jìn)行移植栽培。這樣即保證草莓的成活率，又培育出脫毒的幼苗，保證后期的生長與管理。

1.2 實驗結(jié)果與分析

1.2.1 消毒時間的不同和接種部位的不同對于草莓出芽及分化的影響

通過實驗不同的接種部位，得出：匍匐莖芽接種上端部位的成活率要高于中部，中部高于下部，究其原因主要是由于匍匐莖芽上端的莖芽的組織生長較為茂盛，長勢越往下越次。此外，消毒時間的不同對于草莓出芽率也有不同的影響。經(jīng)過兩次消毒的外植體，出芽率越高，說明出芽率受到病毒感染的影響較大，對草莓的生長不利。因此，在對草莓的組培脫毒技術(shù)上下功夫?qū)τ诓葺姆N植有重要的影響。

1.2.2 匍匐莖芽和莖尖誘導(dǎo)分化的過程分析

將匍匐莖芽和莖尖分別接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基上，發(fā)現(xiàn)莖芽變化和生長的時間要快于莖尖的。莖芽3天變綠，莖尖兩周左右才能發(fā)生變化。在誘導(dǎo)培養(yǎng)基上培養(yǎng)成功后移栽到增殖培養(yǎng)基地后，變化的幅度更加明顯。匍匐莖芽20天左右長出小芽，30天發(fā)育為幼苗，莖尖發(fā)芽的時間較長，出芽較為緩慢。大概需要60天左右。

2 未來草莓的脫毒技術(shù)應(yīng)用研究

病毒在草莓植株體內(nèi)的分布是不均勻的，病毒的數(shù)量隨著草莓種植數(shù)量和植株部位而發(fā)生不同，對草莓的生長和繁殖產(chǎn)生不良的影響。為保證和提高草莓的存活率和良好的長勢，保證草莓的質(zhì)量和數(shù)量，必須大力提高草莓的脫毒技術(shù)。莖尖分生組織培養(yǎng)脫毒技術(shù)是目前應(yīng)用最為廣泛的草莓脫毒技術(shù)。當(dāng)前，由于草莓的種植范圍和推廣速度不斷擴(kuò)大，進(jìn)行草莓種植時受到病毒的感染比較高。因此，需要配套比較完善的脫毒技術(shù)做支撐。但是，由于組培試管幼苗不能直接用于草莓的生產(chǎn)和種植，必須在進(jìn)行不停的繁殖后再進(jìn)行推廣，影響草莓的生長周期，造成草莓種植的成本增加。因此，為解決這個問題，在未來應(yīng)該將研究的重點放在無病毒苗木繁育體系的建立上。政府應(yīng)幫助從縣、鄉(xiāng)、村三級建立專門脫毒苗生產(chǎn)基地，降低生產(chǎn)成本，形成規(guī)模化經(jīng)營。這樣才能大范圍的繁殖出優(yōu)質(zhì)的草莓幼苗，保證草莓的優(yōu)良品種。

總之，草莓的組培脫毒技術(shù)是保證草莓不受病毒侵染、提高草莓產(chǎn)量和質(zhì)量的重要技術(shù)。隨著草莓的市場需求不斷擴(kuò)大，福建又處于草莓生長和種植的大范圍區(qū)域。為保證福建草莓在市場上的占有率，必須從培育期開始重視對于草莓的脫毒技術(shù)。但由于目前的脫毒技術(shù)還不能完全保證草莓在整個生長期免受病毒的侵害，必須在未來的研究中將更多的精力放在研究無病毒苗木的體系建立上。

（作者單位：362000福建省泉州市農(nóng)業(yè)學(xué)校）