成都市58650名婦女宮頸人乳頭狀瘤病毒HPV6/11，HPV16/18感染狀況研究

張俊英,楊叔哲，鄧 耀，賀葦軍

(成都市婦女兒童中心醫院 檢驗科，四川 成都610031)

人類乳頭狀瘤病毒(HPV)是一種小分子雙鏈DNA病毒，對人皮膚、黏膜有高度親嗜性。目前，已經鑒定出的HPV約有150種亞型，根據其致病性大小分為低危型和高危型。低危型HPV6和HPV11致尖銳濕疣最主要的基因型，尖銳濕疣治愈后容易復發，隨著病程遷延，復發次數增多[1]，尖銳濕疣患者也可能導致癌變；高危型中的HPV16、18在世界范圍內始終是引起宮頸癌變的最重要的亞型。HPV16在感染率和致病率上均占有絕對優勢，被認為具有完全的細胞轉化功能和致瘤性[2]；雖然HPV18在國內的檢出率不高，但HPV18感染者并發高危亞型HPV的持續或反復感染已被確認為宮頸癌發生的最主要原因。宮頸癌是威脅到女性生命的重要殺手，篩查和疫苗是防治宮頸癌的主要手段[3]。我國對于宮頸癌的篩查缺乏完全統一的方案，疫苗在我國大陸地區還沒有普及，本文力求從大量的患者中尋找威脅女性健康的重要兩類基因型HPV(6/11)和HPV(16/18)的感染情況、感染模式及其年齡特點，旨對宮頸癌的篩查和以后相關疫苗的使用起到一定的作用。本文標本來自于2012年6月至2016年5月成都地區58650例女性宮頸脫落細胞，采用亞能生物公司試劑盒檢測出人乳頭瘤病毒基因分型23型，其中HPV 18種高危亞型和5種低危亞型，本文重點研究其中的HPV(6/11)和HPV(16/18)，結果如下。

1 資料與方法

1.1一般資料同期來我院做孕前檢查或常規體檢女性，年齡13-81歲，平均年齡34.62歲，按年齡分為<20歲、20-29歲、30-39歲、40-49歲、50-59歲、>60歲共6個組。

1.2儀器與試劑儀器包括Hema9600梯度基因擴增儀、YN-H16恒溫雜交儀，采用亞能生物公司人乳頭瘤病毒基因分型(23型)檢測試劑盒(PCR-反向點雜交法)。

1.3方法嚴格按照試劑說明書進行操作。

1.4統計學處理應用EXCEI軟件處理數據。組間率的比較采用χ2檢驗分析數據，以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.158650例宮頸脫落細胞HPV總體感染情況

58650例標本中感染HPV12399例數，總感染率21.14%，其中 HPV6、11、16、18四種基因型占陽性感染率的26.33%；18種高危型HPV排例前八位的依次是52、16、58、53、51、68、56、18，HPV16和HPV18順序分別為第二位和第八位，感染率分別為9.86%和3.93%；五種低危型HPV感染的順序為81、43、42、6、11,HPV6和HPV11位居第四位和第五位，感染率分別3.10%和1.92%。

2.258650例宮頸脫落細胞低危型HPV(6/11)和高危型HPV(16/18)檢出結果。

從表1中看出12399例感染標本中，四種基因型中高危型HPV(16/18)的陽性率為73.32%(2394/3265)，HPV16占HPV(16/18)的71.51%(1712/2394)；四種基因型中低危型HPV(6/11)陽性率為26.68%(871/3265)，而HPV6占HPV(6/11)的61.77%(538/871)。

表1 低危型HPV(6/11)和高危型HPV(16/18)檢出結果(n=12399)

2.3不同年齡段四種基因型感染情況

從表2 中可得出HPV6在<30歲年齡組高于其他年齡組(P均<0.01)，HPV18在<20歲年齡組高于其他年齡組，差異有統計學意義，其他年齡感染率差異沒有統計意義(P>0.05)； HPV11和HPV16感染率隨年齡曲線呈U型分布，具有兩個感染高峰年齡段是<20歲和≥60歲(P均<0.01)，差異有統計學意義。

表2 不同年齡組HPV(6/11)和HPV(16/18)檢出結果

*P<0.01

圖1 不同年齡組HPV(6/11)、(16/18)感染率

2.4HPV(6/11)和HPV(16/18)的感染模式

從表3得知HPV(6/11)一重感染率為43.97%(383/871)，二重感染率為28.13%(245/871)，三重感染率16.65%(145/871)；HPV(16/18)一重感染率為52.30%(1252/2394)，二重感染率為28.49%(682/2394)，三重感染率11.49%(275/2394)。一重感染率和多重感染幾乎50%，二重感染占多重感染的一半，多重感染隨合并感染的型別數增加逐漸下降。

表3 HPV(6/11)和HPV(16/18)的感染模式

2.5多重感染出現頻率最多的前五位基因型

從表4可算出HPV6、HPV11、HPV16、HPV18的合并多重感染頻率最多前五位基因型比重分別是85.16%、84.83%、71.04%、85.93%；HPV6和HPV18的前五位基因型順序皆是52、16、58、51、81，HPV11前五位依次是16、81、52、59、58，HPV16前五位依次是52、58、81、53、51， HPV16最常與HPV52、HPV58構成多重感染,HPV18和HPV6最常與HPV52、HPV16構成多重感染,HPV11最常與HPV16和HPV81構成多重感染；多重感染中最常見的基因型HPV(6/11)是52，16，58，81，51，59，33；而HPV(16/18)是52，16，58，81，51，53，33。

表4 HPV(6/11)和HPV(16/18)的多重感染模式

3 討論

四種基因型感染率與新疆[4]HPV16、HPV18檢出率為10.9%和1.7%相比， HPV(16/18)檢出率均比之高與無錫市[5]HPV6、HPV11、HPV16、HPV18檢出率分別為2.43%、1.35%、13.99%、6.74%相比，HPV(6/11)比之高，HPV(16/18)基本一致，這說明四種基因型有地區差異。

四種基因型感染率隨年齡有差異，HPV6、HPV18感染高峰分別為<30歲和<20歲(P<0.01)，差異有統計意義。HPV11、HPV16感染隨年齡呈U型分布，<20歲和≥60歲是感染的兩個高峰期(P<0.01)。HPV18感染高峰年齡段為<20歲與新疆[4]研究結果一致，HPV11和HPV16感染高峰年齡段與Lazcano[6]報道一致，在普通人群中，年齡小于25歲(16.7%)和大于65歲的女性(23.10%)HPV的檢出率最高。<20歲HPV較高的感染率與性行為活躍相關，中老年人較高的感染率認為與機體免疫力下降有關[7]，我們應該抓住每個年齡段HPV感染的特征，加強對女性預防HPV知識的培訓和篩查，降低HPV感染率。

HPV(6/11)和HPV(16/18)一重感染率和多重感染幾乎50%，二重感染占多重感染的一半，說明HPV(6/11)和HPV(16/18)都以單獨感染為主，二重感染也占很高比例。多重感染中最常見的基因型HPV(6/11)是52，16，58，81，51，59，33；而HPV(16/18)是52，16，58，81，51，53，33，說明52，16，58，81，51，59，33，53與四種基因型高頻率合并多重感染，這種模式在宮頸病變的發生發展中起著不可忽視的作用。關于多重感染的原因，Keith等[8]指出由于HPV不同亞型編碼外殼蛋白的基因變異較大，不同亞型HPV間基本無交叉保護性抗體，易造成HPV多重感染或多次感染。多重感染是否增加宮頸癌的發生率，目前說法不一。Teresa S M[9]宮頸病變嚴重程度與HPV多重感染不相關，與HPV亞型密切相關，2/3的CIN患者的HPV16陽性；但也有研究[10]認為，多重HPV感染是宮頸上皮內低級別病變向高級別病變和宮頸癌發展的重要危險因素；趙愛華[11]研究指出從正常組織到CINII的不同病變中，多型別感染比例隨病變級別上升逐漸增加，多型別感染對宮頸病變以及宮頸癌的發展起促進作用；Sang A L等[12]研究顯示，單一HPV感染可使宮頸癌患病風險增加19.9倍，而多重HPV感染使其風險增加31.8倍；樓微華[13]指出HPV16單一感染者中發生宮頸高級別病變的比例最高，HPV18多重感染者中發生宮頸高級別病變的比例顯著高于HPV18單一感染者，這可能提示HPV18亞型在CINⅠ-Ⅲ進展階段感染的病程短暫且進展較快，Fragoso等[14]指出HPV18相關的宮頸癌通常以整合的形式存在于宿主細胞中，具有高E6/E7表達性，能迅速活化細胞內信號通路和促進相關癌基因轉錄表達。盡管HPV6、HPV11在低危型中感染率最低但嚴重引起尖銳濕疣，HPV18感染率位居高危第八位但嚴重引起宮頸癌，可能多種基因型相互促進起了一定的作用。

關于HPV6、HPV11與生殖道尖銳濕疣，有很多的研究報道。劉紅杏[15]研究指出生殖道尖銳濕疣主要與HPV6、11、42、43、44等低危型有關，少數為高危型或混合感染，混合感染以HPV6+11型為主,其次是HPV11+16型；LIU XG[16]研究指出在近100種HPV亞型中有30余種與尖銳濕疣相關，其中HPV6、11、16型和HPV18型4個亞型是引起尖銳濕疣的常見亞型；周權[17]指出尖銳濕疣患病率有2個高峰：20-24歲和35-39歲，并指出處于性活躍期的女性是尖銳濕疣的高危人群。

我國是宮頸癌高發國家，近年來年輕的宮頸癌患者有明顯上升趨勢。有性行為的女性80%曾感染HPV病毒，但大多數人可自然清除病毒，只有HPV持續性感染才是導致宮頸上皮惡性轉化的最重要的危險因素[18]。HPV高危亞型持續感染由宮頸上皮內瘤變發展為浸潤癌可長達8-12年[19]。HPV基因型似乎是感染持續及進展最重要的決定因素，其中HPV16亞型致癌風險最高，約占全球宮頸癌病例的55%-60%，其次是HPV18亞型，約占10%-15%，另有其他12個亞型與其余病例相關。劉北陸[20]調查研究HPV16，18感染女性3年轉陰率≥36.4%，HPV16，18感染的轉陰率隨時間推移逐漸下降，而轉陰性后沒有再轉陽的情況發生。早篩查，及時有效的干預治療將對宮頸癌的防治具有重要意義。

人乳頭瘤病毒疫苗的成功研制和運用，開啟了人類一級預防宮頸癌的新的篇章，美國食品和藥物管理局研究出預防宮頸癌為主的高危型HPV三種疫苗，第一種二價疫苗，包括HPV16 和HPV18型;第二種四價疫苗，包括HPV16、HPV18、HPV6、HPV11亞型，第三種九價疫苗四種高危HPV基因亞型外還覆蓋了另5種高風險基因亞型，由于不同國域、地區，HPV流行基因型不同，研究出適合我國的疫苗是當務之急。

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