非結核分枝桿菌肺病患者非結核分枝桿菌和下呼吸道病原菌分布及耐藥性分析

潘永，潘修成，張瑞梅，王春穎，席向宇，閆家微，劉加彬

非結核分枝桿菌是指除結核分枝桿菌復合群和麻風分枝桿菌以外的分枝桿菌。非結核分枝桿菌肺病是由一組非結核分枝桿菌引起的全身疾病，主要侵襲肺部。近年來，非結核分枝桿菌肺病的發生率呈逐年上升趨勢，已引起臨床廣泛關注［1］。據統計數據顯示，我國非結核分枝桿菌肺病發生率由20世紀90年代的4.9%上升至2010年的22.2%［2］。非結核分枝桿菌肺病與肺結核的臨床癥狀及體征相似，且非結核分枝桿菌肺病對多種一線抗菌藥物耐藥，易誤診為耐多藥肺結核［3-4］。目前，非結核分枝桿菌肺病尚無統一治療方案。本研究旨在分析非結核分枝桿菌肺病患者非結核分枝桿菌和下呼吸道病原菌分布及耐藥性，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2014—2016年徐州醫科大學附屬徐州市傳染病醫院收治的非結核分枝桿菌肺病患者152例，均符合《非結核分枝桿菌病診斷與治療專家共識》［5］中的非結核分枝桿菌肺病診斷標準。排除標準：（1）存在心、肝、腎等重要臟器功能不全者；（2）存在糖尿病、惡性腫瘤及艾滋病者；（3）存在免疫系統疾病者；（4）存在精神疾病者。所有患者中男106例，女46例；年齡21～84歲，平均年齡（63.5±10.2）歲；基礎疾病：支氣管擴張54例，慢性阻塞性肺疾病50例，肺炎24例，慢性肺源性心臟病18例，肺結核6例。本研究經徐州醫科大學附屬徐州市傳染病醫院醫學倫理委員會審核批準，患者及其家屬均簽署知情同意書。

1.2 方法

1.2.1 標本采集 所有患者于晨起刷牙前采集痰液標本，為減少微生物及食物殘渣對標本造成的污染，囑患者咳痰前用清水漱口，后采用有蓋的無菌廣口瓶放置標本，咳痰時患者下唇緊按在容器邊緣，深吸一口氣后咳出痰液。

1.2.2 病原菌鑒定及藥敏試驗 （1）標本接種于改良羅氏固體培養基，若形成菌落則鑒定為結核分枝桿菌，并采用羅氏比例法進行藥敏試驗；（2）標本接種于含噻吩二羧酸和對硝基苯甲酸的培養基，若形成菌落則可初步鑒定為非結核分枝桿菌，并采用全自動微生物鑒定系統進行菌種鑒定，采用絕對濃度間接法進行藥敏試驗。

2 結果

2.1 非結核分枝桿菌菌種分布 152例非結核分枝桿菌肺病患者共檢出非結核分枝桿菌152株，分離鑒定出7個非結核分枝桿菌菌種。其中快速生長群64株（占42.11%），以龜/膿腫分枝桿菌（占78.13%）為主；緩慢生長群88株（占57.89%），以鳥分枝桿菌復合群（占68.18%）為主，詳見表1。

表1 152例非結核分枝桿菌肺病患者非結核分枝桿菌菌種分布情況Table 1 Distribution of non-tuberlosis myeobactericum in the 152 in nontuberlosis myeobactericum-induced pulmonary disease patients

2.2 非結核分枝桿菌的耐藥率 龜/膿腫分枝桿菌對鏈霉素、異煙肼、利福平的耐藥率較高，均為100.00%；鳥分枝桿菌復合群對鏈霉素、異煙肼、對氨基水楊酸、氧氟沙星的耐藥率較高，均為100.00%，詳見表2。

2.3 下呼吸道病原菌分布 152例非結核分枝桿菌肺病患者下呼吸道樣本共分離出病原菌88株，其中革蘭陰性菌53株（占60.23%），真菌32株（占36.36%），革蘭陽性菌3株（占3.41%）。革蘭陰性菌以肺炎克雷伯菌（占22.64%）為主，真菌以白色假絲酵母菌（占84.37%）為主，革蘭陽性菌均為金黃色葡萄球菌（占100.00%），詳見表3。

2.4 下呼吸道革蘭陰性菌的耐藥率 肺炎克雷伯菌對氨芐西林的耐藥率為100.00%，對呋喃妥因的耐藥率為83.33%，對其他常見抗菌藥物敏感性較高，詳見表4。

3 討論

徐州地區位于江蘇北部、黃淮平原南部，是淮海經濟區中心城市，也是我國非結核分枝桿菌肺病高發地區之一。非結核分枝桿菌對酸和堿的敏感度較高，對常規抗菌藥物耐受［6］，現已發現約150種非結核分枝桿菌，其中致病菌較少（包括龜/膿腫分枝桿菌、堪薩斯分枝桿菌、胞內分枝桿菌等）［7］。非結核分枝桿菌廣泛分布于自然界中的土壤、灰塵及水源等，入侵人體肺部、骨骼、關節及軟組織會造成結核樣病變［8］。近年來，隨著非結核分枝桿菌細菌學和生物學鑒定技術的不斷發展及人口老齡化社會進程加劇，非結核分枝桿菌肺病發生率逐漸升高［9］。

表2 152例非結核分枝桿菌肺病患者非結核分枝桿菌的耐藥率Table 2 Drug resistance rate of non-tuberlosis myeobactericum in the 152 in non-tuberlosis myeobactericum-induced pulmonary disease patients

表4 152例非結核分枝桿菌肺病患者下呼吸道革蘭陰性菌耐藥率Table 4 Drug resistance rate of lower respiratory tract Gram-negative bacteria in the 152 non-tuberlosis myeobactericum-induced pulmonary disease patients

本研究結果顯示，152例非結核分枝桿菌肺病患者共檢出非結核分枝桿菌152株，其中快速生長群64株（占42.11%），以龜/膿腫分枝桿菌為主；緩慢生長群88株（占57.89%），以鳥分枝桿菌復合群為主，提示152例非結核分枝桿菌肺病患者非結核分枝桿菌以緩慢生長群為主，且鳥分枝桿菌復合群最為常見；龜/膿腫分枝桿菌對鏈霉素、異煙肼、利福平的耐藥率均為100.00%；鳥分枝桿菌復合群對鏈霉素、異煙肼、對氨基水楊酸、氧氟沙星的耐藥率均為100.00%，提示非結核分枝桿菌肺病患者對大部分抗菌藥物耐藥。因此，臨床治療非結核分枝桿菌肺病患者時應根據非結核分枝桿菌菌種類型選擇適合的抗菌藥物［10-11］。研究表明，阿奇霉素及克拉霉素是目前治療胞內分枝桿菌的新型大環內酯類藥物，其對龜/膿腫分枝桿菌及偶發分枝桿菌具有較好抗菌效果；堪薩斯分枝桿菌可采用利福平、乙胺丁醇及異煙肼聯合治療［12］。

非結核分枝桿菌肺病患者多伴有肺部基礎疾病，且除感染非結核分枝桿菌外，常合并其他病原菌感染［12-13］。本研究對152例非結核分枝桿菌肺病患者痰液標本進行病原菌培養及藥敏試驗，結果顯示，152例非結核分枝桿菌肺病患者下呼吸道樣本共分離出病原菌88株，其中革蘭陰性菌53株（占60.23%），真菌32株（占36.36%），革蘭陽性菌3株（占3.41%）。革蘭陰性菌以肺炎克雷伯菌為主，真菌以白色假絲酵母菌為主，革蘭陽性菌均為金黃色葡萄球菌，提示非結核分枝桿菌肺病患者下呼吸道病原菌以革蘭陰性菌為主，且肺炎克雷伯菌最為常見；藥敏試驗結果顯示，肺炎克雷伯菌對氨芐西林的耐藥率為100.00%，對呋喃妥因的耐藥率為83.33%，對其他常見抗菌藥物敏感性較高，提示非結核分枝桿菌肺病患者下呼吸道病原菌對大部分抗菌藥物敏感，臨床可根據非結核分枝桿菌肺病患者下呼吸道病原菌及藥敏試驗結果合理選擇抗菌藥物［14］。

表3 152例非結核分枝桿菌肺病患者下呼吸道病原菌分布情況Table 3 Distribution of lower respiratory tract pathogens in the 152 nontuberlosis myeobactericum-induced pulmonary disease patients

綜上所述，非結核分枝桿菌肺病患者非結核分枝桿菌以緩慢生長群為主，且對大部分抗菌藥物耐藥；下呼吸道病原菌以革蘭陰性菌為主，且對大部分抗菌藥物敏感；臨床應根據藥敏試驗結果合理選擇抗菌藥物，并積極研發新型抗菌藥物。

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