SNCA基因多態性與PD患者發病和臨床特征的相關性分析

田小軍，郝潔，邢紅霞，趙建華，郭雙喜，蘇洲，杜佳，王玉梅

(新鄉醫學院第一附屬醫院神經內科，河南 衛輝 453100)

帕金森病（PD）是臨床上常見的中老年人中樞性神經系統病變[1，2]，臨床表現為“四主征”癥狀，其病理基礎是黑質多巴胺（DA）能神經元變性缺失和形成路易小體，在我國該病具有較高的發病率，成為臨床關注的焦點問題之一[3-5]。目前對于PD的發病機制主流的看法認為，其是在年齡老化的情況下遺傳因素和環境因素共同作用引起的[6，7]，據相關研究報道α-突觸核蛋白（SNCA）基因是PD的致病基因之一，無論家族性和散發型的PD都與SNCA基因關系密切[8-10]。SNCA基因具有多態性，因此其多態性對PD病發的影響成為學界研究的熱點。因此研究ɑ-突觸核蛋白（SNCA）基因多態性與帕金森病（PD）發病和臨床特征的相關性，為PD的治療提供理論根據。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取新鄉醫學院第一附屬醫院確診的80例PD患者（PD組），同時選取80例年齡、性別與之匹配的健康對象作為對照組，收治時間2014年1月至2017年1月。

PD組，男 48例、女 32例，年齡 58～86歲，平均69.8±8.2歲，受教育年限9.0±3.7年，合并疾病：高血壓27例、糖尿病9例、高血脂6例。對照組，男 45 例、女 35 例，年齡 55～85 歲，平均 69.4±9.0歲，受教育年限9.5±3.5年，合并疾病：高血壓31例、糖尿病12例、高血脂4例。2組患者的年齡、性別、受教育年限、合并疾病比較，差異均無統計學意義（P＞0.05）。

1.2 納入排除標準

1.2.1 納入標準 ⑴PD患者的診斷參考人民衛生出版社《神經病學》（第七版）制定的診斷標準；⑵健康對照組來源于本院體檢中心體檢結果健康的自愿者，無PD癥狀、家族史；⑶均為漢族；⑷本研究獲得研究對象、醫學倫理委員會的知情同意。

1.2.2 排除標準 ⑴伴有嚴重的肝腎功能疾病；⑵伴有嚴重的營養不良、貧血；⑶免疫缺陷、免疫功能障礙；⑷各種原因所致的帕金森綜合征及帕金森疊加綜合征；⑸腦血管病史、顱腦外傷史；⑹合并精神性疾病。

1.3 檢測方法 采集受試者外周血，采用氯仿法提取患者外周血基因組DNA，根據SNCA基因的rs356200位點兩側序列，用Primer5.0軟件設計引物，采用聚合酶鏈反應（PCR）進行擴增，總反應體系為20uL，PCR反應為95℃，預變性2min，95℃、60℃和72℃各30s，72℃延伸5min， 共40個循環。將PCR酶切產物進行瓊脂糖凝膠電泳分離確定rs356200基因型。

1.4 研究方法 收集兩組的年齡、性別、民族、H-Y分級、帕金森病聯合評分量表（UPDRS）評分、帕金森病人生活質量量表（PDQ39）評分、簡明精神狀態檢查量表（MMSE）評分、首發癥狀類型，并按照SNCA基因rs356200位點的基因性別進行分析。

1.5 統計學方法 統計軟件采用SPSS 16.0，采用均數±標準差（x±s）進行統計描述，三組間比較采用單因素方差分析法；計數資料組間比較采用χ2檢驗；P值＜0.05表示差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組研究對象SNCA基因rs356200位點的基因多態性比較 PD組的SNCA基因rs356200位點等位基因A所占比例67.50%顯著的高于對照組的 56.25%（P＜0.05）；PD 組的 SNCA 基因 rs356200位點A/A基因型所占比例36.25%顯著的高于對照組的 18.75%（P＜0.05）；（表 1）。

表1 兩組研究對象SNCA基因rs356200位點的基因多態性比較（x±s）

2.2 PD患者SNCA基因rs356200位點的基因型與患者臨床特征的關系 SNCA基因rs356200位點A/A、A/G、G/G基因型三組PD患者的患者的年齡、性別、首發癥狀類型、UPDRS評分、PDQ39評分、MMSE評分比較，差異均不具有統計學意義（P＞0.05）；（表 2）。

3 討論

帕金森病（PD）又稱震顫麻痹，是臨床上常見的中老年人中樞性神經系統退行性疾病，其發病率僅次于阿爾茨海默病，臨床表現為“四主征”癥狀，包括運動遲緩、肌肉強直、靜止性震顫和步態姿勢異常，以路易(Lewy)小體形成、多巴胺能神經元變性和功能缺失為病理基礎，由于發病機制尚不清楚，缺乏有效的治療手段，PD在臨床和學界廣受關注[11，12]。目前對于PD的發病機制主流的看法認為，在年齡老化的情況下遺傳因素和環境因素共同作用引起的。據相關研究報道，PD的病理改變是由SNCA蛋白聚集小體造成的，因此α-突觸核蛋白（SNCA）基因被認為是PD的致病基因之一[13]。SNCA蛋白分子量相對較小，可調節神經可塑性、細胞分化和信號傳遞，其在體內積聚可導致發生功能性障礙甚至神經細胞死亡，而引起PD發病的SNCA蛋白聚集則是由基因的重復突變或者點突變引起。SNCA具有多態性，如rs356200和rs356165等多種基因位點，增加了SNCA蛋白的表達，從而增加了PD發病的風險，據相關報道稱無論家族性和散發型的PD都與SNCA基因多態性密切相關[14，15]。

表2 PD患者SNCA基因rs356200位點的基因型與患者臨床特征比較（x±s）

3.1 兩組研究對象SNCA基因rs356200位點的基因多態性比較 據相關研究表明，SNCA基因rs356200位點的基因是與PD發病的相關基因位點，而該基因位點具有多態性，因此其突變更有可能導致SNCA蛋白異常高表達，從而增加了SNCA的體內水平，增加了其聚集的風險，從而更容易導致PD的病發，因此本文首先考察了SNCA基因rs356200位點的基因的多態性分布，以考察誘發PD病發的基因型，現結果如下：PD組的SNCA基因rs356200位點等位基因A所占比例顯著的高于對照組；PD組的SNCA基因rs356200位點A/A基因型所占比例顯著的高于對照組，以上結果均具有統計學差異，這表明SNCA基因rs356200位點等位基因A和A/A基因型是誘發PD發病的危險等位基因和基因型，在臨床上具有一定預測PD發病的作用。

3.2 PD患者SNCA基因rs356200位點的基因型與患者臨床特征的關系 為更為全面的考察PD病情的發展與SNCA基因rs356200位點基因多態性的關系，本文考察了PD組的SNCA基因rs356200位點A/A、A/G、G/G基因型與患者的年齡、性別、首發癥狀類型、UPDRS評分、PDQ39評分、MMSE評分組間比較，發現以上結果差異均不具有統計學意義，這表明SNCA基因rs356200位點基因的多態性與PD的臨床特征和病情嚴重程度不具有相關性，而可能是與環境因素關系更為密切。

綜上所述本文研究了ɑ-突觸核蛋白（SNCA）基因多態性與帕金森病（PD）發病和臨床特征的關系，證明了SNCA基因rs356200位點等位基因A和A/A基因型是誘發PD發病的危險等位基因和基因型，但其多態性與PD臨床特征和病情嚴重程度不具有相關性，而可能是與環境因素關系更為密切，因此SNCA基因rs356200位點的基因的多態性在臨床上具有一定預測PD發病的作用。

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