人附睪蛋白4和糖類抗原19-9聯合檢測在卵巢癌臨床診斷與病理分型中的應用價值

方友琴，方友華，林開健，陳 艷

(1.重慶市萬州區人民醫院婦產科 404100；2.重慶市第五人民醫院呼吸科 400062；3.重慶市萬州區人民醫院護理部 404100)

卵巢癌是臨床上女性生殖系統常見的惡性腫瘤，其早期臨床癥狀并不顯著，絕大多數患者確診時已屬晚期，錯過了最佳的治療時機[1]。因此，如何早期發現與診斷卵巢癌是提高卵巢癌防治效果的關鍵。糖類抗原19-9(CA19-9)是一類低聚糖類抗原，在胰腺癌、胃癌、肺癌等多種惡性腫瘤患者的血清中均能表達，但在健康人血清中的表達量普遍較低，是臨床上應用較為廣泛的一類腫瘤標志物[2-3]。人附睪蛋白4(HE4)是一種具有免疫保護作用的蛋白酶抑制劑，已有研究顯示約80%以上卵巢癌患者HE4水平均可呈現顯著升高[4]。本研究以萬州區人民醫院診治的64例卵巢癌患者為受試對象，探討血清CA19-9與HE4聯合檢測診斷卵巢癌的臨床價值，現報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2015年9月至2017年2月萬州區人民醫院婦產科診治的64例卵巢癌患者為受試對象，年齡28～61歲，平均(48.76±7.32)歲；依據國際婦產科聯盟(FIGO)分期標準[5]：Ⅲ期48例，Ⅳ期16例；病理分型：上皮型惡性腫瘤53例(黏液型16例，漿液型28例，透明細胞腫瘤4例，子宮內膜樣腫瘤3例，移行細胞腫瘤2例)，非上皮型惡性腫瘤11例。所有患者均經病理學檢查確診，且CT或MRI檢測均未發現淋巴結轉移等；肝腎功能、心電圖檢查及骨髓功能未發現明顯異常，Karnofsky功能狀態評分均大于80分。同時，選擇同期住院治療的64例良性卵巢腫瘤患者為對照組，年齡27～64歲，平均(47.24±6.88)歲。兩組患者在年齡、民族、經濟狀況、基礎疾病等方面的比較，差異均無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。本研究方案經醫院倫理委員會批準，患者知情同意并簽署知情同意書。

1.2方法 所有受試對象均采集清晨空腹靜脈血5 mL，3 000 r/min，4 ℃離心20 min，置于-80 ℃冰箱中保存備用。運用抗原或抗體固相化的方式，采用酶聯免疫吸附測定(ELISA)分別檢測CA19-9和HE4水平，ELISA試劑盒均購于上海恒遠生物科技有限公司，檢測儀器為美國Bio-Rad Model 580酶標儀。具體操作均按照試劑盒說明書由專業檢驗技術人員操作完成，并嚴格依據測定流程的每個環節予以質量控制。

2 結 果

2.1CA19-9與HE4在卵巢癌臨床診斷中的價值分析 ROC曲線分析結果顯示，CA19-9曲線下面積為0.716，最佳診斷臨界值為37.9 U/L；血清CA19-9≥37.9 U/L預測卵巢癌陽性的特異度為88.16%，靈敏度為76.59%；HE4曲線下面積為0.906，最佳診斷臨界值為55.74 pmol/L。血清HE4≥55.74 pmol/L指示卵巢癌陽性的特異度為90.64%，靈敏度為82.91%。

2.2卵巢癌與良性腫瘤患者CA19-9與HE4水平比較 良性卵巢腫瘤患者CA19-9與HE4水平明顯低于卵巢癌患者，差異均有統計學意義(P<0.05)，而且卵巢癌患者上述兩項指標的水平高于最佳診斷臨界值，見表1。

表1 兩組患者血清CA19-9與HE4水平比較

2.3CA19-9聯合HE4檢測鑒別診斷卵巢癌的價值分析 ROC曲線分析結果顯示，CA19-9聯合HE4檢測鑒別診斷卵巢癌的特異度為90.89%，與兩項指標單獨檢測結果比較，差異均無統計學意義(P>0.05)；而聯合檢測的靈敏度為89.88%，明顯高于兩項指標單獨檢測，差異有統計學意義(P<0.05)，見表2、圖1。

2.4不同病理分型卵巢患者CA19-9與HE4水平比較 卵巢上皮型惡性腫瘤患者CA19-9和HE4水平均明顯高于卵巢非上皮型惡性腫瘤患者，差異有統計學意義(P<0.05)；黏液型、透明細胞腫瘤、子宮內膜樣腫瘤和移行細胞腫瘤的卵巢癌患者CA19-9和HE4水平均顯著低于漿液型卵巢癌患者，差異均有統計學意義(P<0.05)，見表3。

表2 CA19-9聯合HE4檢測鑒別診斷卵巢癌的價值分析(%)

圖1 診斷ROC曲線圖

表3 不同病理分型卵巢癌患者CA19-9與HE4水平比較

注：與卵巢上皮型非惡性腫瘤比較，*P<0.05；與漿液型比較，△P<0.05

3 討 論

流行病學調查顯示，卵巢癌的發病率僅次于宮頸癌，高居女性生殖系統腫瘤的第二位，但卵巢癌的病死率卻占各類婦科惡性腫瘤的首位，對婦女健康造成嚴重危害[6]。由于卵巢的解剖位置、內分泌功能和發育過程均較為復雜，因此，早期臨床癥狀并不典型，確診時多數患者已擴散至子宮、附件、大網膜及盆腔其他臟器。卵巢癌的早期診療難度高、檢出率低的問題一直備受學界關注，也是研究的重點[7-8]。近年來，血清腫瘤標志物具有操作簡單、經濟實用和創傷小等優點，在卵巢癌臨床鑒別診斷、預后判斷等方面發揮的作用愈發顯著[9]。CA19-9是一類糖類抗原，具有反映腫瘤存在的化學物質，在胃癌、肺癌、肝癌、前列腺癌腫瘤組織中CA19-9水平顯著升高，而在正常組織或胚胎組織中CA19-9通常難以檢測或水平極低，是一種可以輔助診斷惡性腫瘤，進行臨床鑒別診斷及預后判定的傳統血清腫瘤標志物[10]。有研究發現，CA19-9在部分女性生殖系統中的水平也能夠出現一定程度的增高，其陽性表達率可達40%左右，但靈敏度和特異度并不高，單獨檢測難以滿足臨床診斷卵巢癌的需求[11]。HE4被認為是一類新型的血清腫瘤標志物，在健康人體或癌旁組織水平較低或不表達，而在卵巢癌組織中水平可顯著升高，并且高達80%以上的卵巢癌患者均出現HE4高度表達，提示HE4亦可能是一種潛在的卵巢癌血清腫瘤標志物，具有較高的組織特異性[12-13]。本研究結果顯示，卵巢癌患者CA19-9、HE4水平均明顯高于良性卵巢腫瘤患者，表明兩項指標可能均與卵巢癌的發生、發展密切相關，而且HE4的診斷靈敏度和特異度均略高于傳統血清腫瘤標志物CA19-9。重要的是，研究結果還發現，CA19-9與HE4聯合檢測雖然并不能提高卵巢癌檢出的特異度，卻顯著提高了診斷的靈敏度，這對臨床進一步利用其他方式早期確診卵巢癌具有良好的指導價值。CA19-9與HE4兩者均為血清腫瘤標志物，但可相互補充，相輔相成，在卵巢癌診斷中的聯合應用，亦能夠降低假陰性檢出率，尤其是在早期卵巢癌與良性卵巢腫瘤的鑒別診斷中，兩者聯合檢測，可有效提高診斷的準確性。

有研究發現，HE4、CA19-9與卵巢癌的病理類型具有一定關聯性。國外也有報道證實，通過對HE4與CA125的水平測定，可有效鑒別卵巢癌與非卵巢癌患者，從而提高臨床診斷卵巢癌的能力[14]。本研究結果發現，卵巢上皮型惡性腫瘤患者CA19-9和HE4水平均明顯高于卵巢非上皮型惡性腫瘤患者，而且黏液型、透明細胞腫瘤、子宮內膜樣腫瘤和移行細胞腫瘤卵巢癌患者兩項指標水平均顯著低于漿液型卵巢癌患者。該結果提示，通過對卵巢惡性腫瘤患者血清CA19-9和HE4水平進行檢測，可為卵巢癌腫瘤病理分型提供一定的參考。筆者分析其原因可能是由于HE4作為一種蛋白酶抑制劑，該基因能夠編碼的蛋白相對分子質量相對較低，而糖化后成熟的HE4蛋白含有2個結構域單肽，相對分子質量達到(20～25)×103，顯著增高，一方面表現為在多種腫瘤細胞中呈現高表達，另一方面則在一定程度上反映卵巢癌疾病嚴重程度或腫瘤的惡性程度[15]。而且，實踐結果發現，倘若單獨將CA19-9或HE4作為卵巢腫瘤鑒別診斷的血清標志物均有各自局限性，聯合檢測的方式則可顯著提高診斷靈敏度，對病理分型也有一定臨床指導意義。

綜上所述，聯合檢測血清CA19-9與HE4可顯著提高卵巢癌臨床診斷靈敏度，且對腫瘤病理分型具有積極的輔助指導作用。然而，由于納入研究的對象數量有限，觀察周期較短，尚未獲得健康人群的腫瘤標志物測定結果，故研究的結論仍有一定局限性，亟待后續多中心臨床試驗加以論證。

[1]JACOBS I J,MENON U,RYAN A,et al.Ovarian cancer screening and mortality in the UK Collaborative Trial of Ovarian Cancer Screening(UKCTOCS):a randomised controlled trial[J].Lancet,2016,387(122):945-956.

[2]ZHANG J Y,HUANG T,ZHANG F,et al.Prognostic role of serum carbohydrate antigen 19-9 levels in patients with resectable hepatocellular carcinoma[J].Tumor Biology,2015,36(4):2257-2261.

[3]SIMMONS A R,CLARKE C H,BADGWELL D B,et al.Validation of a biomarker panel and longitudinal biomarker performance for early detection of ovarian cancer[J].Int J Gynecol Cancer,2016,26(6):1070-1077.

[4]FUJIWARA H,SUZUKI M,TAKESHIMA N,et al.Evaluation of human epididymis protein 4(HE4) and Risk of Ovarian Malignancy Algorithm(ROMA) as diagnostic tools of type Ⅰ and type Ⅱ epithelial ovarian cancer in Japanese women[J].Tumour Biol,2015,36(2):1045-1053.

[5]DI RENZO G C,CONRY J A,BLAKE J A,et al.International federation of gynecology and obstetrics opinion on reproductive health impacts of exposure to toxic environmental chemicals[J].Int J Gynecol Obstet,2015,131(3):219-225.

[6]TAVANI A,GALLUS S,LA VECCHIA C,et al.Physical activity and risk of ovarian cancer:An Italian case-control study[J].Int J Cancer,2001,91(3):407-411.

[7]BARRETT C L,DEBOEVER C,JEPSEN K A,et al.Systematic transcriptome analysis reveals tumor-specific isoforms for ovarian cancer diagnosis and therapy[J].Proc Natl Acad Sci U S A,2015,112(23):E3050-E3057.

[8]EBELL M H,CULP M B,RADKE T J.A systematic review of symptoms for the diagnosis of ovarian cancer[J].Am J Prev Med,2016,50(3):384-394.

[9]SOLETORMOS G,DUFFY M J,ABU HASSAN S O,et al.Clinical use of cancer biomarkers in epithelial ovarian cancer updated guidelines from the European group on tumor markers[J].Int J Gynecol Cancer,2016,26(1):43-51.

[10]CHO H Y,KIM K,JEON Y T,et al.CA19-9 elevation in ovarian mature cystic teratoma:Discrimination from ovarian cancer-CA19-9 level in teratoma[J].Med Sci Monit,2013,19(7):230-235.

[11]NAKAGAWA N,KODA H,NITTA N,et al.Reactivity of CA19-9 and CA125 in histological subtypes of epithelial ovarian tumors and ovarian endometriosis[J].Acta Med Okayama,2015,69(4):227-235.

[12]NASSIR M,GUAN J,LUKETINA H,et al.The role of HE4 for prediction of recurrence in epithelial ovarian cancer patients-results from the OVCAD study[J].Tumor Biol,2016,37(3):3009-3016.

[13]KARLSEN M A,H?GDALL E V,CHRISTENSEN I J,et al.A novel diagnostic index combining HE4,CA125 and age May improve triage of women with suspected ovarian cancer-An international multicenter study in women with an ovarian mass[J].Gynecol Oncol,2015,138(3):640-646.

[14]STIEKEMA A,BOLDINGH Q,KORSE C M,et al.Serum human epididymal protein 4(HE4) as biomarker for the differentiation between epithelial ovarian cancer and ovarian metastases of gastrointestinal origin[J].Gynecol Oncol,2015,136(3):562-566.

[15]GISLEFOSS R E,LANGSETH H,BOLSTAD N,et al.HE4 as an early detection biomarker of epithelial ovarian cancer investigations in prediagnostic specimens from the Janus serumbank[J].Int J Gynecol Cancer,2015,25(9):1608-1615.