提高動物細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)教學(xué)質(zhì)量的探討

鄭皓 景嘉楠 李江峰 陳昱妍 郭燕潔 程曉麗

摘要：細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)已經(jīng)深入生命科學(xué)研究的各個領(lǐng)域，對于細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的提高已經(jīng)是迫在眉睫。如何提高動物細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)課的教學(xué)質(zhì)量，如何讓學(xué)生能夠熟練掌握細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，是如今形勢下所面臨的主要問題。本文通過對現(xiàn)階段動物細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)課教學(xué)的問題進(jìn)行分析，針對所出現(xiàn)的問題通過教材內(nèi)容、教學(xué)方式以及考核體系三個主要方面進(jìn)行淺顯的探究。

關(guān)鍵詞：細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)；實(shí)驗(yàn)教學(xué)；教學(xué)改革

中圖分類號：G642.0 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A 文章編號：1674-9324（2018）14-0267-04

隨著科技的發(fā)展，細(xì)胞生物學(xué)領(lǐng)域的研究不斷地在拓展，作為生命基礎(chǔ)的細(xì)胞成為近年來人們研究的主要對象，使得來自不同專業(yè)的科學(xué)家不斷地在這一領(lǐng)域?qū)?xì)胞功能以及結(jié)構(gòu)進(jìn)行探索性研究，使得細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)變得尤為重要[1]。通過運(yùn)用細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，科研工作者已經(jīng)在生命現(xiàn)象的研究中獲得了越來越多的重要成果。因此細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)已經(jīng)成為了生命科學(xué)研究領(lǐng)域中必備的經(jīng)典技術(shù)。

動物細(xì)胞培養(yǎng)是將包括人類細(xì)胞在內(nèi)的動物細(xì)胞在機(jī)體外進(jìn)行培養(yǎng)的重要實(shí)驗(yàn)技術(shù)，即是在機(jī)體外模擬機(jī)體內(nèi)的細(xì)胞生活環(huán)境，在無菌且有一定營養(yǎng)物質(zhì)支撐等嚴(yán)格條件下，動物細(xì)胞在培養(yǎng)皿中存活、生長、繁殖以及維持其本身結(jié)構(gòu)和功能的重要實(shí)驗(yàn)技術(shù)。細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)簡化了細(xì)胞在機(jī)體內(nèi)復(fù)雜的生存環(huán)境，通過在機(jī)體外培養(yǎng)可以方便地對細(xì)胞在不同條件下的結(jié)構(gòu)以及功能進(jìn)行研究。

作為醫(yī)學(xué)生以及生物學(xué)科學(xué)生，熟練掌握這門技術(shù)是必不可少的[2]。為了能夠讓學(xué)生更加系統(tǒng)完整的掌握這一門技術(shù)，本文針對如何提高動物細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)的教學(xué)質(zhì)量進(jìn)行了簡單探討。

一、教學(xué)內(nèi)容的優(yōu)化

（一）講義教材的編排

隨著科技的不斷進(jìn)步，生物學(xué)領(lǐng)域的發(fā)展突飛猛進(jìn)，特別在細(xì)胞生物學(xué)方面不斷涌現(xiàn)新的技術(shù)。然而我們現(xiàn)在教學(xué)中所使用的內(nèi)容相對陳舊，滯后于當(dāng)今科技的發(fā)展，使得學(xué)生不能在教學(xué)過程中對新型高效的技術(shù)和方法有充分的了解。為了全面提高學(xué)生綜合素質(zhì)，針對教學(xué)教材以及講義我們也在實(shí)驗(yàn)教學(xué)過程中不斷地進(jìn)行探討和研究，特別是教材講義內(nèi)容的創(chuàng)新，從而使學(xué)生能夠跟得上科學(xué)技術(shù)的發(fā)展。

經(jīng)過在教學(xué)過程中的總結(jié)體會，我們發(fā)現(xiàn)一本結(jié)合當(dāng)今科技發(fā)展的講義可以讓學(xué)生在實(shí)際的學(xué)習(xí)中受益匪淺，也可以為我們以后的教學(xué)帶來很大程度的便利。目前使用的教材由于編著作者的專業(yè)背景、所處院校及研究方向的不同，作者的側(cè)重點(diǎn)也有很大的不同。因此，為了使教材內(nèi)容能夠更加切合我校醫(yī)學(xué)教育目前的實(shí)際情況，我們本著理論聯(lián)系實(shí)際且跟隨科技發(fā)展新動向的目的，在編排教材的過程中，吸收國內(nèi)外相關(guān)教材的精華部分以及授課教師在教學(xué)過程中的實(shí)際經(jīng)驗(yàn)和研究成果，通過不斷推敲編寫出適合本院系學(xué)生使用的實(shí)驗(yàn)課講義。

（二）實(shí)驗(yàn)內(nèi)容的精選

動物細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)課應(yīng)以提升學(xué)生的實(shí)驗(yàn)技能、啟發(fā)學(xué)生的創(chuàng)新意識、增強(qiáng)學(xué)生的實(shí)踐能力為目的。同時，學(xué)生通過實(shí)驗(yàn)課的學(xué)習(xí)，能夠增強(qiáng)團(tuán)隊(duì)協(xié)作能力并能培養(yǎng)觀察分析的科研精神。

細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)，需要非常苛刻的實(shí)驗(yàn)條件以及極其熟練的實(shí)驗(yàn)技術(shù)，同時還需要將細(xì)胞生物學(xué)的理論知識與實(shí)驗(yàn)技能進(jìn)行高度的結(jié)合。但是實(shí)驗(yàn)課的課程時間有限且實(shí)驗(yàn)器材缺乏，這就對我們動物細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)的進(jìn)行造成了一定程度的挑戰(zhàn)。因此，細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)課的內(nèi)容務(wù)必需要一定的側(cè)重點(diǎn)。

根據(jù)具體情況我們將教學(xué)內(nèi)容大致分為四部分：①原代細(xì)胞培養(yǎng)，如貼壁培養(yǎng)法和消化培養(yǎng)法。這一部分的實(shí)驗(yàn)主要是以了解為主，因此對于這一部分的學(xué)習(xí)可以讓學(xué)生通過查閱文獻(xiàn)以及在線視頻資料進(jìn)行學(xué)習(xí)；②傳代細(xì)胞培養(yǎng)，如細(xì)胞的復(fù)蘇、傳代以及凍存等，這一部分是主要的實(shí)驗(yàn)內(nèi)容，因此授課教師要側(cè)重對這一部分的講解，以保證學(xué)生都能夠領(lǐng)會并掌握；③細(xì)胞活性的測定，這一技術(shù)是為了驗(yàn)證所培養(yǎng)的細(xì)胞是否能順利成活，也是非常重要的，授課老師也應(yīng)該要求學(xué)生們掌握；④對培養(yǎng)的細(xì)胞進(jìn)行不同藥物處理并對細(xì)胞結(jié)構(gòu)及性能進(jìn)行研究，這些技術(shù)是將細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)運(yùn)用到實(shí)際的科研探究中。對于這一部分，教師可以對學(xué)生進(jìn)行啟發(fā)性的講解并鼓勵學(xué)生設(shè)計并實(shí)施一些簡單探究性的實(shí)驗(yàn)，以培養(yǎng)學(xué)生的科研創(chuàng)新能力。通過以上四部分的學(xué)習(xí)，學(xué)生能夠在有限的時間較為立體的對細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)有一個較為詳細(xì)的了解。

（三）科研能力的培養(yǎng)

對于學(xué)生，應(yīng)該注重對學(xué)生科研素質(zhì)能力的培養(yǎng)。針對這一方面，授課教師應(yīng)當(dāng)從學(xué)生的基本實(shí)驗(yàn)操作能力、科研思維能力以及科研素養(yǎng)進(jìn)行重點(diǎn)培養(yǎng)。

實(shí)驗(yàn)基本操作能力的培養(yǎng)：對于細(xì)胞培養(yǎng)中的基本操作，如實(shí)驗(yàn)器具的滅菌及準(zhǔn)備、無菌操作、細(xì)胞計數(shù)及觀察等，需要授課教師一邊操作一邊講述，尤其是實(shí)驗(yàn)操作過程中的一些具體的注意事項(xiàng)，以讓學(xué)生對細(xì)胞培養(yǎng)有一個正確的認(rèn)識。另外，在學(xué)生進(jìn)行實(shí)驗(yàn)的過程中，授課教師應(yīng)當(dāng)及時進(jìn)行指導(dǎo)，讓學(xué)生能夠通過對錯誤操作導(dǎo)致的結(jié)果進(jìn)行總結(jié)，明白嚴(yán)格規(guī)范操作的重要意義。學(xué)生們通過對實(shí)驗(yàn)基本操作能力的訓(xùn)練培養(yǎng)，能夠增強(qiáng)自己的能力和意識，并為以后的職業(yè)發(fā)展夯實(shí)基礎(chǔ)[3]。

科研思維能力以及科研素質(zhì)的培養(yǎng)：對于這一部分的培養(yǎng)要結(jié)合實(shí)驗(yàn)教學(xué)進(jìn)行培養(yǎng)訓(xùn)練。授課教師可以在實(shí)驗(yàn)過程中與學(xué)生進(jìn)行交流，并對實(shí)驗(yàn)過程中出現(xiàn)的問題進(jìn)行探究，聽取學(xué)生對實(shí)驗(yàn)中出現(xiàn)的問題的意見和解決方案，并針對學(xué)生對問題分析的邏輯思維能力以及觀察能力進(jìn)行評價。如：使用不同實(shí)驗(yàn)方法對細(xì)胞類型進(jìn)行判定，在不同實(shí)驗(yàn)條件下對細(xì)胞形態(tài)以及功能影響進(jìn)行探究等。只有這樣將理論知識與實(shí)驗(yàn)技術(shù)緊密結(jié)合，才能真正培養(yǎng)學(xué)生的科研能力和科研素質(zhì)。

二、教學(xué)方式的改進(jìn)

（一）無菌操作理念的樹立

在細(xì)胞培養(yǎng)的過程中，最關(guān)鍵的是細(xì)胞能否存活。而確保細(xì)胞存活的關(guān)鍵就是無菌操作。

細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)比較復(fù)雜，涉及的步驟繁多，且步驟之間具有較強(qiáng)的關(guān)聯(lián)性。所以，學(xué)生必須對實(shí)驗(yàn)過程中的所有步驟都非常清楚了解才能保證實(shí)驗(yàn)效果，尤其是無菌操作[4]。

大多數(shù)學(xué)生在上細(xì)胞生物學(xué)的實(shí)驗(yàn)課之前都沒有接觸過嚴(yán)格的無菌操作，對無菌操作的了解僅限于書本上的理論知識，并沒有進(jìn)行過實(shí)際的操作。所以，授課教師應(yīng)當(dāng)在實(shí)驗(yàn)課堂上對無菌操作的理論知識及技術(shù)要點(diǎn)進(jìn)行詳細(xì)的講解，讓學(xué)生更為直觀的接觸無菌操作，以使學(xué)生們都明白無菌操作的重要性，樹立無菌操作的理念。

教師在講授的過程中一定要結(jié)合具體的實(shí)驗(yàn)步驟，從實(shí)驗(yàn)開始前的實(shí)驗(yàn)器具的消毒滅菌到實(shí)驗(yàn)進(jìn)行中的具體操作，再到實(shí)驗(yàn)結(jié)束后的清理打掃等所有步驟，均需要現(xiàn)場示范并進(jìn)行演示講解。同時教師也應(yīng)該鼓勵學(xué)生在講授的過程中積極提問，并針對學(xué)生們的疑惑給予詳細(xì)且準(zhǔn)確的解答。另外，授課教師在學(xué)生進(jìn)行實(shí)際操作時要嚴(yán)格要求，及時進(jìn)行指導(dǎo)并解釋原因。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，教師需要將同學(xué)們的疑問匯總并集中進(jìn)行答疑解惑，同時還要讓學(xué)生對所使用的實(shí)驗(yàn)器材進(jìn)行清潔整理，并對無菌操作臺擦拭消毒，以養(yǎng)成良好的實(shí)驗(yàn)習(xí)慣[5]。

（二）對實(shí)驗(yàn)所需設(shè)備的熟悉

動物細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中涉及到的實(shí)驗(yàn)器械較多，且大部分實(shí)驗(yàn)器材都是學(xué)生第一次接觸。所以學(xué)生對一些實(shí)驗(yàn)器材的使用不夠熟悉，對實(shí)驗(yàn)過程中的注意事項(xiàng)不夠了解，在實(shí)驗(yàn)過程中容易因?yàn)椴僮鞑划?dāng)而出現(xiàn)這樣或那樣的問題，使實(shí)驗(yàn)無法順利完成。

正是由于這些不熟悉，而如果授課教師在講課時也沒有進(jìn)行詳細(xì)的講解，那么學(xué)生們在實(shí)驗(yàn)過程中便會產(chǎn)生很多的疑問，比如，有的學(xué)生會問：無菌操作臺內(nèi)部本身就是無菌的環(huán)境，那么為什么在實(shí)驗(yàn)過程中還需要在臺子里點(diǎn)燃一盞酒精燈呢？還有的學(xué)生也會問：為什么細(xì)胞需要放在一定濃度的二氧化碳培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)呢？為什么不能用普通的光學(xué)顯微鏡，而是必須用倒置相差顯微鏡來觀察培養(yǎng)的細(xì)胞呢？

所以，這就需要授課教師在教學(xué)的過程中針對所使用的所有器械進(jìn)行詳細(xì)的講解，包括：器械的作用及原理、器材設(shè)備的消毒滅菌方法、所有儀器的使用方法及注意事項(xiàng)等。例如：無菌操作臺中酒精燈的使用目的、移液器的使用方法及注意事項(xiàng)、二氧化碳培養(yǎng)箱的工作原理、倒置相差顯微鏡的操作規(guī)程及注意事項(xiàng)等。通過這些學(xué)習(xí)，學(xué)生可以對動物細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中所需要使用的所有設(shè)備、儀器及試劑等有充分的了解，并為今后的工作打下堅實(shí)的基礎(chǔ)。

（三）觀察細(xì)胞能力的培養(yǎng)

對培養(yǎng)細(xì)胞進(jìn)行觀察，通過觀察確定細(xì)胞的生長情況，因此對細(xì)胞的觀察能力的培養(yǎng)也是必不可少的。例如，運(yùn)用組織塊培養(yǎng)法培養(yǎng)細(xì)胞時，細(xì)胞生長情況的判斷標(biāo)準(zhǔn)即是貼壁組織塊的生長狀況。如果觀察發(fā)現(xiàn)貼壁組織塊周圍存在生長暈，則說明細(xì)胞生長情況較好，如果沒有生長暈則說明細(xì)胞培養(yǎng)得不成功。另外，在觀察細(xì)胞的時候，同學(xué)們也會發(fā)現(xiàn)，在同樣的環(huán)境下，同樣的組織，有的生長情況很好，而有的則生長不良。針對這個問題，授課教師就需要向?qū)W生們將組織生長的條件以及細(xì)胞貼壁的程度與組織的生長狀態(tài)之間的關(guān)系講解清楚。

授課教師在講解這一部分內(nèi)容時，可以提前準(zhǔn)備好不同生長狀態(tài)的細(xì)胞來讓學(xué)生們觀察并進(jìn)行總結(jié)。同時，教師也可以預(yù)先準(zhǔn)備一些出現(xiàn)了污染的細(xì)胞讓學(xué)生觀察并進(jìn)行講解。通過對不同類型細(xì)胞污染的觀察，學(xué)生們可以學(xué)會對細(xì)胞培養(yǎng)中的污染現(xiàn)象進(jìn)行識別[6]。

另外，由于課上時間有限，授課教師可以提前搜集一些不同類型細(xì)胞的照片及視頻資料，在課堂講解時播放這些照片及視頻。同時教師也可以提前實(shí)際操作一遍，并將全過程拍攝下來，同樣在課上播放及講授。通過這種方式，學(xué)生們既可以提高自己的觀察力，也能提升自己發(fā)現(xiàn)及分析問題的能力。

三、考核體系的完善

（一）實(shí)驗(yàn)報告的撰寫

實(shí)驗(yàn)報告是學(xué)生對實(shí)驗(yàn)過程掌握程度以及該學(xué)生科研素養(yǎng)的綜合體現(xiàn)[7]。通過實(shí)驗(yàn)報告的撰寫，學(xué)生們的觀察能力、發(fā)現(xiàn)及分析問題的能力、總結(jié)及解決問題的能力等都能獲得較大的提高。另外，學(xué)生們通過撰寫實(shí)驗(yàn)報告，也能夠較大地提升自己的邏輯思維能力，同時能夠大大激發(fā)探索研究的興趣。授課教師也可以通過對學(xué)生實(shí)驗(yàn)報告的批改，掌握學(xué)生的學(xué)習(xí)情況，對學(xué)生的實(shí)驗(yàn)成績給予準(zhǔn)確的評價。

傳統(tǒng)的實(shí)驗(yàn)報告包括實(shí)驗(yàn)意義、實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?shí)驗(yàn)步驟、實(shí)驗(yàn)結(jié)果及分析與討論等。學(xué)生在完成實(shí)驗(yàn)之后，通過撰寫實(shí)驗(yàn)報告，可以對實(shí)驗(yàn)結(jié)果以及實(shí)驗(yàn)過程中出現(xiàn)的問題進(jìn)行分析，鞏固該次實(shí)驗(yàn)課的學(xué)習(xí)。

通過對實(shí)驗(yàn)報告撰寫這一環(huán)節(jié)的完善及改革，將傳統(tǒng)的實(shí)驗(yàn)報告改為論述文，可以達(dá)到考查學(xué)生綜合能力的目的。授課教師可以要求學(xué)生通過查閱有關(guān)資料，嚴(yán)格按照論文的格式，對實(shí)驗(yàn)過程中出現(xiàn)的問題進(jìn)行分析總結(jié)并撰寫出一份論述文。這樣最終提交給教師的是一份以科研論文格式呈現(xiàn)的論文式實(shí)驗(yàn)報告。因?yàn)樵谠撜撐氖綄?shí)驗(yàn)報告中，討論是主要部分，所以學(xué)生們通過這樣的訓(xùn)練，可以極大地提升發(fā)現(xiàn)問題及分析問題的能力。

（二）現(xiàn)場操作的考察

動物細(xì)胞培養(yǎng)是一項(xiàng)對理論知識與實(shí)踐技能相結(jié)合有著較高要求的實(shí)驗(yàn)技術(shù)。對于這門實(shí)驗(yàn)課的考查，實(shí)驗(yàn)報告非常重要。但是作為一項(xiàng)以實(shí)際操作為主要內(nèi)容的實(shí)驗(yàn)課程的考核，對學(xué)生實(shí)驗(yàn)課上實(shí)際現(xiàn)場操作的考查也尤為重要。

因此，動物細(xì)胞培養(yǎng)這門實(shí)驗(yàn)課，對學(xué)生的實(shí)驗(yàn)課評價不能單一地只考查學(xué)生的實(shí)驗(yàn)報告，還應(yīng)該側(cè)重于對學(xué)生的現(xiàn)場操作能力的考查，以衡量學(xué)生對相關(guān)理論知識及實(shí)驗(yàn)操作技能的掌握程度[8]。

學(xué)生現(xiàn)場操作的規(guī)范程度以及熟練程度，可以反映出該學(xué)生對該門實(shí)驗(yàn)課的理論知識與實(shí)驗(yàn)技能的掌握情況。所以，授課教師對所帶班級學(xué)生的實(shí)驗(yàn)操作技能的考查就不應(yīng)該僅僅只看學(xué)生是否能把實(shí)驗(yàn)完成，是否能把實(shí)驗(yàn)結(jié)果做出來，而是應(yīng)該更加注重對學(xué)生的科研態(tài)度、實(shí)驗(yàn)操作的規(guī)范程度及熟練程度的綜合考查，以對每一位學(xué)生做出科學(xué)的實(shí)驗(yàn)課評價。

（三）綜述論文的評價

綜述論文能夠反應(yīng)出某一領(lǐng)域在一定時期內(nèi)的研究工作進(jìn)展情況。通過閱讀綜述論文，研究者可以對某一領(lǐng)域的新技術(shù)、新進(jìn)展等有較全面的了解，更有利于自己研究工作的開展。

教師通過對學(xué)生撰寫的綜述論文的評價，能夠從以下幾個方面評判學(xué)生的綜合能力：所搜集的原始文獻(xiàn)資料的數(shù)量和水平、對所搜集的文獻(xiàn)資料的提煉加工程度、論文的組織寫作水平等。學(xué)生通過將自己的綜述論文交由授課教師評改，可以提高自己的學(xué)術(shù)水準(zhǔn)及寫作能力。

關(guān)于動物細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)課，授課教師可以讓學(xué)生撰寫關(guān)于細(xì)胞培養(yǎng)方面的綜述論文，比如，不同類型動物細(xì)胞培養(yǎng)方法的比較，哺乳動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)研究進(jìn)展，哺乳動物細(xì)胞培養(yǎng)中的注意事項(xiàng)等。學(xué)生們通過查找大量相關(guān)資料撰寫這些綜述性文章，可以學(xué)習(xí)到細(xì)胞培養(yǎng)方面的很多知識，為今后的學(xué)習(xí)和工作打下堅實(shí)的基礎(chǔ)。

四、結(jié)語

細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是對生命科學(xué)進(jìn)行探究的一項(xiàng)關(guān)鍵的技能[9]。隨著科技的日益發(fā)展，生命科學(xué)研究的不斷深入，細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)作為生物研究的一項(xiàng)基本操作技術(shù)，逐漸地深入到眾多與生命探索有關(guān)的領(lǐng)域當(dāng)中。

對于細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的教學(xué)也是在科技發(fā)展的大形勢下所必需的。同時為了提高教學(xué)質(zhì)量，趕上科技發(fā)展的步伐，我們應(yīng)該對細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)教學(xué)進(jìn)行改革。具體來講，授課教師應(yīng)當(dāng)打破傳統(tǒng)教學(xué)理念，利用當(dāng)今信息發(fā)展技術(shù)，結(jié)合現(xiàn)在生物發(fā)展的形勢，將理論與實(shí)踐相結(jié)合，以學(xué)生為主體，調(diào)動學(xué)生的積極性，激發(fā)學(xué)生的創(chuàng)新意識，提高他們獨(dú)立分析問題解決問題的能力。這樣，通過提高細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)課的教學(xué)質(zhì)量，我們可以為培養(yǎng)“高精尖”的創(chuàng)新型人才貢獻(xiàn)出一份力量。

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