2016年從業人員健康體檢志賀氏菌檢測結果分析及預防管理

胡靜華

[摘要] 目的 探討2016年從業人員健康體檢志賀氏菌檢測結果分析及預防管理。方法 選取2016年來該中心的餐飲與公共服務的從業人員，樣本數為79 947，并根據春、夏、秋和冬4個季節進行劃分，對樣本進行志賀氏菌核酸試劑盒的檢測，分析檢測結果，并提出預防措施。結果 從業人員體檢中志賀氏菌的檢出率，春季為0.020%（4/19 917）、夏季為0.025%（5/20 165）、秋季為0.020%（4/19 811）和冬季為0.020%（4/20 054），各季節檢出率的變化不大，差異無統計學意義（P>0.05）。結論 通過志賀氏菌核酸試劑盒進行PCR熒光檢測，并且分析志賀氏菌檢測結果，有助于判斷所檢出菌是否為志賀氏菌，同時通過加強預防消毒，切斷病原菌，有助于保證社會安全。

[關鍵詞] 從業人員；健康體檢；志賀氏菌；結果分析；預防管理

[中圖分類號] R194.3 [文獻標識碼] A [文章編號] 1672-5654（2018）02（a）-0158-02

隨著生活水平的提高，越來越多的人開始注重養生、保健，每年的定期健康體檢也必不可少。所謂的健康體檢是指通過醫學的手段，了解自身的身體情況，如健康狀況和疾病狀態，根據健康隱患和疾病線索，可以做到盡早發現疾病、盡早治療的目的，有效地抑制了疾病的擴大，減少了受檢者的痛苦[1]。從業人員中從事餐飲與公共服務的人員來講，每年的預防性健康體檢是必不可少的環節，檢查項目除了常規的化膿或滲出性皮膚病、活動性肺結核檢查及轉氨酶、沙門氏菌檢測外，志賀氏菌檢測也越來越被重視。志賀氏菌通過攝取的食物污染途徑即可傳播，常見的臨床癥狀是腹瀉、惡心、嘔吐、發燒等。志賀氏菌的血清可分為福氏志賀菌（B群）、鮑氏志賀菌（C群）、痢疾志賀菌（A群）、宋內氏志賀菌（D群）4種類型，其中福氏志賀菌是最為普遍的感染病毒[2]。目前，志賀氏菌的檢測方法除了病原菌的分離鑒定、生化試驗、凝集反應等方法外，志賀氏菌核酸試劑盒PCR熒光的檢測方法已逐步應用于臨床，該方法具有用量小、檢測迅速、靈敏度高等特點。該中心選取2016年對健康體檢的從業人員采用志賀氏菌核酸試劑盒的方法進行志賀氏菌檢測，分析檢測結果且提出預防管理措施，現總結如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取在該中心志賀氏菌檢測的樣本數為79 947，該樣本數來源于餐飲與公共服務的從業人員，其中春季的樣本數為19 917，夏季的樣本數為20 165，秋季的樣本數為19 811，冬季的樣本數為20 054。4個季節在樣本數方面差異無統計學意義（P>0.05），具有可比性。

1.2 方法

1.2.1 樣本處理 樣本選擇自然的糞便進行采集，并且挑選粘液部位的糞便，樣本量為2～3 g。將樣本放到增菌培養基中，該培養基選擇亞硒酸鹽胱氨酸增菌液，用量為3～5 mL，放置在37℃培養箱中培養4～6 h。

備注：①樣本采集后，要及時保存，并且盡量將樣本密閉送檢，避免樣本間出現交叉污染；②樣本采集后，要及時檢測，若不能及時檢測，存放到-20℃下，可以保存12個月；③樣本需要運輸時，冰袋的低溫運輸方式不可超過3 d；④樣本不能反復凍融，次數不能超過5次。

1.2.2 實驗室檢測方法 采取熒光PCR法進行志賀氏菌的檢測，其中志賀氏菌核酸檢測的試劑盒包括：核酸擴增反應液、酶混合液、志賀反應液、陽性對照、去RNA酶水、DNA提取液。試劑盒存放在-20℃中保存，用時將各個試劑融化后，短暫進行離心后使用。根據試劑盒的說明書中各個試劑的用量進行取樣至PCR反應管中，每次實驗時做好空白對照與陽性對照。將反應管放置到熒光PCR擴增儀中，并且設定相應參數：UNG酶處理（50℃下5 min，進行1個循環），預變性（95℃下5 min，進行1個循環），變性（95℃下10 s，進行40個循環），退火、延伸與檢測熒光（55℃下40 s，進行40個循環），其中熒光檢測的通道為Vic、Fam和Cy5。

1.3 評價標準

志賀氏菌陰性結果為沒有典型的S型擴增曲線或者CT值為Undet，同時內標對照具有典型的S型擴增曲線或者CT值≤30；志賀氏菌陽性結果為典型的S型擴增曲線或者CT值≤35.5，同時內標對照的結果與陰性結果一致。若樣本沒有出現典型的S型擴增曲線或者CT值為Undet，并且內標對照也同樣如此，則實驗判定無效，需重新檢測[3]。

1.4 統計方法

觀察比較每個季節的數據，應用SPSS 20.0統計學軟件完成數據的分析，計數資料用百分率表示，行χ2檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

從業人員體檢中志賀氏菌的檢出率，4個季節的變化不大，除了夏季的檢出率為0.025%外，其他季節為0.020%，差異無統計學意義（χ2=0.413，P=0.8，P>0.05）。

3 討論

志賀氏菌具有較強的致病力，可產生內外毒素，因此很容易引起細菌性痢疾[4]。志賀氏菌感染后的臨床表現為腹瀉、惡心、嘔吐、發燒等。目前，志賀氏菌的預防通常采用口服減毒的活菌苗，如2a變異株和Sd株等，雖然該活菌苗具有一定的預防能力，但是它具有服用量較大、維持時間短、免疫力較弱、型間沒有保護性交叉免疫等缺點，因此在臨床應用具有一定難度。一旦出現志賀氏菌感染引起的細菌性痢疾，通常采用中西藥進行治療，其中西藥通常使用氨芐青霉素、氯霉素或磺胺類等藥物；中藥使用馬齒筧、白頭翁、黃連與黃柏等藥物。總之，無論作為公眾服務行業還是餐飲行業，都需要養成良好的衛生習慣，做到勤洗手與多消毒，從而可以切斷病原菌的傳播。

隨著生活水平的提高，越來越多的人躋身于公共區域，來緩解生活及工作壓力，因此公共區域的衛生安全需重點關注，尤其是在公眾服務或餐飲行業要求從業人員進行必要的預防性健康體檢。所謂預防性健康體檢是指通過醫學的手段，了解自身的身體情況，如健康狀況和疾病狀態，根據健康隱患和疾病線索，可以做到盡早發現疾病、盡早治療的目的，有效地抑制了疾病的擴大，減少了受檢者的痛苦[5-7]。目前，預防性健康體檢的檢查項目包括化膿或滲出性皮膚病、活動性肺結核檢查及轉氨酶、志賀氏菌、沙門氏菌檢測。志賀氏菌通過攝取的食物污染途徑即可傳播，它具有較強的致病力，可產生內外毒素，因此很容易引起細菌性痢疾，其臨床癥狀是腹瀉、惡心、嘔吐、發燒等。志賀氏菌的血清可分為福氏志賀菌、鮑氏志賀菌、痢疾志賀菌、宋內志賀菌4種類型[8-9]。目前，除了病原菌的分離鑒定、生化試驗、凝集反應等方法外，志賀氏菌核酸試劑盒PCR熒光的檢測方法已逐步應用于臨床，該方法具有用量小、檢測迅速、靈敏度高等特點。該研究首先對樣本進行密封送檢后，進行增菌培養；按照志賀氏菌核酸檢測的試劑盒中的說明書進行樣品準備，并將制備好的樣品放置到PCR熒光擴增儀中進行熒光擴增，擴增的程序先后為UNG酶處理、預變性、變性、退火、延伸與檢測熒光步驟，并根據內標對照與樣本的結果，分析是否為志賀氏菌陽性反應，值得一提的是，若內標對照和樣本的結果都顯示為沒有典型的S型擴增曲線或者CT值為Undet時，則說明實驗失效，需要重新進行檢測。目前，采用口服減毒的活菌苗方法進行預防志賀氏菌感染，因為該方法的缺點較多，很難大量應用到臨床，因此需從業人員做到勤洗手與常消毒，有利于切斷病原菌，一旦感染志賀氏菌通常采用中藥與西藥的方式進行治療。總之，通過志賀氏菌核酸試劑盒進行PCR熒光檢測，并且分析志賀氏菌檢測結果，有助于判斷所檢出菌是否為志賀氏菌，同時通過加強預防消毒，切斷病原菌，有助于保證社會安全。

[參考文獻]

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（收稿日期：2017-11-06）