布魯氏菌病假陽性血清的制備方法

余紹榮 侯明省 馮德正 張書光

（1.隴川縣動物疫病預防控制中心，云南德宏 678700；2.梁河縣動物疫病預防控制中心，云南德宏 678700；3.德宏州動物疫病預防控制中心，云南德 678400）

布魯氏菌病（又稱布魯菌病，簡稱布病）是由布魯氏菌感染引起的一種人畜共患疾病。患病的羊、牛等疫畜是布病的主要傳染源，布魯氏菌可以通過破損的皮膚黏膜、消化道和呼吸道等途徑傳播。急性期病例以發熱、乏力、多汗、肌肉、關節疼痛和肝、脾、淋巴結腫大為主要表現。慢性期病例多表現為關節損害等。布病是我國《傳染病防治法》規定的乙類傳染病。

傳染源：羊在國內為主要傳染源，其次為牛和豬。傳染途徑：牧民接羔為主要傳染途徑，獸醫為病畜接生也極易感染。此外，剝牛羊皮、剪打羊毛、擠乳、切病毒肉、屠宰病畜、兒童玩羊等均可受染，病菌從接觸處的破損皮膚進入人體。實驗室工作人員常可由皮膚、黏膜感染細菌。進食染菌的生乳、乳制品和未煮沸病畜肉類時，病菌可自消化道進入體內。此外，病菌也可通過呼吸道黏膜、眼結膜和性器官黏膜而發生感染。易感人群：人群對布魯菌普遍易感。2010年12月間，某大學動物醫學學院使用了不具檢疫合格證明、未經現場檢疫的實驗山羊，導致從2011年3月14日至5月間，27名學生和1名教師相繼確診感染布病。因此很有必要制備出對人體無感染能力的布魯氏菌病假陽性血清，用于實驗比對、教學示范和基層培訓。

1 材料與方法

1.1 材料

布病陰性牛羊血清，真空采血管（普通生化管、抗凝管），布病虎紅平板凝集試驗抗原，布病試管凝集試驗抗原。

1.2 使用抗凝管采取布病陰性牛羊血液

使用抗凝管采血（布病陰性牛10頭，羊5只），分離血清后編號為B1-B10，C1-C5。

1.3 虎紅平板凝集試驗

將分離到的陰性血清使用虎紅平板凝集試驗進行檢測，記錄檢測結果。

2 實驗結果

B1～B10和C1～C5號血清和布病抗原混合后3min內均出現凝集（見表1、表2）：

表1 虎紅平板凝集試驗結果（牛）

表2 虎紅平板凝集試驗結果（羊）

3 討論

在一次采樣過程中由于疏忽未帶普通生化管，而只準備了抗凝管，由于抗凝管也可以分離出血清就使用抗凝管進行采血，在隨后的虎紅平板凝集試驗檢測中發現全部都是陽性，重新用普通管采血后進行復檢，結果全部陰性，因此判定為假陽性。鑒于布魯氏菌病是人畜共患病，開展這個實驗具有高危險性，經過反復思考，這個小錯誤恰好可以被我們利用。因此我們對這種現象反復進行實驗，實驗結果表明，實驗采集健康牛羊的抗凝血均檢測到布魯氏菌病抗體，為布魯氏菌病假陽性。這種血清來源廣泛并且可以大量制備，用于實驗比對、教學示范和基層培訓中，既可以起到示范作用，又能保障參與人員的安全。