血腺苷脫氨酶在1型糖尿病及其急慢性并發(fā)癥患者中的檢測(cè)意義

周佳雁 華飛 蔣曉紅 唐暎 王龍

常州市第一人民醫(yī)院內(nèi)分泌科（江蘇常州213000）

糖尿病是胰島素分泌相對(duì)或絕對(duì)不足引起的糖代謝紊亂性疾病。目前有研究報(bào)道［1?3］血清腺苷脫氨酶（adenosine deaminase，ADA）在2型糖尿病患者中水平明顯增高，其可能機(jī)制為ADA可促進(jìn)胰島素抵抗，從而進(jìn)一步影響糖脂代謝。有研究表明［4］，在 1 型 糖尿病（type 1 diabetes group，T1DM）患兒中檢測(cè)到ADA1基因的表達(dá)，推測(cè)ADA可能與T1DM發(fā)生發(fā)展有關(guān)。但目前關(guān)于腺苷脫氨酶與T1DM及其并發(fā)癥的研究較少。T1DM患者的免疫功能紊亂與細(xì)胞免疫、T淋巴細(xì)胞功能障礙有關(guān)。ADA是嘌呤核苷代謝的關(guān)鍵酶之一，其分別催化腺苷和脫氧腺苷脫氨酸到肌苷和脫氧肌苷。ADA是淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞，巨噬細(xì)胞系統(tǒng)分化和增殖所必需的酶，用于監(jiān)測(cè)幾種免疫系統(tǒng)疾病。該酶被認(rèn)為是細(xì)胞免疫的合適標(biāo)記物。T細(xì)胞參與由B細(xì)胞介導(dǎo)的腺苷信號(hào)傳導(dǎo)。腺苷可降低T細(xì)胞的活化。存在于B淋巴細(xì)胞表面的ADA可能使腺苷信號(hào)失活。ADA包括具有獨(dú)特生化特性的2種同工型。ADA1在淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞中活性最高的細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)，而ADA2是正常受試者血清中主要的同種型，在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、結(jié)核病、艾滋病和糖尿病等炎癥性疾病中大量增加［1］。本研究檢測(cè)184例T1DM患者的ADA與糖脂代謝水平及糖尿病并發(fā)癥相關(guān)性，以探討ADA在T1DM患者中的檢測(cè)意義。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象 以2009-2015年于常州第一人民醫(yī)院內(nèi)分泌科住院診療的184例T1DM患者（年齡14～87歲，男107例，女77例）為T1DM組，根據(jù)罹患糖尿病并發(fā)癥情況分為單純T1DM無(wú)并發(fā)癥組（sT1DM組）55例，糖尿病急性并發(fā)癥組（acute dia?betes complications group，aT1DM組）即糖尿病酮癥酸中毒47例；糖尿病慢性并發(fā)癥組（chroni diabe?tes complications，cT1DM組）82例：糖尿病神經(jīng)病變71例，糖尿病腎病17例，糖尿病視網(wǎng)膜病變19例，糖尿病大血管病變13例。所有糖尿病患者均符合1999年WHO關(guān)于糖尿病診斷標(biāo)準(zhǔn)，糖尿病分型主要依據(jù)臨床特征，同時(shí)符合中華醫(yī)學(xué)會(huì)糖尿病分會(huì)關(guān)于中國(guó)T1DM的診治指南，包括:（1）起病年齡：6月齡至成年人；（2）起病方式：大多較急，多數(shù)患者有口干、多飲、多尿伴體重下降，部分患者直接表現(xiàn)為脫水、循環(huán)衰竭或昏迷等糖尿病酮癥酸中毒癥狀；（3）治療方式：依賴胰島素治療時(shí)間超過(guò)6個(gè)月；（4）一般特征：無(wú)肥胖及黑棘皮病。其中成人起病的T1DM診斷標(biāo)準(zhǔn)采用《中華醫(yī)學(xué)會(huì)糖尿病分會(huì)關(guān)于成人隱匿性自身免疫糖尿病診療的共識(shí)》中的診斷標(biāo)準(zhǔn)［5］。同時(shí)排除其他自身免疫性疾病、肝炎、肝硬化、顯著肝功能不全、腫瘤性疾病、血液系統(tǒng)疾病及其他原因?qū)е碌纳窠?jīng)系統(tǒng)疾病、眼病及腎臟疾病。納入同期體檢的患者108例為正常對(duì)照組（concrol group，CN組），其中男39例，女69例，年齡16～71歲。

1.2 研究方法 對(duì)納入對(duì)象測(cè)量身高、體質(zhì)量，計(jì)算體質(zhì)指數(shù)（BMI），使用全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定血空腹血糖（fasting blood glucose，F(xiàn)PG）、血清ADA、血清總膽固醇（total cholesterol，TC）、血清三酰甘油（triacylglycerol，TG）、高密度脂蛋白膽固醇（high density lipoprotein cholesferol，HDL?C）、低密度脂蛋白膽固醇（low density lipoprotein cholestorol，LDL?C）。采用西門子DCA Vantage糖化血紅蛋白分析儀測(cè)定糖化血紅蛋白（glycated hemoglobin，HbA1c）。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 22進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，所有正態(tài)分布計(jì)量資料采用±s表示，組間均數(shù)比較采用單因素方差分析。計(jì)數(shù)資料的比較采用卡方檢驗(yàn)，兩個(gè)連續(xù)變量間相關(guān)性比較采用Pear?son相關(guān)性分析，多變量分析采用線性回歸分析。P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 T1DM患者與正常人群血清腺苷脫氨酶水平比較 T1DM患者的血清ADA水平顯著高于正常對(duì)照人群，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見(jiàn)圖1。

圖1 T1DM患者與正常人群血清ADA水平的比較Fig.1 Comparison of blood adenosine deaminase levels between patients with or without type 1 diabetes mellitus

2.2 各組患者基本資料及臨床指標(biāo)比較 與sT1DM組相比，cT1DM組患者年齡、病程、收縮壓（SBP）、舒張壓（DBP）、ADA顯著升高，aT1DM組HbA1c、TG顯著升高，而ADA、HDL?C水平顯著降低；與cT1DM組相比，aT1DM組患者年齡、病程、BMI、SBP、DBP、ADA、HDL?C 水平顯著降低，HbA1c、TG水平顯著偏高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見(jiàn)表1、圖2。

圖2 T1DM患者各組血清ADA水平比較Fig.2 Comparison of serum ADA levels in patients with T1DM patients

2.3 T1DM患者中空腹血糖與血ADA相關(guān)分析 結(jié)果提示ADA與空腹血糖呈顯著相關(guān)正相關(guān)（P＜0.05），相關(guān)系數(shù)為0.156。見(jiàn)圖3。

表1 1型糖尿病患者各組間基本資料及臨床指標(biāo)比較Tab.1 Comparison of basic data and clinical indexes among patients among different groups with type 1 diabetes mellitus x±s，中位數(shù)（四分位數(shù)）

圖3 T1DM患者空腹血糖與血清ADA水平相關(guān)性分析Fig.3 Correlation analysis of fasting blood glucose and serum ADA level in T1DM patients

2.4 T1DM慢性急性并發(fā)癥危險(xiǎn)因素Logistics回歸分析 分別以是否罹患T1DM慢性或急性并發(fā)癥應(yīng)變量，其他臨床及生化指標(biāo)為自變量，行多元線性回歸分析，結(jié)果見(jiàn)表2、3，最終腺苷脫氨酶進(jìn)入方程，為發(fā)生慢性并發(fā)癥的獨(dú)立危險(xiǎn)因素（OR：1.159，95%CI：1.044～1.286），為罹患急性并發(fā)癥的危險(xiǎn)因素（OR：0.857，95%CI：0.748～0.981）。

3 討論

T1DM是以病毒感染為常見(jiàn)誘因，免疫紊亂為特征的代謝紊亂性疾病，這些免疫紊亂與細(xì)胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng)有關(guān)，T細(xì)胞功能異常與胰島功能缺陷相關(guān)。腺苷是一種遍布人體細(xì)胞的內(nèi)源型核苷，主要由受損的細(xì)胞或炎細(xì)胞釋放，是用于合成ATP的重要中間體。腺苷通過(guò)作用于腺苷受體起到生物學(xué)作用。ADA是一種與機(jī)體細(xì)胞免疫活性有關(guān)的核酸代謝酶，其作用是催化水解腺苷生成肌苷和氨。ADA有兩種主要的同工酶，分別為ADA1和ADA2。ADA廣泛分布于人體組織中，在T淋巴細(xì)胞中活性最高，被認(rèn)為是細(xì)胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng)的一個(gè)很好的標(biāo)記。高水平的ADA在很多具有細(xì)胞介導(dǎo)的免疫性疾病中均有報(bào)道，而血清ADA水平的改變被認(rèn)為與預(yù)測(cè)1型糖尿病免疫功能障礙相關(guān)。

本研究比較了T1DM患者與正常人群間血ADA的水平，結(jié)果顯示T1DM患者血ADA水平高于正常人群組，兩兩相關(guān)分析，ADA與FBG正相關(guān)（P＜0.05）。這與其他研究報(bào)道結(jié)果一致［6］。但目前關(guān)于ADA在T1DM中的作用機(jī)制尚未明確。升高的血清ADA1同工酶由于定位在細(xì)胞內(nèi)，因此其水平的升高可歸結(jié)于廣泛的細(xì)胞壞死或淋巴樣細(xì)胞的增加。ADA2僅在單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)。ADA2可刺激CD4細(xì)胞的增殖，誘導(dǎo)單核細(xì)胞分化為巨噬細(xì)胞，并在感染和慢性炎癥期間釋放。SAPKOTA等［1］研究發(fā)現(xiàn)，ADA僅僅與患者血糖顯著相關(guān)，與血脂、BMI無(wú)關(guān)，因此認(rèn)為ADA是除HbA1c外［7-8］能早期監(jiān)測(cè)診斷疾病的新指標(biāo)。ADA被認(rèn)為是早期檢測(cè)診斷T1DM的新手段這可能是因?yàn)槠渌降脑龈吲c患者免疫功能改變有關(guān)。

本文進(jìn)一步結(jié)果顯示T1DM患者血ADA水平與糖尿病并發(fā)癥密切相關(guān)：結(jié)果顯示，aT1DM組的ADA水平低于cT1DM組（P＜0.05）。進(jìn)一步行Lo?gistic回歸分析，結(jié)果提示ADA水平的升高是罹患T1DM慢性并發(fā)癥的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，ADA水平的下降是罹患T1DM急性并發(fā)癥的保護(hù)性因素，這與COLGAN等［9］研究結(jié)果一致。COLGAN等［9］認(rèn)為機(jī)體受到損傷時(shí)，受損細(xì)胞釋放ATP，后者經(jīng)CD39、CD73酶化作用形成腺苷，通過(guò)與細(xì)胞表面的腺苷受體結(jié)合產(chǎn)生一系列連鎖反應(yīng)。在急性損傷狀態(tài)下，例如糖尿病性酮癥酸中毒，體內(nèi)腺苷水平升高，而ADA水平未及時(shí)相應(yīng)增高，腺苷受體激活可起到促傷口愈合、抗炎癥反應(yīng)的作用，是機(jī)體的一種保護(hù)性反應(yīng)。

表2 T1DM慢性并發(fā)癥危險(xiǎn)因素Logistic回歸分析Tab.2 Logistic regression analysis of risk factors for chronic complications of type 1 diabetes mellitus

表3 T1DM急性并發(fā)癥危險(xiǎn)因素Logistic回歸分析Tab.3 Logistic regression analysis of risk factors for acute complications of type 1 diabetes mellitus

在慢性疾病中，包括糖尿病，腺苷可促使胰島素抵抗，導(dǎo)致心肺腎肝等重要器官纖維化從而導(dǎo)致靶器官功能不全。有研究［10?11］報(bào)道糖尿病腎病患者血清ADA升高顯著，且與尿微量蛋白呈顯著正相關(guān)，認(rèn)為血清ADA活性增高使腺苷受體途徑表達(dá)異常，促糖尿病腎病的發(fā)生及腎臟纖維化。有研究［12?13］發(fā)現(xiàn)，在糖尿病視網(wǎng)膜病變患者中，ADA的同工酶ADA2通過(guò)上調(diào)巨噬細(xì)胞產(chǎn)生的細(xì)胞因子參與視網(wǎng)膜屏障的破壞。KATZ等［14］研究報(bào)道體內(nèi)ADA水平的異常通過(guò)影響腺苷受體通路表達(dá)改變可影響糖尿病神經(jīng)病變的發(fā)生發(fā)展。這與本研究結(jié)果相同，筆者認(rèn)為血清ADA水平的增高是預(yù)測(cè)T1DM慢性并發(fā)癥發(fā)生的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。

綜上所述，ADA在T1DM糖代謝及并發(fā)癥的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程中起到重要作用。目前檢測(cè)血ADA水平越來(lái)越受重視，被認(rèn)為是疾病早期診斷的重要指標(biāo)。但目前關(guān)于T1DM與ADA及其亞型的研究較少，進(jìn)一步明確ADA在T1DM中的作用機(jī)制、信號(hào)傳導(dǎo)通路可為早期檢測(cè)、診斷、治療及預(yù)防T1DM提供新思路。

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