清肝降濁顆粒制備工藝研究

初洪波，劉艷華，成光宇

（長春中醫藥大學附屬醫院，長春 130021）

“清肝降濁顆粒”是由長春中醫藥大學與吉林修正藥業集團股份有限公司合作，以產學研的方式，研制開發的用于各類型脂肪肝治療的中藥復方新藥。清肝降濁顆粒的處方來源于臨床經驗方，由黃芪、五味子、刺五加、決明子、陳皮、竹茹等中藥組成，具有益氣活血，化瘀通絡的功能，主要用于各年齡段脂肪肝（氣虛血瘀型）的治療[1-8]。本研究采用正交試驗法優選清肝降濁顆粒的提取工藝。

1 實驗材料

1.1 藥品與試劑 黃芪、五味子、刺五加、決明子、陳皮、竹茹藥材購于吉林省北藥集團。五味子醇甲對照品（購于中國食品藥品檢定研究院，批號110857-201201）。試劑甲醇為色譜純，其余試劑均為分析純，水為超純水。

1.2 儀器 高效液相色譜儀（日本島津LC-2010A），紫外檢測器，Lab solution色譜數據工作站，CP225D型電子分析天平（德國塞多利斯天平有限公司），DZF型真空干燥箱（上海博迅）。

2 處方及制備工藝

2.1 提取工藝路線的設計[9-11]本處方是在臨床基礎上總結出來的經驗方，由黃芪、五味子、刺五加、決明子、陳皮、竹茹等中藥組成的湯劑，有較好的療效，為了保證療效，仍采用水煎煮的方法進行提取。

2.2 提取工藝條件的研究[12-14]對水提取來說，影響提取效果的因素主要有3個，即：加水倍數、煎煮次數、煎煮時間。使用正交表 L9（34）安排試驗，每個因素選擇了3個水平，見表1。

表1 水煎煮的因素水平表

2.2.1 考察指標 以出膏率和五味子醇甲含量為水提工藝研究的考察指標。

2.2.2 樣品制備 按處方比例稱取黃芪15 g、五味子10 g、刺五加10 g、決明子10 g、陳皮10 g、竹茹10 g為1份，共取9份，按照因素水平表的條件進行試驗，濾過，合并提取液，減壓濃縮，減壓干燥，稱重。

2.2.3 正交試驗樣品中紅景天苷含量測定 色譜條件與系統適應性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅為填充劑；以甲醇為流動相A ，水為流動相B ，按表2的規定進行梯度洗脫；檢測波長為250 nm。

表2 梯度洗脫數據

2.2.3.1 對照品溶液制備 取五味子醇甲對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每l mL含0.3 mg的溶液，即得。

2.2.3.2 供試品溶液制備 取各組正交試驗樣品粉末（過三號篩）約0.5 g，置25 mL量瓶中，加甲醇適量，超聲處理（功率250 W，頻率20 kHz）30 min，放冷，加甲醇至刻度，搖勻，濾過，取續濾液，即得。

2.2.3.3 測定方法 分別精密取對照品溶液與供試品溶液各10 μL，注入液相色譜儀，測定，計算，即得。結果見表3。

以出膏率和五味子醇甲含量的綜合評分為考察指標進行分析，結果見表4～5。

表3 正交試驗數據

表4 正交試驗 [L9（34 ）] 及結果

表5 水煎煮提取的方差分析

由方差結果可知，各因素對試驗結果影響的重要性依次為C＞B＞A，即煎煮次數C是主要影響因素，煎煮時間B及加水量A是次要影響因素。結合直觀分析，煎煮法條件宜為A3B3C3，即：加8倍量水煎煮3次，每次2 h。由于方差分析得出A、B因素的任何水平對試驗結果均無顯著性影響的結論，為降低生產成本，節約提取時間，綜合分析各因素對試驗結果影響的重要程度，確定A3B2C3為最佳提取方案。即：加8倍量水煎煮3次，每次1.5 h。

2.3 制劑成型性研究[15-17]由于干浸膏有很強的吸濕性，直接制成顆粒在制備和貯存過程中都有一定的困難，需加入適量輔料以滿足制備工藝和制劑要求，一般按干浸膏:輔料＝1:0.5～2 的比例加入輔料。

2.3.1 輔料的選擇和用量 糊精、蔗糖是常用的輔料，根據干浸膏有很強吸濕性的特點，經過試驗摸索，確定干浸膏:輔料＝1:2 的比例加入適量糊精，用量是按處方在半成品（制顆粒前）時，加輔料至1000 g。

2.3.2 制顆粒所用濕潤劑的選擇 由于干浸膏、糊精、蔗糖混合后仍有一定的吸濕性，故以不同濃度的乙醇為濕潤劑，制軟材，再制濕顆粒，結果見表6。

表6 不同濕潤劑制濕顆粒結果

由以上結果，選80%乙醇為濕潤劑制顆粒。

2.3.3 濕顆粒干燥溫度的考察 對濕顆粒干燥，選用了不同溫度，干燥6 h，結果見表7。

表7 濕顆粒干燥溫度試驗結果

根據實驗結果，選擇濕顆粒干燥條件為：干燥溫度80 ℃，干燥時間6 h。

最后確定的清肝降濁顆粒提取工藝為：加8倍量水，煎煮3次，每次1.5 h，濾過，合并濾液，濃縮至相對密度為1.30～1.35（80 ℃）浸膏，減壓干燥，粉碎成細粉，加入2倍量的糊精，混勻，以80%乙醇為濕潤劑，制成顆粒，干燥，整粒，即得。

3 小結

本試驗主要采用正交試驗對清肝降濁顆粒的提取工藝進行了優化，確定了最佳工藝條件。通過對制劑成型性的考察，選擇了糊精做為輔料。實驗所制得的清肝降濁顆粒呈棕黃色、顆粒成型好，既保證了清肝降濁處方中藥材有效成分的提出，又方便了患者的使用。

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