溫度和餌料對寬體金線蛭仔蛭生長和存活的影響

馬春慶，楊代勤

(長江大學動物科學學院,湖北 荊州 434025)

寬體金線蛭(Whitmaniapigrawhitmania)屬環節動物門(Annelida)蛭綱(Hirudinea)無吻蛭目(Arhynchobdellida)黃蛭科(Haemopidae)金線蛭屬(Whitmania)[1]，又名牛螞蟥、金邊大螞蟥、寬身螞蟥，是我國傳統的藥用水生動物。從水蛭唾液提取分離得到的一種多肽水蛭素[2]，對凝血酶有極強的抑制作用，是迄今發現的活性最強的特異性凝血酶抑制劑。

國內外對日本醫蛭(Hirudonipponia)的研究已有較多報道，但對寬體金線蛭的研究則多側重于藥理和生理方面[3～6],包括藥理活性成分的提取和關于其形態結構、呼吸、生長和攝食規律等方面的研究，尤其是在其唾液分泌物中發現的含有肝素及抗血栓素等的化學成分研究[7]。近年來，水蛭的藥用范圍已延伸到心血管系統、腦血管系統、消化系統和泌尿系統[8]。史紅專等[9，10]初步探究了寬體金線蛭的耗氧率與窒息點，確定了寬體金線蛭的最佳產卵溫度、體重及卵繭的最適孵化溫度。高明等[11]通過對寬體金線蛭食性的研究，得出寬體金線蛭以攝取螺類和河蚌等軟體動物的汁液為主，也攝食植物碎屑、有機質、微生物、蠕蟲和水蚯蚓等的結論，與王安綱等[12]得出的結果一致。但目前對于剛孵化出的仔蛭培育的最適溫度和適宜的開口餌料的了解還不多，影響仔蛭生長和存活的因子還有很多也不確定。為了進一步研究溫度、餌料對早期仔蛭生長和存活率的影響，本研究采用不同溫度和餌料對仔蛭進行試驗，分別探討了溫度和餌料對寬體金線蛭生長的影響，以為寬體金線蛭的人工繁育提供科學依據。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

試驗水蛭苗種為長江大學水產養殖基地自繁自育、同一批次產出的寬體金線蛭仔蛭，平均體重為(0.0184±0.0061)g,平均體長為(1.01±0.17)cm，體格健壯、活性較強、體表無明顯傷痕；試驗所用活體餌料均來自于長江大學動物科學學院水產養殖基地池塘。

試驗材料取回后均放置在設有防逃裝置的水桶內，置于室內，恒溫25℃，暫養3d后開始試驗。

1.2 試驗方法

試驗在長江大學水產養殖基地實驗室進行。

1)溫度對寬體金線蛭仔蛭生長和存活的影響試驗 采用12個相同規格(540mm×250mm×400mm)的藍色水族箱，保持水位高度為25cm，設置4個試驗組，用加熱棒進行控溫，溫度分別控制為15、20、25℃和30℃，每個試驗組各設2個平行，每3箱為1個試驗組，均移入100條仔蛭。試驗期間，12個水族箱每次均投喂相同的餌料，投喂量均為每箱30個螺螄。

2)餌料對寬體金線蛭仔蛭生長和存活的影響試驗 采用9個相同規格(540mm×250mm×400mm)的藍色水族箱，水溫均控制為26℃，每箱移入100條仔蛭。每3箱為1個試驗組，分別投喂蛋黃、輪蟲(Rotifer)+中華圓田螺(Cipangopaludinacahayensis)、輪蟲+靜水椎實螺(Lymnaeastagnalis)，每箱每天投喂2次，每次投喂量分別為蛋黃0.5個、輪蟲50mL(50個/mL)+中華圓田螺(平均0.1770±0.0660g)30個、輪蟲50mL(50個/mL)+靜水椎實螺(平均0.0637±0.0085g)30個。

每天下午5：00對各個水族箱進行換水，用虹吸法排掉底部污物，保持水質的清新。

1.3 指標測定、計算與處理

試驗為期25d，結束后，將所有幼蛭用75%酒精進行麻醉，置于裝有目測微尺的雙筒解剖鏡下，測仔蛭體長；隨后將仔蛭放于濾紙上，用電子天平稱其重量(精確到0.0001g)，用鑷子輕輕夾取仔蛭后再稱量濾紙的重量(同樣精確到0.0001g)，同時統計存活率。按下述公式計算各個試驗組的日增重、日增體長。

日增重=(最終平均干重-初始平均干重)/25

日增體長=(最終平均體長-初始平均體長)/25

存活率=(存活條數/初始條數)×100%

試驗數據數據經Excel 2007處理后，采用SPSS 13.0軟件進行單因素方差分析。

2 結果與分析

2.1 不同溫度條件下水蛭苗種的生長速率

試驗結果如表1所示。方差分析結果顯示，不同溫度條件下仔蛭的生長速度和存活率存在顯著性差異。其中，25℃時，寬體金線蛭仔蛭的生長速度最快,顯著高于其他試驗組(P<0.05)，日增體重達到0.0040g，日增體長達到0.0276cm，存活率也最高，為83.2%；水溫在15℃時，仔蛭的生長速度最慢，日增體重僅為0.0017g，日增體長僅為0.0071cm，顯著低于其他試驗組仔蛭的生長速度和存活率(P<0.05)，但其存活率要高于30℃試驗組仔蛭的存活率。20℃時仔蛭存活率(80.5%)與25℃下的最高存活率(83.2%)沒有顯著差異，生長速度差異也不顯著。

表1 不同溫度條件下寬體金線蛭仔蛭生長速度及存活率

注：同列數據后不同字母者表示組間差異性顯著(P<0.05)，表2同。

2.2 不同餌料下水蛭苗種的生長速率

試驗結果如表2所示，經方差分析可知，投喂不同的餌料，寬體金線蛭仔蛭的日增體長、日增重及存活率差異顯著(P<0.05)，以輪蟲和靜水椎實螺為餌料的仔蛭存活率最高，為87.3%，日增體長達到0.0260cm，日增體重達0.0048g，顯著高于其他試驗組仔蛭的存活率和生長速度(P<0.05)；投喂輪蟲+中華圓田螺的仔蛭存活率和日增體重都要顯著低于輪蟲+靜水椎實螺的試驗組，而兩組的日增體長并沒有顯著差異；蛋黃餌料組仔蛭的日增體重、日增體長僅為0.0022g和0.0172cm，存活率也最低，僅為60.1%，說明餌料采用輪蟲和靜水椎實螺投喂效果最好，采用蛋黃投喂效果最差。

表2 不同餌料下寬體金線蛭仔蛭生長差異

3 討論與結論

3.1 溫度對寬體金線蛭仔蛭生長和存活的影響

水生生物的生長發育同時受遺傳和外界環境因子的影響，而溫度是影響水生生物生長發育最為重要的環境因子，能直接影響參與生物體某些活動所需酶的生物學活性，影響其生命活動的代謝效率以及代謝過程中的能量收支，從而對發育期生物的生長和發育產生影響[13]。寬體金線蛭是變溫動物，當溫度范圍在適宜其仔蛭生長的范圍之間，隨著溫度的升高，仔蛭的攝食效率和食物轉化效率會逐步提高，生長速度也會隨之加快。研究表明，適宜寬體金線蛭生長的水溫范圍為15～30℃[14～16]，此結論與本研究結果基本一致，當水溫從15℃逐漸升高到25℃，寬體金線蛭仔蛭的生長速度逐漸變快、存活率也越來越高；但當水溫達到30℃時，仔蛭代謝發生紊亂，常表現為躁動不安，在水族箱內四處游動，該溫度條件已經成為仔蛭生長的脅迫因子[17]，導致仔蛭死亡。本研究結果顯示，培育寬體金線蛭仔蛭的溫度范圍最好控制在20～25℃之間，能夠有效保證仔蛭長期處于快速生長的狀態，同時培育存活率也高。

3.2 餌料對寬體金線蛭仔蛭生長的影響

自然條件下很多魚類都有相對應的開口餌料生物，魚類仔魚期攝食、生長和成活的內在關系,也已成為國際上魚類早期生活史前沿研究的主要內容之一[18]，而仔魚開口期的外源性營養對仔魚的生長和成活起著決定性作用。因此，當仔魚進入攝食期，及時在最恰當的時機投喂開口餌料，能提高苗種的培育成活率[19]。

寬體金線蛭為動物食性，在水體中多以螺螄、河蚌、河蜆等軟體動物的汁液為食，很少攝食脊椎動物的血液[11，12]。本研究采用蛋黃、輪蟲+靜水椎實螺、輪蟲+中華圓田螺對寬體金線蛭仔蛭進行開口餌料的選擇試驗，從試驗結果來看，投喂輪蟲+靜水椎實螺的寬體金線蛭仔蛭成活率最高，生長速度最快，顯著高于投喂蛋黃、輪蟲+中華圓田螺的試驗組(P<0.05)。輪蟲營養豐富，可供仔蛭攝食，在水體中也可以起到加快物質循環的速度。靜水椎實螺不具角質或者石灰質的厴，而且肌肉和體液中富含氨基酸等營養物質，方便仔蛭攝食，仔蛭的存活率也可以得到保證；相對而言，具有厴的中華圓田螺不易被寬體金線蛭仔蛭捕獲，而且還可能在仔蛭攝食時夾傷仔蛭。所以輪蟲+靜水椎實螺是寬體金線蛭仔蛭最好的開口餌料。

綜上所述，在人工培育寬體金線蛭仔蛭時，需要將仔蛭生活的環境溫度控制在20～25℃之間，最好不要超過30℃，同時對其投喂輪蟲+靜水椎實螺，可以達到很好地培育效果；當餌料不足時，可輔助投喂部分中華圓田螺，但需要注意先進行消毒處理，充分保障餌料的充足和安全性，達到最大利益。

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