白細胞介素-1受體拮抗劑在NAFLD患者的變化和意義

王瀚 陳進 臧淑妃 施軍平 杜衛東?

在歐美、日本等國家非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）是慢性肝病的首要病因，在我國僅次于病毒性肝炎，居第2位。NAFLD的發病率呈上升趨勢，在發達國家發病率為20%～30%，非酒精性脂肪性肝炎（NASH）發病率10%～20%，肝硬化發病率2%～3%［1-2］。研究顯示，NASH患者中以脂肪變及小葉內炎癥表現較突出，而白介素-1受體拮抗劑（IL-1RA）具有抗炎作用［3-7］，能夠減輕IL-1引起的一系列生理和病理反應，但與NAS積分及NAFLD病程進展的相關性尚不明確。本文探討IL-1RA在NAFLD患者中的變化和意義。

1 臨床資料

1.1 一般資料 2012年1月至 2016年12月杭州師范大學附屬醫院收治的NAFLD患者，經肝穿刺活檢有NAS評分的患者51例，所有患者均符合世界胃腸病學組織（WGO）發布的非酒精性脂肪肝病和非酒精性脂肪性肝炎的全球指南。排除淤膽性肝病，無長期用藥史，無長期飲酒病史，近期無胃腸道手術史及懷孕史。所有患者血清學檢測甲、乙、丙、戊、巨細胞病毒、EB病毒指標為陰性，自身抗體檢測陰性。另選擇體檢健康人群16例為正常對照組。

1.2 方法 記錄飲酒史、藥物使用史、家族遺傳疾病史，測量身高（cm）、體質量（kg），計算體質指數（BMI）。（1）生理生化指標及血清IL-1RA水平檢測：抽取受檢者晨起空腹12h肘靜脈血3～4 ml，3000 r/min，離心10min，分離血清置-80℃冰箱凍存。采用雙抗夾心ELISA法測定血清IL-1RA水平。體檢中心生化檢測丙氨酸轉氨酶（ALT）、天冬氨酸轉氨酶（AST）、谷氨酰轉肽酶（GGT）、總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白（LDL）、高密度脂蛋白（HDL）、尿酸（UA）、空腹血糖（GLU）、空腹胰島素（INS），計算胰島素抵抗指數（HOMA-IR）。（2）肝臟穿刺病理檢查：肝穿刺組織的獲取由經驗豐富的醫師在B超引導下進行穿刺。活檢組織取出后立即用10 %福爾馬林固定。經HE染色后由兩位經驗豐富的病理學醫師對組織進行半定量評分后按NAS積分進行分組。NAS積分（0～8分）：①肝細胞脂肪變：0分（＜5%）；1 分（5%～33%）；2 分（34%～66%）；3分（＞66%）。②小葉內炎癥（20倍鏡計數壞死灶）：0分（無）；1分（＜2個）；2分（2～4個）；3分（＞4 個）。③肝細胞氣球樣變：0分：無；1分：少見；2分：多見。NAS為半定量評分系統，將肝細胞脂肪變、小葉內炎癥及肝細胞氣球樣變得分累加得到NAS 積分，＜5分為非NASH組，≥5分為NASH組。纖維化評分＜3分的為非進展期纖維化組，≥3分為進展期纖維化組。

1.3 統計學方法 采用SPSS24.0統計軟件。計量資料以（x±s）表示，計數資料以百分比表示。兩組間比較采用兩獨立樣本t檢驗，多組間比較采用單因素方差分析。相關性分析采用Pearson相關性分析。P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 三組一般資料比較 見表1。

2.2 非進展期肝纖維化組和進展期肝纖維化組臨床特征及生化指標比較 見表2。

表2 兩組臨床特征及生化指標比較（x±s）

2.3 血清IL-1RA水平生化指標和NAS積分的相關性分析 見表3。血清IL-1RA與ALT、GGT、TG、LDL呈正相關（P＜0.01）。血清IL-1RA與NAS積分呈負相關（P＜0.01）

表3 血清IL-1RA水平與生化指標以及NAS的相關性

3 討論

本資料顯示，NAFLD患者的BMI、ALT、TG、GGT較正常對照組明顯升高，HDL則明顯降低。NAFLD患者中NASH患者的ALT、AST、GGT更高。血清IL-1RA水平與ALT、GGT、TG、LDL呈正相關，與NAS評分呈負相關，表明血清IL-1RA 水平與NAFLD 病程進展及病變嚴重程度有關，非NASH 組血清IL-1RA明顯高于NASH 組，差異有統計學意義。

NASH的發病機制，目前認為是以脂肪酸沉積及氧應激炎癥因子作用的“二次打擊學說”［8］。TLR信號轉導通路的激活是二次打擊的重要信號通路。TLR信號轉導通路的激活來源于細胞漿Toll/IL-1受體（TIR）的結構域，該結構域與TIR結構域包含的接頭蛋白 MyD88發生相互作用。經過配體的刺激，通過兩個分子死亡結構域的相互作用，MyD88將IL-1受體相關激酶-4（IRAK-4）吸引到TLRs。IRAK-1經磷酸化而激活并與TRAF6發生作用，從而激活 IKK復合體并導致MAP激酶（JNK，p38 MAPK）和NF-κB的激活［9-10］。

IL-1RA是細胞因子中唯一的一種天然拮抗劑［11］，是由單核巨噬細胞分泌的分子量為22-25KD的酸性糖蛋白。在結構上，IL-1RA與IL-1有同源性，能夠競爭性地與IL-1受體結合且不激活靶細胞，能夠消除或減輕IL-1 的生物活性從而影響機體的病理生理現象，能夠在NAFLD 病程進展中炎癥發生發展中發揮抗炎的作用。

Larsen CM［12］等研究顯示，在2型糖尿病者中使用IL-1RA，能降低血糖，且減輕胰島β細胞的炎癥反應。Shen J［13］等的研究證明，在慢性胰腺炎小鼠體內重組的IL-1RA 能夠抑制IL-1 的活性，減輕胰腺炎癥及纖維化水平，表明在胰腺炎癥中IL-1RA起顯著抗炎作用。Petrasek J［14］等研究認為，在酒精性脂肪肝小鼠注射IL-1RA能夠減輕肝臟脂肪變，減輕肝臟炎癥。

綜上所述，血清IL-1RA 水平與NAFLD 及NASH病程進展及程度密切相關，NAFLD患者血清白細胞介素-1受體拮抗劑濃度升高與NASH患者血清白細胞介素-1受體拮抗劑濃度相對不足，對TLR 信號轉導通路的抑制不足，可能是NAFLD發展至NASH階段的關鍵因素。可以認為抑炎因子IL-1RA在NAFLD早期出現升高，而后期持續分泌不足可能是NASH持續進展的重要原因。

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